[發(fā)明專利]自然殺傷細(xì)胞的方法和組合物

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201580071084.0
• 申請(qǐng)日: 2015-10-27
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107206100B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-02-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: A·J·科皮克;J·L·奧耶;R·Y·五十嵐;D·阿爾托馬爾
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 弗羅里達(dá)中央大學(xué)研究基金會(huì)
• 主分類號(hào): A61K47/64
• 分類號(hào): A61K47/64;A61K48/00;C12N15/88
• 代理公司: 北京坤瑞律師事務(wù)所 11494
• 代理人: 張紅春

本發(fā)明公開(kāi)了用于刺激和產(chǎn)生或擴(kuò)增自然殺傷(NK)細(xì)胞的新穎組合物和方法。與用一種或多種刺激肽修飾的外來(lái)體接觸后，NK細(xì)胞的數(shù)目可增加。本發(fā)明還描述了用于生產(chǎn)外來(lái)體的方法和組合物，其中所述外來(lái)體包括刺激肽。本發(fā)明還描述了使用所公開(kāi)的刺激NK的外來(lái)體或用所公開(kāi)的方法刺激過(guò)的NK細(xì)胞來(lái)治療癌癥的方法。

相關(guān)專利申請(qǐng)的交叉引用

本申請(qǐng)要求提交于2014年10月27日的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)62/069,057的權(quán)益，該美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)由此全文以引用方式并入本文。

技術(shù)領(lǐng)域

本申請(qǐng)整體涉及包含自然殺傷(NK)細(xì)胞的組合物和方法。更具體地，本申請(qǐng)涉及對(duì)能夠攻擊和殺傷癌細(xì)胞、病毒感染細(xì)胞和某些免疫細(xì)胞的內(nèi)源性自然殺傷(NK)細(xì)胞的體內(nèi)、離體或體外刺激和擴(kuò)增。

背景技術(shù)

來(lái)自遺傳型上HLA匹配的同胞的造血干細(xì)胞移植(HSCT)已經(jīng)改善了患有血液癌癥惡性腫瘤和骨髓衰竭綜合征的患者的長(zhǎng)期存活。每年，有超過(guò)10,000名美國(guó)人患上危及生命的疾病，該等疾病的唯一治愈希望就是從不相關(guān)的供體或臍血單位(cord blood unit)進(jìn)行骨髓移植。然而，可以從同種異體干細(xì)胞移植受益的患者中超過(guò)70％沒(méi)有匹配的同胞供體。這些情況會(huì)延遲治療，因此有必要訴諸不太理想地使用部分不匹配的供體，這最終導(dǎo)致移植物抗宿主病(GVHD)、移植失敗和復(fù)發(fā)的發(fā)生率增大，所有這些都顯著降低了患者的存活。

移植過(guò)程的持續(xù)時(shí)間和昂貴的經(jīng)濟(jì)、精神和健康負(fù)擔(dān)造成了附加限制。因此，來(lái)自不相關(guān)供體的HSCT的應(yīng)用僅限于具有能夠持續(xù)該過(guò)程的適當(dāng)社會(huì)經(jīng)濟(jì)支持的較年輕、較健康的患者。

由于無(wú)法根除殘留的癌細(xì)胞，高復(fù)發(fā)率引起了進(jìn)一步的挑戰(zhàn)。雖然HSCT被認(rèn)為是治愈性的，但癌癥復(fù)發(fā)率是大的驚人的。因此，需要更具靶向性的新穎免疫療法，所述免疫療法將更有效，優(yōu)選地不需要匹配的供體。在20世紀(jì)90年代引入了供體淋巴細(xì)胞輸注(DLI)，以用于治療HSCT后的急性骨髓性白血病(AML)復(fù)發(fā)。這種方法由以下步驟組成：從原始供體向患有復(fù)發(fā)疾病的AML患者施用淋巴細(xì)胞。然而，臨床益處是有限的并僅在少數(shù)具有較小腫瘤負(fù)荷的患者中觀察到，并且T細(xì)胞介導(dǎo)的GVHD常常進(jìn)一步惡化結(jié)局。

迫切需要旨在增加NK細(xì)胞數(shù)量的具改善的新方法。

所公開(kāi)的方法和組合物的另外優(yōu)點(diǎn)將部分地在下面的描述中闡述，并且將部分地從描述中理解，或者可以通過(guò)實(shí)踐所公開(kāi)的方法和組合物習(xí)得。所公開(kāi)的方法和組合物的優(yōu)點(diǎn)將通過(guò)所附權(quán)利要求書中特別指出的要素和組合來(lái)實(shí)現(xiàn)和獲得。應(yīng)當(dāng)理解，上述一般描述和以下詳細(xì)描述僅僅是示例性和說(shuō)明性的，并不限制所要求保護(hù)的本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

本文公開(kāi)了用于增強(qiáng)自然殺傷(NK)細(xì)胞的活性的具改善技術(shù)的方法。在某些實(shí)施方案中，本文公開(kāi)的方法導(dǎo)致NK細(xì)胞的數(shù)目增加。在某些實(shí)施方案中，本文公開(kāi)的方法導(dǎo)致具有改善活性的NK細(xì)胞。在某些實(shí)施方案中，本文公開(kāi)的方法導(dǎo)致具有改善活性的NK細(xì)胞的數(shù)目增加。

本文公開(kāi)了用于增加NK細(xì)胞數(shù)目的方法，其包括使至少一個(gè)NK細(xì)胞與至少一種刺激NK的外來(lái)體接觸，刺激NK的外來(lái)體包含存在于外來(lái)體膜中的一種或多種刺激肽。外來(lái)體可以是體外產(chǎn)生的外來(lái)體分泌細(xì)胞的細(xì)胞外產(chǎn)物。在一些情況下，外來(lái)體從飼養(yǎng)細(xì)胞分泌。在一些方面，存在于外來(lái)體膜中的一種或多種刺激肽可以包括4-1BBL、IL-2、IL-12、IL-18、IL-21、MICA/B、ULBP2、ICAM-1、2B4、BCM1/SLAMF2、CD155、CD112、CCR7和/或其他歸巢受體、DAP12、DAP10和/或其他銜接蛋白。在一些情況下，外來(lái)體膜不含有IL-15。在一些方面，存在于外來(lái)體膜中的所述一種或多種刺激肽包括4-1BBL和IL-21。刺激肽也可以與一個(gè)或多個(gè)膜插入肽偶聯(lián)。膜插入肽可以包含對(duì)脂質(zhì)雙層具有親和力的CD4或IgG的區(qū)段。或者，膜插入肽可以包括人Fc、GPI、跨膜T細(xì)胞受體，或pHLIP。與一個(gè)或多個(gè)膜插入肽偶聯(lián)的所述一種或多種刺激肽可以包括由重組DNA編碼的融合蛋白。