[發明專利]基于鉍-牛血清白蛋白-納米鉑的過氧化氫檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201610063564.9
• 申請日: 2016-01-29
• 公開（公告）號: CN105628700B
• 公開（公告）日: 2018-09-11
• 發明（設計）人: 陳偉;沈奕珉;施小瓊;鄧豪華;鄭曉晴
• 申請（專利權）人: 福建醫科大學
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/31
• 代理公司: 福州智理專利代理有限公司 35208
• 代理人: 王義星

1.一種基于鉍-牛血清白蛋白-納米鉑模擬過氧化物酶的過氧化氫檢測方法，其特征是將過氧化氫，3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺鹽酸鹽，鉍-牛血清白蛋白-納米鉑水溶液混合后恒溫孵育，加入0.5 mol/L的硫酸終止反應，反應產物為黃色，最大吸收波長為450 nm；所述的鉍-牛血清白蛋白-納米鉑模擬過氧化物酶由以下步驟制得：在5 mL濃度為50 mg/mL的牛血清白蛋白水溶液中加入5 mL濃度為16 mmol/L氯鉑酸溶液和0.5 mL濃度為1.5 mol/L氫氧化鈉溶液，混勻后水浴80 ℃下反應2 h，反應后溶液裝入截止分子量為3k的超濾管，6000r/min離心超濾，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-納米鉑水溶液，將牛血清白蛋白-納米鉑水溶液冷凍干燥得到牛血清白蛋白-納米鉑粉末，在0.6 mL濃度為23.8 mg/mL的牛血清白蛋白-鉑水溶液中加入0.6 mL濃度為0.5 mmol/L的硝酸鉍溶液和1.8 mL 濃度為10 mmol/L，pH=7的磷酸鹽緩沖液，混勻后水浴80 ℃下反應2.5 h，反應后溶液裝入截止分子量為3k的超濾管，6000 r/min離心超濾，并水洗3次，得到鉍-牛血清白蛋白-納米鉑的水溶液；將鉍-牛血清白蛋白-納米鉑水溶液冷凍干燥得到鉍-牛血清白蛋白-納米鉑粉末。

2.根據權利要求1所述的基于鉍-牛血清白蛋白-納米鉑模擬過氧化物酶的過氧化氫檢測方法，其特征是能根據顯色體系溶液顏色判斷過氧化氫的濃度。

3.根據權利要求1所述的基于鉍-牛血清白蛋白-納米鉑模擬過氧化物酶的過氧化氫檢測方法，其特征是能根據酶標儀450 nm處的吸光度以檢測過氧化氫的濃度。

4.根據權利要求1或3所述的基于鉍-牛血清白蛋白-納米鉑模擬過氧化物酶的過氧化氫檢測方法，其特征是檢測線性范圍為0.5~30 μmol/L，檢測限為0.068 μmol/L。

5.根據權利要求1或2或3所述的基于鉍-牛血清白蛋白-納米鉑模擬過氧化物酶的過氧化氫檢測方法，其特征是在96孔板中加入100 μL過氧化氫溶液，10 μL濃度為8 mmol/L 的3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺鹽酸鹽，10 μL濃度為4.76 mg/mL鉍-牛血清白蛋白-納米鉑水溶液以及80 μL濃度為100 mmol/L，pH=5的磷酸鹽緩沖液，混合后在37℃恒溫孵育15 min，加入50 μL濃度為 0.5 mol/L的硫酸終止反應，目視觀察顏色的變化或通過酶標儀測定450nm波長處的吸光度。

6.根據權利要求1或2或3所述的基于鉍-牛血清白蛋白-納米鉑模擬過氧化物酶的過氧化氫檢測方法，其特征是可用于測定細胞外過氧化氫濃度。

7.一種基于鉍-牛血清白蛋白-納米鉑模擬過氧化物酶的過氧化氫檢測試劑盒，其特征是試劑盒中含有3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺鹽酸鹽溶液、鉍-牛血清白蛋白-納米鉑溶液、硫酸溶液和過氧化氫溶液，所述的3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺鹽酸鹽溶液作為a液，鉍-牛血清白蛋白-納米鉑溶液作為b液，硫酸溶液作為終止液，過氧化氫溶液作為標準液。

8.根據權利要求7所述的基于鉍-牛血清白蛋白-納米鉑模擬過氧化物酶的過氧化氫檢測試劑盒，其特征是所述a液中含有濃度為8 mmol/L 的3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺鹽酸鹽水溶液；所述b液中含有用濃度為100 mmol/L，pH=5的磷酸鹽緩沖液配制成的濃度為0.53 mg/mL的鉍-牛血清白蛋白-納米鉑溶液；所述終止液中含有濃度為0.5 mol/L的硫酸溶液；所述標準液中含有濃度為1，2，10，20，30，40，60 μmol/L的過氧化氫水溶液。