[發明專利]一種與甘藍型油菜含油量QTL緊密連鎖的分子標記

有效

• 申請號: 201610013828.X
• 申請日: 2016-01-10
• 公開（公告）號: CN105505925B
• 公開（公告）日: 2018-05-22
• 發明（設計）人: 周永明;劉晟;范楚川;楊慶勇
• 申請（專利權）人: 華中農業大學
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/6895
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務所 42001
• 代理人: 張紅兵

本發明屬于油菜分子標記制備技術領域，具體涉及一種與甘藍型油菜含油量QTL緊密連鎖的分子標記。本發明篩選得到可以單獨使用或/和組合使用的新的含油量QTL緊密連鎖的分子標記OilA5，其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：5或6所示。構建得到檢測分子標記OilA5的引物對OilA5?A、OilA5?G，其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：1?4所述。本發明的分子標記可在甘藍型油菜含油量性狀改良中的分子標記輔助選擇以及在含油量性狀位點精細定位和圖位克隆中應用。

技術領域

本發明屬于油菜分子標記制備技術領域，具體涉及一種與甘藍型油菜含油量QTL緊密連鎖的分子標記，該分子標記或其組合可用于甘藍型油菜含油量性狀改良中的標記輔助選擇以及在含油量性狀位點精細定位和圖位克隆中應用。

背景技術

油菜作為世界上最重要的油料作物之一，每年能夠產生大約兩千六百萬噸的植物油，約占植物油生產總量的15％。油菜生產以收獲油菜籽后榨成油為主要目的，提高其產油量是油菜生產的最終目標。油菜產油量取決于兩個因素：菜籽產量及菜籽含油量。與過去幾十年中產量的較快速度增長相比，我國油菜新品種含油量卻提高較少。因此，通過提高菜籽含油量來實現產油量的提高是油菜育種的主要目標。雖然三酰甘油(油脂的主要儲存形式)的合成途徑已經很清楚，但是對于油料作物，包括油菜含油量變異的遺傳及分子機制，我們仍缺乏深入的了解。

關于含油量的遺傳研究，前人已經定位到很多相關的QTL(Quantitative TraitLoci)。由于群體材料、群體種植環境等各不相同，所以定位的QTL也存在差異。Delourme等(2006)利用兩個Double Haploid(DH)群體定位了24個和含油量有關的QTLs，分別可解釋表型變異的4.6％-14.3％，只有一個QTL在兩群體A3連鎖群上能同時檢測到。Wang等(2013)利用含油量差異極大的兩個材料構建的DH群體在8個環境中定位到24個與含油量有關的QTLs，分別可解釋表型變異的3.6％-11.7％；通過整合前人定位的含油量QTLs，發現存在47個QTLs與含油量有關。另外，Jiang等(2014)利用TN DH群體在15個環境中定位了41個和含油量有關的QTLs，分別可解釋表型變異的1.6％-24.5％；通過整合前人定位的含油量QTLs，發現存在46個QTLs與含油量有關。

綜上所述，油菜含油量是由多基因控制的復雜數量性狀，表現出環境和材料特異性。在油菜中至少存在46個控制含油量的QTLs，這些QTLs遍布在甘藍型油菜的19條染色體上。通過不同連鎖群體的QTL定位，發掘新的控制含油量的QTLs對于解析含油量的遺傳變異是十分必要。在此基礎上開發緊密連鎖的分子標記能加速油菜含油量性狀的改良進程。

發明內容

本發明的目的是發掘油菜含油量新的QTL及開發緊密連鎖的共顯性分子標記，并將其用于油菜高含油量性狀的選育。這些分子標記可應用于甘藍型油菜含油量性狀改良中的分子標記輔助選擇以及在含油量性狀QTL精細定位和圖位克隆中的應用，從而加速油菜含油量性狀的改良進程，提高油菜育種的準確性和選擇效率。

本發明是通過以下方案實現的。

a)以甘藍型油菜品種中雙11號(中國農業部主管，全國農作物品種審定委員會審定，國審油2008030；2013年測定的含油量為51.4％)與低含油量品系甲A254(2013年測定的含油量45.3％，該材料的來源參見：中國發明專利授權；專利權人：華中農業大學；專利號ZL2009102734352；發明名稱：甘藍型油菜高油酸分子標記及制備方法與應用；公開號CN101824472A；公開日2010.09.08)雜交，得到F1；

b)由雜種F1的花蕾通過小孢子培養獲得分離的DH系群體；

c)對DH系群體的每一個株系進行分子標記分析，并對每個株系的基因型進行描述；具體方法：分離DH群體每一個株系的基因組DNA，采用SSR(簡單序列重復)、InDel(插入缺失)和SNP(單核苷酸多態性)引物進行PCR擴增，獲得每個株系的基因型；