[發(fā)明專(zhuān)利]一種桃膠多糖降解產(chǎn)物PGP?1及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610043173.0
• 申請(qǐng)日: 2016-01-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105753998B
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-04-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 冉艷紅;劉天祥;李弘劍;周天鴻;王偉;楊曉萍
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 暨南大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C08B37/00
• 分類(lèi)號(hào): C08B37/00;C12P19/14;C12P19/04;A61P1/00;A61P35/00;A61P39/06;C12R1/01
• 代理公司: 廣州粵高專(zhuān)利商標(biāo)代理有限公司44102
• 代理人: 任重

1.一種桃膠多糖降解產(chǎn)物PGP-1，其特征在于，所述PGP-1中不含有中性多糖，所述PGP-1的分子量分布在1×10⁵～1×10⁶范圍內(nèi)，所述PGP-1由阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖組成；所述阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖的摩爾比為 0.637:0.054:0.073:0.022:0.556。

2.一種權(quán)利要求1所述的桃膠多糖降解產(chǎn)物PGP-1的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

S1. 將菌種活化，得到種子液；

S2. 將S1中所得種子液接種至桃膠培養(yǎng)基，進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，S2中發(fā)酵溫度為20~40℃，初始桃膠濃度4~8%，培養(yǎng)基pH為4~6，搖床轉(zhuǎn)速為160~200rpm，得到發(fā)酵液；

S3. 將S2中所得發(fā)酵液進(jìn)行分離純化，得到所述PGP-1；

所述S1中菌種為微桿菌A5，所述微桿菌A5于2009年8月7日保存于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，其保藏編號(hào)為CCTCC NO:M209174；

所述S3中包括如下步驟：

S31. 將S2中所得發(fā)酵液離心，得到桃膠多糖液，然后過(guò)濾，依次將過(guò)濾產(chǎn)物經(jīng)過(guò)脫蛋白、醇沉、冷凍干燥后，得到冷凍干燥產(chǎn)物；

S32. 將S31中所得干燥產(chǎn)物采用DEAE-Cellulose 52陰離子交換柱，并經(jīng)NaCl溶液按照以下濃度進(jìn)行梯度洗脫：0.1mol/L、0.2mol/L、0.3mol/L、0.4mol/L、0.5mol/L、0.6mol/L、0.7mol/L、0.8mol/L、0.9mol/L、1.0mol/L；洗脫液濃縮、透析、除雜、冷凍干燥后即得所述PGP-1。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述S2中發(fā)酵溫度為30℃，初始桃膠濃度8%，培養(yǎng)基pH為4，搖床轉(zhuǎn)速為160rpm，接種量為3%。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述S1中菌種活化為將所述菌種在4℃保存斜面菌種，營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板劃線，37℃倒置培養(yǎng)24h，從平板挑單克隆轉(zhuǎn)接到LB試管培養(yǎng)基，于200rpm轉(zhuǎn)速，37℃下震蕩培養(yǎng)12h。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述S31中脫蛋白采用Sevage法脫蛋白，所述S31中醇沉為采用75%的乙醇；

所述S32中濃縮為采用聚乙二醇8000進(jìn)行濃縮處理，所述透析為采用截留分子量200的透析袋。

6.權(quán)利要求1所述的桃膠多糖降解產(chǎn)物PGP-1在制備促進(jìn)腸道益生菌和天然多糖抗氧化劑、抗腫瘤產(chǎn)品中的應(yīng)用。

7.權(quán)利要求1所述的桃膠多糖降解產(chǎn)物PGP-1在制備抑制血紅細(xì)胞、Hela細(xì)胞、乳腺癌MCF-7細(xì)胞聚集產(chǎn)品中的應(yīng)用。

8.一種半乳凝集素-3抑制劑，其特征在于，含有權(quán)利要求1所述的桃膠多糖降解產(chǎn)物PGP-1；

所述PGP-1抑制半乳凝集素-3介導(dǎo)的紅細(xì)胞聚集的最小抑制濃度為25μg/ml；所述PGP-1抑制半乳凝集素-3介導(dǎo)的Hela細(xì)胞聚集的最小抑制濃度為400μg/ml；所述PGP-1抑制半乳凝集素-3介導(dǎo)的MCF-7細(xì)胞聚集的最小抑制濃度為200μg/ml。