[發(fā)明專利]雜交蘭與西藏虎頭蘭雜交種子無菌播種育苗的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610051245.6
• 申請日: 2016-01-26
• 公開（公告）號: CN105706900B
• 公開（公告）日: 2021-03-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鐘淮欽;陳南川;黃敏玲;陳少云;葉秀仙;林榕燕
• 申請（專利權(quán)）人: 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02;A01H4/00
• 代理公司: 福州市鼓樓區(qū)京華專利事務(wù)所(普通合伙) 35212
• 代理人: 林曉琴

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種遠(yuǎn)緣雜交育種和雜交種子無菌播種繁殖的方法，特別指 一種雜交蘭與西藏虎頭蘭雜交種子無菌播種育苗的方法。

背景技術(shù)

雜交蘭(HybridCymbidium)是國蘭與大花蕙蘭種間雜交培育而成的蘭花 新種類，集國蘭的植株小巧、幽香、典雅和大花蕙蘭的花大、色純靚麗等特 性，花期長，有花觀花、無花觀葉，具有較高的觀賞和經(jīng)濟(jì)價值，成為了近 幾年來年宵及日常消費(fèi)市場的新寵，消費(fèi)份額逐年增長，市場潛力巨大。

西藏虎頭蘭(CymbidiumtracyanumL.)是蘭科蘭屬附生類多年生草本植 物。原產(chǎn)我國貴州西南部、四川、云南西南部至東南部和西藏東南部，緬甸、 泰國也有分布，現(xiàn)廣泛栽培。葉長碧綠，花姿粗曠，色彩鮮艷，花型整齊且 質(zhì)地堅(jiān)挺，經(jīng)久不凋，具香味，抗逆性強(qiáng)，是世界著名的蘭花新星。

蘭屬(Cymbidium)的種間遠(yuǎn)緣雜交存在親和障礙，種間雜種胚通常發(fā)育 不良、無胚乳，雜交種子在自然條件下萌發(fā)困難，不易成苗，通過無菌播種 人工培養(yǎng)，能夠在短期內(nèi)獲得大量幼小植株。然而不同雜種胚的萌發(fā)差異較 大，直接影響了蘭屬種間遠(yuǎn)緣雜交育種效率。近年來，國內(nèi)已有部分蘭屬種 間雜交研究的報(bào)道，但建立的技術(shù)重復(fù)性差。因此，深入研究不同類型蘭屬 植物種間雜交種子的萌發(fā)與發(fā)育特性，將為進(jìn)一步開展蘭屬新品種培育奠定 基礎(chǔ)。

鑒于消費(fèi)者對“新、奇、特、香”蘭花新優(yōu)品種的追求，培育更多具有自 主知識產(chǎn)權(quán)的蘭花新品種是植物育種界研究的一個熱門課題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題，在于提供一種雜交蘭與西藏虎頭蘭雜交種子 無菌播種育苗的方法。

本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的：一種雜交蘭與西藏虎頭蘭雜交種子無菌播種育苗 的方法，包括以下步驟：

(1)人工授粉：以雜交蘭‘臺北小姐’為母本，西藏虎頭蘭為父本進(jìn) 行雜交，取母本開花后2～4d的花朵，用消毒過的鑷子去除唇瓣及柱頭上的 花粉塊，取父本完全張開的花朵的花粉塊置放于母本柱頭蕊腔內(nèi)；剪取授粉 205d后未開裂的成熟蒴果進(jìn)行無菌播種；

(2)果莢預(yù)處理與種子播種：

將成熟蒴果進(jìn)行預(yù)處理，然后將成熟蒴果的種子播種于萌發(fā)培養(yǎng)基中； 所述萌發(fā)培養(yǎng)基為1/2MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖20g/L+活性炭 1.0g/L+瓊脂5.8g/L；

(3)種子萌發(fā)：將種子接種于所述萌發(fā)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為25 ±2℃，光照強(qiáng)度1200Lux±100，光照時間12h/d；

(4)根狀莖的增殖與分化培養(yǎng)：選擇生長狀態(tài)相近的種子萌發(fā)形成的根 狀莖，在無菌條件下分切成長0.6～0.8cm的切段，接種于1/2MS+6-BA 2.0mg/L+NAA1.0mg/L+香蕉泥80g/L+蔗糖20g/L+活性炭1.5g/L+瓊脂5.8g/L 的增殖與分化培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度25±2℃，光照強(qiáng)度1500Lux±100， 光照時間12h/d；

(5)壯苗生根培養(yǎng)：將根狀莖分化形成的2.5～3.5cm的幼苗小心切下， 分選后剪除老根，僅留1～2條短嫩新根，接種于MS+6-BA1.0mg/L+NAA 2.0mg/L+蔗糖25g/L+香蕉泥100g/L+活性炭2.5g/L+瓊脂5.8g/L的生根壯苗培 養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度25±2℃，光照強(qiáng)度1500Lux±100，光照時間12h/d；

(6)煉苗移栽：待生根苗長至6.0～7.0cm、葉片3～4片、根3～4條 時，將瓶苗從培養(yǎng)室移至溫室大棚，進(jìn)行煉苗，繼續(xù)生長30d，溫室大棚遮 光率60％，溫度保持25±2℃，空氣濕度保持60％～70％；

出瓶種植前3～5d，打開瓶蓋適應(yīng)外界環(huán)境，然后取出小苗，洗凈根部 培養(yǎng)基，用50％多菌靈可濕性粉劑1000倍稀釋溶液浸泡3min，陰涼處自然 晾干后種植于發(fā)酵過的基質(zhì)中，用惡霉靈溶液噴灌植株及植料；2d后澆透 水，以后按預(yù)定周期進(jìn)行葉面噴水和噴灑0.1％多菌靈殺菌劑。

進(jìn)一步地，所述步驟(2)中，將成熟蒴果進(jìn)行預(yù)處理的具體方法如下：