[發明專利]用于檢測和消除皮膚癌細胞的特異性光免疫治療診斷試劑及其制備方法

在審

• 申請號: 201580080570.9
• 申請日: 2015-06-16
• 公開（公告）號: CN108136017A
• 公開（公告）日: 2018-06-08
• 發明（設計）人: 斯蒂芬·巴斯;侯賽因·艾哈邁德·法瓦茲;賴納·費舍爾
• 申請（專利權）人: 弗勞恩霍夫應用研究促進協會;亞琛工業大學
• 主分類號: A61K41/00
• 分類號: A61K41/00;A61K47/68;A61K47/64;A61P35/00
• 代理公司: 上海恒慧知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 31317
• 代理人: 張寧展

一種用于檢測和消除皮膚癌細胞的特異性光免疫治療診斷試劑及其制備方法，主要涉及采用簡單、可控和有效的方式生成均勻的和特異性的光免疫治療診斷試劑的新方法。這一方法結合了分子光學成像、光動力療法和采用SNAP標簽技術的免疫療法。

技術領域

本發明主要涉及一種用于檢測和消除皮膚癌細胞的新的特異性光免疫治療診斷方法。

本發明還涉及采用簡單、可控和有效的方式生成均勻的和特異性的光免疫治療診斷試劑的新方法。這一方法結合了分子光學成像、光動力療法和采用SNAP標簽技術的免疫療法。

術語“治療診斷學(Theranostics)”于2002年由Funkhouser首次提出，其定義了一種將診斷和治療相結合的試劑。治療診斷技術主要用于癌癥的治療，并廣泛被認為通過改善癌癥的預后和管理并舉，對病前、病中以及病后的健康護理具有重要的作用。

目前的治療診斷技術仍然依靠非特異性被動的腫瘤靶向策略，這一策略具有雜亂無章的效果，因此會導致腫瘤和非腫瘤細胞均受到損傷。

本發明公開的治療診斷技術與上述治療方法形成了對比。本發明通過一種可控的方式生成了高度均勻的，標準化的以及醫學上可接受的光免疫偶聯物。因此，采用本發明公開的方法生成的光免疫治療診斷試劑能夠具有均勻的藥代動力學和生物分布特性，這在現有技術中尚不可知。

背景技術

目前，皮膚癌是世界范圍內最常見的人類癌癥的診斷類型，美國每年有超過350萬例的新診斷病例。近年來在改善皮膚癌的預后和管理方面取得了重大進展。盡管如此，近幾十年來黑色素瘤和非黑色素瘤皮膚癌的發病率和死亡率仍有所增加。

非黑色素瘤皮膚癌的一種治療方法是光動力療法(PDT)。PDT對于改善非黑素瘤皮膚癌的治療效果具有巨大的應用前景；幾種光敏劑已被批準用于人類的治療，如卟吩姆鈉(光卟啉)、間-四氫氯苯(Foscan)和5-氨基乙酰丙酸(美特維克)。

到目前為止，PDT腫瘤靶向治療依賴于腫瘤組織中光敏劑的被動積累，這限制了PDT的有效應用。此外，光敏化的這些形式也會損害健康組織，結果導致了持續的皮膚光敏性。

在理解癌癥發展的分子機理方面取得的長足進展為開發針對關鍵疾病生物標記物的靶向治療鋪平了道路。因此，將靶向性治療與PDT結合形成了所謂的光免疫療法(PIT)。

基于這一原則，不同的光敏劑與細胞特異性單克隆抗體及其衍生物偶聯，可用于專門以某些特定的腫瘤細胞群作為靶向目標。此外，光敏劑的一些成像特性，也可用于診斷，即預先篩選腫瘤，監測光敏劑的組織積累和量化治療效果。

盡管早在1995年PIT就被提出可用于治療惡性皮膚癌，同時幾種光敏劑以及抗體已被批準用于個別人類患者的治療，但PIT至今還沒有進入臨床使用階段。

這主要是由于在生成高度均勻的，標準化的以及醫學上可接受的光免疫偶聯物上的失敗造成的，其原因是在抗體和光敏劑分子結合時采用了隨機的結合方式。

本發明公開的技術采用了如SNAP標簽之類的自標簽蛋白質，在高功效以及1:1的化學計量比的生理條件下，其能夠為蛋白質與諸多化學實體之間可控和強勁的偶聯提供一個簡單的解決途徑。

發明內容

本發明公開的技術涉及一種新的光免疫治療診斷試劑，以及采用簡單、可控和有效的方式生成均勻的和特異性的光免疫治療診斷試劑的新方法。這一方法結合了分子光學成像、光動力療法和采用SNAP標簽技術的免疫療法。

本發明公開的技術涉及一種免疫治療診斷方法，該方法通過將700DX N-羥基琥珀酰亞胺酯(IR700)光敏劑與采用SNAP標簽技術的抗EGFR單鏈可變片段抗體(scFv-425)偶聯，從而能夠靶向瞄準表皮生長因子受體(EGFR)表達的皮膚癌細胞。

一方面，本發明公開的光免疫治療診斷試劑如方程式1所示：