[發(fā)明專利]一種提取核酸的方法及試劑盒有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201610023898.3 | 申請日： | 2016-01-14 |
| 公開（公告）號： | CN105462961B | 公開（公告）日： | 2019-04-19 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 李民;周如華;石云杰;張健;王鑫;張偉;李鵬飛;畢萬里;王志峰 | 申請（專利權(quán)）人： | 蘇州市公安局;蘇州新海生物科技股份有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京集佳知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227 | 代理人： | 常亮 |
| 地址： | 215131 *** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 提取 核酸 方法 試劑盒 | ||
1.一種提取核酸的方法，其特征在于，包括：
步驟1、向待提取樣品中加入裂解液裂解釋放核酸分子，然后加入吸附核酸的材料以及結(jié)合液對核酸分子進行吸附，獲得核酸-吸附材料復(fù)合物；
步驟2、將核酸-吸附材料復(fù)合物洗滌后，用含有表面活性劑TritonX-100或SDS的水溶液作為洗脫液進行洗脫，收集洗脫下來的溶液，獲得目標(biāo)核酸分子，所述洗脫液中表面活性劑的質(zhì)量百分比濃度為0.1-1％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，所述裂解液為離液試劑、蛋白酶、堿、表面活性劑中的一種或兩種以上。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述方法，其特征在于，所述裂解液為離液試劑和蛋白酶。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，所述結(jié)合液包含離液試劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述方法，其特征在于，所述結(jié)合液為離液試劑和異丙醇。
6.根據(jù)權(quán)利要求2-5任意一項所述方法，其特征在于，所述離液試劑為鹽酸胍，異硫氰酸胍，碘化鈉，尿素中的一種或兩種以上。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，所述吸附核酸的材料為硅珠，磁珠，硅藻土或硅膠。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，所述核酸分子為DNA、RNA或兩者的混合。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，所述洗滌采用乙醇洗滌。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，所述洗脫在50-70℃下洗脫5-20min。
11.一種提取核酸的試劑盒，其特征在于，包括：
裂解液、結(jié)合液、核酸吸附材料和洗脫液，所述洗脫液為包含表面活性劑TritonX-100或SDS的水溶液，所述洗脫液中表面活性劑的質(zhì)量百分比濃度為0.1-1％。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述試劑盒，其特征在于，所述裂解液為離液試劑、蛋白酶、堿、表面活性劑中的一種或兩種以上。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述試劑盒，其特征在于，所述裂解液為離液試劑和蛋白酶。
14.根據(jù)權(quán)利要求11所述試劑盒，其特征在于，所述結(jié)合液包含離液試劑。
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述試劑盒，其特征在于，所述結(jié)合液為離液試劑和異丙醇。
16.根據(jù)權(quán)利要求12-15任意一項所述試劑盒，其特征在于，所述離液試劑為鹽酸胍，異硫氰酸胍，碘化鈉，尿素中的一種或兩種以上。
17.根據(jù)權(quán)利要求11所述試劑盒，其特征在于，所述吸附核酸的材料為硅珠，磁珠，硅藻土或硅膠。
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