[發(fā)明專利]包括全息確定生物粒子的位置的分析方法及相應(yīng)的設(shè)備有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201580067724.0 | 申請日： | 2015-11-13 |
| 公開（公告）號： | CN107003229B | 公開（公告）日： | 2020-02-18 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 弗朗索瓦·派勞特;皮埃爾·喬利;昆廷·宙索;邁克·克羅斯特·蘭茨貝格 | 申請（專利權(quán)）人： | 原子能和替代能源委員會;生物梅里埃 |
| 主分類號： | G01N15/14 | 分類號： | G01N15/14;G01N21/45;G01N21/47;G03H1/08 |
| 代理公司： | 北京派特恩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11270 | 代理人： | 姚開麗;王琳 |
| 地址： | 法國*** | 國省代碼： | 暫無信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 包括 全息 確定 生物 粒子 位置 分析 方法 相應(yīng) 設(shè)備 | ||
1.一種用于對接收生物粒子(112)的樣品(111；311)進行分析的方法，該生物粒子包括感興趣粒子(112A)，所述樣品被設(shè)置在第一光源(120；320)和光學(xué)系統(tǒng)(131；331)之間，所述光學(xué)系統(tǒng)(131；331)在物平面(133；333)和像平面之間進行光學(xué)共軛，圖像傳感器(132；332)位于該像平面中，并且所述樣品位于由上載波片(114；314)在所述圖像傳感器一側(cè)上所界定的流體室內(nèi)，所述方法包括以下步驟：
限定位于所述上載波片(114；314)的面(117；317；315)上的參考點(118；318)，并且通過激光束(363)來照射所述參考點(118；318)，所述激光束被所述光學(xué)系統(tǒng)(131；331)聚焦并且被設(shè)置成所述圖像傳感器(132；332)接收由所述上載玻片(114；314)上的所述激光束(363)的鏡面反射所形成的光斑的圖像，所述激光束、所述圖像傳感器和所述光學(xué)系統(tǒng)被設(shè)置成使得光束的聚焦點在所述物平面內(nèi)；
通過對所述鏡面反射進行檢測來調(diào)整處于所述流體室內(nèi)的所述樣品與所述光學(xué)系統(tǒng)之間沿與所述光學(xué)系統(tǒng)的光軸平行的軸線的距離，使得所述參考點位于所述光學(xué)系統(tǒng)的所述物平面中；
沿與所述光學(xué)系統(tǒng)的光軸平行的軸線相對于所述參考點(118；318)來將所述光學(xué)系統(tǒng)的所述物平面(133；333)偏移已知距離，該已知距離被稱為有用距離(D1)，并且使得所述感興趣粒子(112A)位于所述光學(xué)系統(tǒng)的所述物平面(133；333)的外部；使用所述第一光源對接收所述感興趣粒子的區(qū)域進行照明，該區(qū)域被稱為照明區(qū)域(119)；
使用所述圖像傳感器(132；332)來獲取所述照明區(qū)域的全息圖像，該全息圖像被稱為參考圖像或散焦圖像；
使用所述參考圖像來數(shù)字化構(gòu)建一系列重構(gòu)圖像，每個重構(gòu)圖像與所述物平面沿所述光學(xué)系統(tǒng)的光軸的預(yù)定偏移量(Di1，Di2，Din，Di-1，Di-n)的模擬相關(guān)聯(lián)；
使用所述一系列重構(gòu)圖像來確定所述感興趣粒子與所述物平面之間沿與所述光學(xué)系統(tǒng)的光軸平行的軸線的距離Dref。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的進行分析的方法，其特征在于，所述光學(xué)系統(tǒng)的所述物平面(133；333)相對于所述參考點(118；318)的偏移是通過使接收處于所述流體室內(nèi)的所述樣品的支持件(110)相對于所述光學(xué)系統(tǒng)(131；331)進行平移來實現(xiàn)的。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的進行分析的方法，其特征在于，所述方法包括：使用所述感興趣粒子(112A)與所述物平面(133；333)之間的所述距離Dref以及所述有用距離(D1)來確定所述感興趣粒子與所述參考點(118；318)之間的距離(DF)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的進行分析的方法，其特征在于，所述方法包括：使用所述感興趣粒子與所述物平面之間的所述距離Dref來確定所述感興趣粒子在介質(zhì)中的存在。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的進行分析的方法，其特征在于，所述生物粒子(112)粘附到所述樣品的界面(116，117；316，317)上，該所述樣品的界面包括所述樣品的下界面(116；316)或所述樣品的上界面(117；317)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的進行分析的方法，其特征在于，與所述參考圖像相關(guān)聯(lián)的所述物平面的位置和所述參考點(118；318)沿與所述光學(xué)系統(tǒng)的光軸平行的軸線在所述樣品的上界面(117；317)上的投影之間沿該軸線的距離在+5μm至+2000μm之間或-5μm至-2000μm之間，所述上界面(117；317)是由所述上載玻片(114)與所述樣品(111)之間的邊界限定的。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的進行分析的方法，其特征在于，所述照明區(qū)域(119)包括多個生物粒子(112)。
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