[發(fā)明專(zhuān)利]miRNA對(duì)m6A修飾水平的調(diào)控方法及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201580074289.4
• 申請(qǐng)日: 2015-01-26
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107207557B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-07-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周琪;楊運(yùn)桂;王秀杰;陳同;張映;郝亞娟;李苗苗;王猛
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院動(dòng)物研究所;中國(guó)科學(xué)院北京基因組研究所;中國(guó)科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所
• 主分類(lèi)號(hào): C07H21/02
• 分類(lèi)號(hào): C07H21/02;A61K31/7105
• 代理公司: 北京中政聯(lián)科專(zhuān)利代理事務(wù)所(普通合伙) 11489
• 代理人: 劉玉玲

公開(kāi)了一種miRNA對(duì)RNA分子上的6?甲基腺嘌呤(N6?methyladenosine,m6A)修飾水平的調(diào)控方法及相關(guān)的進(jìn)一步應(yīng)用。通過(guò)提高或降低miRNA可以相應(yīng)的提高或者降低m6A修飾水平，并進(jìn)一步調(diào)節(jié)m6A修飾介導(dǎo)的功能。還公開(kāi)了一種通過(guò)調(diào)節(jié)m6A而影響細(xì)胞重編程的調(diào)節(jié)方法及其利用的調(diào)節(jié)劑。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于細(xì)胞生物技術(shù)領(lǐng)域，具體的，涉及一種通過(guò)miRNA對(duì)RNA分子上的 6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m⁶A)修飾水平的調(diào)控方法及相關(guān)的進(jìn)一步應(yīng)用。

背景技術(shù)

RNA轉(zhuǎn)錄后的修飾為RNA功能的多樣化奠定了化學(xué)基礎(chǔ)，2011年更新的RNA修飾數(shù)據(jù)庫(kù)RNAMDB共收錄了109種RNA的修飾形式，其中甲基化修飾占80％。6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m⁶A)，是發(fā)生在堿基A第六位N原子上的甲基化，作為真核生物中最常見(jiàn)的一種RNA轉(zhuǎn)錄后修飾，因其含量豐富，且保守性強(qiáng)，近年來(lái)得到了廣泛的關(guān)注和研究。m⁶A由一個(gè)多組份甲基轉(zhuǎn)移酶復(fù)合體催化生成，這個(gè)復(fù)合體包括至少三個(gè)核心蛋白，METTL3,METTL14和WTAP。m⁶A修飾可以被RNA去甲基化酶移除，已經(jīng)鑒定出的兩個(gè)去甲基化酶分別是FTO和ALKBH5。YTH結(jié)構(gòu)域蛋白(YTHDF1–3) 是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的與m⁶A及ssRNA結(jié)合的蛋白家族，其中YTHDF2與m⁶A的結(jié)合能力最強(qiáng)。人類(lèi)YTHDF2“閱讀器”蛋白通過(guò)選擇性識(shí)別m⁶A調(diào)控了mRNA降解。

雖然m⁶A修飾不影響被修飾的腺嘌呤的編碼能力及與胸腺嘧啶或尿嘧啶互補(bǔ)配對(duì)的能力,但是它會(huì)影響非經(jīng)典的腺嘌呤:鳥(niǎo)嘌呤(A:G)配對(duì)并可能影響RNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)。在m⁶A甲基化酶和去甲基化酶缺陷的細(xì)胞中信使核糖核酸的表達(dá)水平、翻譯效率、核保留時(shí)間和穩(wěn)定性會(huì)受到很大影響，因此m⁶A修飾被認(rèn)為主要影響信使核糖核酸的代謝。核糖核酸上m⁶A修飾的可塑性和動(dòng)態(tài)性使其成為一種新的表觀調(diào)控標(biāo)記，并且參與到生物鐘、減數(shù)分裂和胚胎干細(xì)胞的增殖等重要生物進(jìn)程(Fustin,J.M.,et al.； Okamura,H.；2013.RNA-methylation-dependent RNA processing controls the speed of the circadianclock.Cell 155,793-806.；Schwartz,S.,et al.；High-resolution mapping reveals aconserved,widespread,dynamic mRNA methylation program in yeast meiosis.Cell155,1409-1421.；Geula,S.,et al.；2015.m⁶A mRNA methylation facilitatesresolution of naive pluripotency toward differentiation.Science.)，但是它的功能和調(diào)節(jié)機(jī)制在很大程度上是未知的。