[發明專利]適用于時間分辨熒光免疫法的加樣方法

有效

• 申請號: 201610016466.X
• 申請日: 2016-01-08
• 公開（公告）號: CN105445451B
• 公開（公告）日: 2017-04-12
• 發明（設計）人: 陳建起;鮑冬芹;譚玉華
• 申請（專利權）人: 廣州市豐華生物工程有限公司
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53
• 代理公司: 廣州三環專利代理有限公司44202
• 代理人: 郝傳鑫,宋靜娜

1.一種適用于時間分辨熒光免疫法的加樣方法，其特征在于：包括：將樣本加入固相載體包被反應板中，向每孔中加入緩沖液，然后加入標記物工作液，所述標記物工作液的濃度允許在所述緩沖液與標記物工作液的體積均不大于50μL時與所述樣本中的待測物質充分結合。

2.如權利要求1所述的適用于時間分辨熒光免疫法的加樣方法，其特征在于：所述樣本中的待測物質為甲胎蛋白、新生兒促甲狀腺激素、風疹病毒IgM、弓形蟲IgM、巨細胞病毒IgM和單純皰疹病毒IgM中的至少一種。

3.如權利要求1所述的適用于時間分辨熒光免疫法的加樣方法，其特征在于：當所述樣本中的待測物質為甲胎蛋白時，所述加樣方法為：將樣本加入固相載體包被反應板中，向每孔中加入20～30μL緩沖液，然后加入3～7μL標記物工作液；其中，所述標記物工作液通過將甲胎蛋白單克隆抗體與鑭系元素離子螯合物按5:1～5的質量比混合制得母液，再將母液用緩沖液稀釋200～300倍而成。

4.如權利要求3所述的適用于時間分辨熒光免疫法的加樣方法，其特征在于：所述緩沖液的制備方法為：在含0.01g/L的乙二胺四乙酸二鈉的50mmol/L、pH7.8的Tris-Hcl溶液中加入10.0ml/L～200.0ml/L的小牛血清、牛γ-球蛋白和鼠IgG中的至少一種。

5.如權利要求1所述的適用于時間分辨熒光免疫法的加樣方法，其特征在于：當所述樣本中的待測物質為新生兒促甲狀腺激素時，所述加樣方法為：將樣本加入固相載體包被反應板中，向每孔中加入40～50μL緩沖液，然后加入40～50μL標記物工作液；其中，所述標記物工作液通過將新生兒促甲狀腺激素單克隆抗體與鑭系元素離子螯合物按10：5～10的質量比混合制得母液，再將母液用緩沖液稀釋300～400倍而成。

6.如權利要求5所述的適用于時間分辨熒光免疫法的加樣方法，其特征在于：所述緩沖液的制備方法為：在含0.01g/L的乙二胺四乙酸二鈉的50mmol/L、pH7.8的Tris-Hcl溶液中加入10.0ml/L～200.0ml/L的小牛血清、Tween40和鼠IgG中的至少一種。

7.如權利要求1所述的適用于時間分辨熒光免疫法的加樣方法，其特征在于：當所述樣本中的待測物質為風疹病毒IgM時，所述加樣方法為：將樣本加入固相載體包被反應板中，再立即向每孔中加入20～30μL生物素化抗原，孵育5～10min，再向每孔中加入20～30μL緩沖液，然后加入20～30μL標記物工作液；其中，所述標記物工作液通過將鏈霉親和素與鑭系元素離子螯合物按1:1～5的質量比混合制得母液，再將母液用緩沖液稀釋400～800倍而成。

8.如權利要求7所述的適用于時間分辨熒光免疫法的加樣方法，其特征在于：所述緩沖液的制備方法為：在含0.01g/L的乙二胺四乙酸二鈉的50mmol/L、pH7.8的Tris-Hcl溶液中加入10.0ml/L～200.0ml/L的小牛血清和鼠IgG中的至少一種。