[實用新型]一種細胞透膜遷移實驗用裝置及制作用型模

有效

• 申請號: 201520547158.0
• 申請日: 2015-07-26
• 公開（公告）號: CN204958892U
• 公開（公告）日: 2016-01-13
• 發明（設計）人: 孫炳偉;王旭;沈唯長;秦魏婷
• 申請（專利權）人: 江蘇大學附屬醫院
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00;C12M1/12;C12M1/22
• 代理公司: 常州市江海陽光知識產權代理有限公司 32214
• 代理人: 張兢;翁堅剛

技術領域

本實用新型屬于一種細胞遷移實驗用裝置，特別是一種細胞透膜遷移實驗用裝置及制作用型模。

背景技術

現有的用于細胞遷移實驗的方法和裝置主要有傳統的瓊脂糖下細胞遷移實驗和Transwell基礎上的細胞體外侵襲裝置。

如現有的技術文獻1，其公開號為CN102181397A，專利號為ZL201110039718.8，該文獻公開了一種喉鱗癌軟骨侵襲模型，“其包括喉鱗癌侵襲體外實驗模型、喉鱗癌軟骨侵襲半離體試驗模型和喉鱗癌軟骨侵襲體內試驗模型。作為優選，所述喉鱗癌侵襲體外實驗模型的構建方法如下。

第一步：以聚碳酸脂微孔濾膜封閉Transwell小室杯底；第二步：人工重建基底膜Matrigel按1︰5比例用無血清RPMI-1640稀釋后取100uL均勻地涂在濾膜上；第三步：待Matrigel形成凝膠狀后，將Transwell小室放入24孔板細胞培養孔中，用紫外線照射2h殺菌備用；第四步：下室加入含10%小牛血清的RPMI1640培養基，喉鱗癌Hep-2細胞均勻加入上室，37℃條件下培養24h；第五步：培養后輕輕拭去杯底部Matrigel膠和未浸潤的細胞，乙醇固定，結晶紫染色；第六步：光鏡下觀察并隨機選取4個視野，計數穿膜細胞數并取其平均值，以穿膜細胞的相對數目代表侵襲力”。

現有技術文獻1中所述的研究細胞體外侵襲實驗裝置在使用中存在如下缺陷。

1、不可以直觀地觀察細胞的遷移運動，計數細胞的個數。

2、膜上的細胞在進行固定染色的過程中可能會丟失，從而影響實驗的準確性。

3、實驗結束后僅能對膜上的細胞進行固定染色觀察，難以收集細胞進行后續的實驗。

又如現有技術的ScienceSignaling上的文獻2MeasuringChemotxisandChemokinesis:TheUnder-AgaroseCellMigrationAssay中涉及的目前最經典的瓊脂糖下細胞遷移實驗。該實驗是在瓊脂糖凝膠上垂直打洞直到培養皿底面，然后將細胞和趨化物加入不同的孔道中，是細胞在瓊脂糖和培養皿的縫隙間遷移運動。實驗結束后移去瓊脂糖對瓊脂糖底部培養皿表面的細胞進行固定染色，然后進行觀察。

現有技術文獻2中所述的研究細胞體遷移的實驗在使用中存在如下缺陷。

1、只能觀察細胞在瓊脂糖下的遷移運動，沒有跨膜的過程。

2、培養皿上的細胞在進行固定染色的過程中更容易丟失，并且在移除瓊脂糖的過程中可能使大量的細胞移位，從而影響實驗的準確性。

3、實驗結束后僅能對培養皿上的細胞進行固定染色觀察，難以收集細胞進行后續的實驗。

發明內容

本實用新型的目的是克服現有技術的不足，研究并設計一種可以直觀的觀察細胞穿過高分子濾膜的遷移運動，精確計數細胞的個數，并且便于收集遷移過膜的細胞進行后續實驗的細胞透膜遷移實驗用裝置及制作用型模。

實現本實用新型目的的技術方案是：

一種細胞透膜遷移實驗用裝置，其特征是由裝有膠凝狀瓊脂糖的圓形培養皿，培養皿中膠凝狀瓊脂糖圍成的細胞用孔，培養皿中膠凝狀瓊脂糖圍成的且與細胞用孔間隔距離的趨化物用孔，培養皿中膠凝狀瓊脂糖圍成的連通于細胞用孔和趨化物用孔之間的直線形遷移通道，阻隔于遷移通道中間的有序地布有微孔的高分子濾膜構成。

瓊脂糖，即瓊脂（Agar），又名瓊膠、菜燕、凍粉，是一類從石花菜及其它紅藻類（Rhodophyceae）植物提取出來的藻膠（phycocottoid），瓊脂糖Agarose，縮寫為AG，是瓊脂中不帶電荷的中性組成成份，也譯為瓊膠素或瓊膠糖。瓊膠糖化學結構由β-D-吡喃半乳糖(1-4)連接3,6-脫水α-L-吡喃半乳糖基單位構成。瓊脂、瓊脂糖因為有特殊的膠凝性質，尤其有顯著的穩固性、滯度和滯后性，并且易吸收水分，有特殊的穩定效應。

趨化物，即趨化因子，也稱做趨化激素、趨化素或是化學激素。是一小分子細胞因子家族蛋白。趨化因子的主要作用是趨化細胞的遷移.細胞沿著趨化因子濃度增加的信號向趨化因子源處遷徙。有些趨化因子在免疫監視過程中控制免疫細胞趨化，如誘導淋巴細胞到淋巴結。

所述細胞用孔、趨化物用孔、遷移通道深度相同，遷移通道寬度小于細胞用孔、趨化物用孔的孔徑。

所述高分子濾膜采用聚酯纖維膜中的多孔聚碳酸脂膜。