[發明專利]碳酸酐酶IX特異性嵌合抗原受體及其使用方法

在審

• 申請號: 201580068869.2
• 申請日: 2015-12-21
• 公開（公告）號: CN108064251A
• 公開（公告）日: 2018-05-22
• 發明（設計）人: W.A.馬拉斯科
• 申請（專利權）人: 達納－法伯癌癥研究所公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N5/10;A61K35/17;A61P35/00
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 權陸軍;羅文鋒

1.包含細胞內信號傳導結構域、跨膜結構域和包含碳酸酐酶IX（G250）-特異性受體的細胞外結構域的嵌合抗原受體（CAR）。

2.權利要求1的CAR，其中所述跨膜結構域還包含位于細胞外結構域和跨膜結構域之間的莖區。

3.權利要求1的CAR，其中所述跨膜結構域包含CD28。

4.權利要求1的CAR，其還包含位于所述跨膜結構域和細胞內信號傳導結構域之間的一種或多種附加共刺激分子。

5.權利要求4的CAR，其中所述共刺激分子是CD28、4-1BB、ICOS或OX40。

6.權利要求1的CAR，其中所述細胞內信號傳導結構域包含CD3ζ鏈。

7.權利要求1的CAR，其中所述碳酸酐酶IX（G250）-特異性受體是抗體。

8. 權利要求7的CAR，其中所述抗體是Fab或scFV。

9.權利要求7的CAR，其中所述抗體具有重鏈，其包含

a）包含氨基酸序列SYAMS（SEQ ID NO：55）的CDR1；

b）包含氨基酸序列AISANGGTTYYADSVKG（SEQ ID NO：67）的CDR2；和

c）包含氨基酸序列NGNYRGAFDI（SEQ ID NO：65）的CDR3；

和

i）具有包含氨基酸序列TGSSSNIGAGFDVH（SEQ ID NO：68）的CDR1；包含氨基酸序列GNTNRPS（SEQ ID NO：69）的CDR2；和包含氨基酸序列QSYDSRLSAWV（SEQ ID NO：70）的CDR3的輕鏈；

ii）具有包含氨基酸序列TGSSSNIGAGYDVH（SEQ ID NO：61）的CDR1；包含氨基酸序列GNSNRPS（SEQ ID NO：72）的CDR2；和包含氨基酸序列QSYDRSLSWV（SEQ ID NO：73）的CDR3的輕鏈；

iii）具有包含氨基酸序列TGSSSNIGAGYDVH（SEQ ID NO：61）的CDR1；包含氨基酸序列GNTNRPS（SEQ ID NO：69）的CDR2；和包含氨基酸序列QSYDSTLRVWM（SEQ ID NO：74）的CDR3的輕鏈；

iv）具有包含氨基酸序列TGSSSNIGAGYDVH（SEQ ID NO：61）的CDR1；包含氨基酸序列GNNNRPS（SEQ ID NO：62）的CDR2；和包含氨基酸序列QSYDKSLTWV（SEQ ID NO：76）的CDR3的輕鏈；

v）具有包含氨基酸序列TGTSSNIGAGYDVH（SEQ ID NO：81）的CDR1；包含氨基酸序列GNNNRPS（SEQ ID NO：62）的CDR2；和包含氨基酸序列QSYDKSLSWV（SEQ ID NO：80）的CDR3的輕鏈；

vi）具有包含氨基酸序列TGSSSNIGAGFDVH（SEQ ID NO：68）的CDR1；包含氨基酸序列GNNNRPS（SEQ ID NO：62）的CDR2；和包含氨基酸序列QSYDSSLSAWV（SEQ ID NO：82）的CDR3的輕鏈；或

vii）具有包含氨基酸序列TGSSSNIGAGYDVH（SEQ ID NO：61）的CDR1；包含氨基酸序列GNSNRPS（SEQ ID NO：72）的CDR2；和包含氨基酸序列QSYDSSLSAWV（SEQ ID NO：82）的CDR3的輕鏈。

10. 權利要求1的CAR，其中所述scFv抗體具有包含選自SEQ ID NOs 1、3-23的氨基酸序列的氨基酸序列的重鏈，并且其中所述scFv抗體具有包含選自SEQ ID NOs：2和24-44的氨基酸序列的氨基酸序列的輕鏈。

11.一種基因工程細胞，其在細胞表面膜上表達并承載了權利要求1的嵌合抗原受體。