[發明專利]一種雞TGFBR2基因甲基化檢測方法及其應用在審
| 申請號： | 201610016805.4 | 申請日： | 2016-01-11 |
| 公開（公告）號： | CN105483263A | 公開（公告）日： | 2016-04-13 |
| 發明（設計）人： | 李顯耀;王莎莎;王巧巧 | 申請（專利權）人： | 山東農業大學 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 271018 *** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 tgfbr2 基因 甲基化 檢測 方法 及其 應用 | ||
【權利要求書】：
1.一種雞TGFBR2基因甲基化檢測方法，其特征在于：所采用的方法為巢式PCR，所采用 的雞TGFBR2基因特異性的甲基化引物，其序列如下表所示：
上述引物前一對為第一對引物，后一對為第二對引物，利用上述2對特異性引物對經亞 硫酸鹽修飾處理后的雞的全基因組基因DNA進行巢式PCR，兩次反應條件一致，其PCR擴增反 應體系如下，每20μL體系為：
PCR擴增條件為：
所獲得的擴增產物進行大腸桿菌克隆，轉化成功后直接進行測序，以確定甲基化是否 受到激活；
其中所述的亞硫酸鹽修飾處理采用QIAGEN公司甲基化修飾試劑盒對雞基因組DNA進行 亞硫酸鹽修飾處理，使未發生甲基化的胞嘧啶位置轉換成尿嘧啶，而發生甲基化位點因5′- 甲基胞嘧啶的保護而不發生變化。
2.權利要求1所述的雞TGFBR2基因甲基化檢測方法在雞抗腸炎沙門氏菌感染中的應 用。
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