[發明專利]蛋白A洗脫產物中雜質的去除

有效

• 申請號: 201580000852.3
• 申請日: 2015-01-05
• 公開（公告）號: CN105407905B
• 公開（公告）日: 2020-03-03
• 發明（設計）人: M·斯奈德
• 申請（專利權）人: 生物輻射實驗室股份有限公司
• 主分類號: A61K38/00
• 分類號: A61K38/00;C07K1/00;C07K16/00
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 余穎;楊昀

1.一種多肽，其含有在0-30℃缺乏抗體結合活性的含修飾蛋白G、蛋白L或蛋白A/G，其中，所述含修飾蛋白G、蛋白L或蛋白A/G包含一個或多個乙酰化賴氨酸，或者所述含修飾蛋白G、蛋白L或蛋白A/G包含一個或多個與所述蛋白G、蛋白L或蛋白A/G交聯的含Fc片段的蛋白質，由此封閉抗體結合活性。

2.一種多肽，其包含在0-30℃缺乏抗體結合活性的含修飾蛋白A，所述含修飾蛋白A包含一個或多個封閉抗體結合活性的修飾氨基酸，其中，所述含修飾蛋白A包含一個或多個乙酰化賴氨酸，或者所述含修飾蛋白A包含一個或多個與所述蛋白A交聯的含Fc片段的蛋白質，由此封閉抗體結合活性。

3.一種連接了的多肽的支持基質，所述多肽包含0-30℃缺乏抗體結合活性的含修飾蛋白A、蛋白G、蛋白L或蛋白A/G，其中，所述含修飾蛋白A、蛋白G、蛋白L或蛋白A/G包含一個或多個乙酰化賴氨酸，或者所述含修飾蛋白A、蛋白G、蛋白L或蛋白A/G含有一個或多個與所述蛋白A、蛋白G、蛋白L或蛋白A/G交聯的含Fc片段的蛋白質，由此封閉抗體結合活性。

4.如權利要求3所述的支持基質，其中，所述支持基質是珠、膜或纖維。

5.一種反應混合物，包括含抗體的樣品和權利要求中1或2所述多肽或權利要求3或4所述支持基質。

6.一種從含有抗體和污染物的樣品中純化所述抗體的方法，所述方法包括：

使所述樣品與包含缺乏抗體結合活性的含修飾蛋白A、蛋白G、蛋白L或蛋白A/G的多肽在一定條件下接觸，所述條件下至少一些污染物結合至所述多肽而所述抗體不結合至所述多肽，其中，所述含修飾蛋白A、蛋白G、蛋白L或蛋白A/G包含一個或多個乙酰化賴氨酸，或者所述含修飾蛋白A、蛋白G、蛋白L或蛋白A/G含有一個或多個與所述蛋白A、蛋白G、蛋白L或蛋白A/G交聯的含Fc片段的蛋白質，由此封閉抗體結合活性；

將含有所述抗體的溶液與結合于所述多肽的所述污染物分離；

使含有所述抗體的所述溶液與抗體結合性蛋白A、蛋白G、蛋白L或蛋白A/G在適宜條件下接觸以形成所述抗體與所述抗體結合性蛋白A、蛋白G、蛋白L或蛋白A/G的復合物，由此產生所述復合物和不結合的組分；

將所述不結合的組分與所述復合物分離；和

由所述復合物上洗脫抗體，

由此產生純化的抗體。

7.如權利要求6所述的方法，其中，所述多肽連在支持基質上。

8.如權利要求7所述的方法，其中，所述支持基質是珠、膜或纖維。

9.一種從含有抗體和污染物的樣品中純化所述抗體的方法，所述方法包括：

使所述樣品與抗體結合性蛋白A、蛋白G、蛋白L或蛋白A/G在適宜條件下接觸以形成所述抗體與所述抗體結合性蛋白A、蛋白G、蛋白L或蛋白A/G的復合物，由此產生所述復合物和不結合的組分；

將所述不結合的組分與所述復合物分離；以及

由所述復合物上洗脫抗體，由此形成含有所述抗體的洗脫產物；

使所述洗脫產物與包含缺乏抗體結合活性的含修飾蛋白A、蛋白G、蛋白L或蛋白A/G的多肽在一定條件下接觸，所述條件下至少一些污染物結合所述多肽而所述抗體不結合所述多肽，其中，所述含修飾蛋白A、蛋白G、蛋白L或蛋白A/G包含一個或多個乙酰化賴氨酸，或者所述含修飾蛋白A、蛋白G、蛋白L或蛋白A/G含有一個或多個與所述蛋白A、蛋白G、蛋白L或蛋白A/G交聯的含Fc片段的蛋白質，由此封閉抗體結合活性；以及

將含有所述抗體的溶液與結合于所述多肽的所述污染物分離；

由此產生純化的抗體。

10.如權利要求9所述的方法，其中，所述多肽連在支持基質上。

11.如權利要求10所述的方法，其中，所述支持基質是珠、膜或纖維。