[實(shí)用新型]一種快速聯(lián)合檢測HE4和CA125的試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201520311623.0
• 申請(qǐng)日: 2015-05-15
• 公開（公告）號(hào): CN204719056U
• 公開（公告）日: 2015-10-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 司英杰;李梅;劉琳;殷娟娟;向榮;王昊;張賢剛;張賢強(qiáng);朱正宇;李亞峰
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 德康潤生物科技（天津）有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68;G01N33/558
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本實(shí)用新型是涉及生物應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種快速聯(lián)合檢測HE4和CA125的試劑盒。

背景技術(shù)

卵巢癌死亡率居?jì)D科惡性腫瘤之首。目前臨床常用的診斷方法：1）婦科三合診(陰道、直腸及腹部聯(lián)合檢查)；2）陰道彩色B超；3）計(jì)算機(jī)斷層掃描（CT）、磁共振成像（MRI）、正電子發(fā)射斷層掃描（PET或PET/CT）等。

與影像學(xué)檢測相比較血清學(xué)腫瘤標(biāo)志物檢測具有更敏感、更提前，操作簡單結(jié)果直觀等優(yōu)勢，在腫瘤篩查，診斷，療效判斷，復(fù)發(fā)監(jiān)測等方面應(yīng)用廣泛。作為不完美的卵巢癌的“金標(biāo)準(zhǔn)”CA125的特異性相對(duì)較低在婦科良性疾病，尤其在子宮內(nèi)膜異位癥、盆腔結(jié)核、炎癥、卵巢囊腫等甚至更高，其特異性不好；在其他系統(tǒng)惡性疾病也可出現(xiàn)CA125的升高。其敏感性低只有50%的?I期卵巢癌和80%的上皮性卵巢癌出現(xiàn)?CA125的升高，在卵巢癌的早期篩查中意義不大，在某些婦科惡性腫瘤患者完全不表達(dá)CA125。人附睪蛋白4（HE4）的出現(xiàn)改變了這一情況，作為一種新型的腫瘤標(biāo)志物在卵巢癌早期診斷中具有重要意義。多數(shù)卵巢癌HE4和CA125水平會(huì)同時(shí)升高，二者的聯(lián)合檢測有利于提高卵巢癌的檢出率，有效改善了單一腫瘤標(biāo)志物陰性導(dǎo)致的卵巢癌漏診，有效降低假陰性結(jié)果，大大增加卵巢癌診斷的準(zhǔn)確性。

發(fā)明內(nèi)容

本實(shí)用新型的目的是提供一種快速聯(lián)合檢測HE4和CA125的試劑盒，可同時(shí)定性檢測人血清中的附睪蛋白HE4和糖抗原CA125，具有操作簡便、反應(yīng)快速、敏感性高、特異性強(qiáng)、適合現(xiàn)場檢測和經(jīng)濟(jì)實(shí)用等優(yōu)點(diǎn)。

一種快速聯(lián)合檢測HE4和CA125的試劑盒，包括劃有第一檢測線或者檢測斑點(diǎn)，第二檢測線或者檢測斑點(diǎn)和質(zhì)控線或者質(zhì)控斑點(diǎn)的硝酸纖維素膜及其其他固相材料，第一條檢測線包括或者檢測斑點(diǎn)上包被鼠抗人HE4抗體A2，第二條檢測線包括或者檢測斑點(diǎn)上包被鼠抗人CA125抗體B2，質(zhì)控線或質(zhì)控斑點(diǎn)上包被有山羊抗鼠IgG或其它與標(biāo)記物起反應(yīng)的抗原或抗體，采用膠體金、乳膠標(biāo)記物、熒光標(biāo)記物、化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物或者酶標(biāo)記物及可通過肉眼或者儀器進(jìn)行檢測的分子或者顆粒物分別標(biāo)記鼠抗人HE4抗體A1和鼠抗人CA125抗體B1，本實(shí)用新型是基于免疫層析或者免疫滲濾或其他免疫學(xué)技術(shù)和膠體金或乳膠顆粒或熒光或化學(xué)發(fā)光或酶顯色技術(shù)開發(fā)而成的檢測試劑盒，采用雙抗體夾心法實(shí)現(xiàn)對(duì)人血清中HE4和CA125的聯(lián)合檢測。

本發(fā)明的一種快速聯(lián)合檢測HE4和CA125的試劑盒，其特征在于所述的抗體，用于標(biāo)記的抗體是鼠抗人HE4抗體A1和鼠抗人CA125抗體B1，用于包被的抗體鼠抗人HE4抗體A2和鼠抗人CA125抗體B2，用于標(biāo)記和包被的抗體可以通過或轉(zhuǎn)染小鼠后表達(dá)純化獲得。

本發(fā)明的一種快速聯(lián)合檢測HE4和CA125的試劑盒，具體工作原理如下：檢測時(shí)，血清樣本中的人附睪蛋白HE4和糖抗原CA125首先與膠體金、乳膠標(biāo)記物、熒光標(biāo)記物、化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物或者酶標(biāo)記物及可通過肉眼或者儀器進(jìn)行檢測的分子或者顆粒物標(biāo)記的HE4抗體A1和鼠抗人CA125抗體B1相結(jié)合，分別形成抗原-抗體-標(biāo)記物的復(fù)合物，該復(fù)合物在毛吸或者滲濾作用下分別與包被與硝酸纖維素膜上的第一檢測線和第二檢測線上的抗體結(jié)合形成?抗體-抗原-顯色物，完成顯色，形成肉眼可見的或者儀器可檢測到的第一檢測線第二檢測線。

本實(shí)用新型的有益效果是：提供一種快速聯(lián)合檢測HE4和CA125的試劑盒。采用膠體金、乳膠標(biāo)記物、熒光標(biāo)記物、化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物或者酶標(biāo)記物及可通過肉眼或者儀器進(jìn)行檢測的分子或者顆粒物分別標(biāo)記鼠抗人HE4抗體A1和鼠抗人CA125抗體B1，包被鼠抗人HE4抗體A2和鼠抗人CA125抗體B2實(shí)現(xiàn)對(duì)人血清中HE4和CA125的聯(lián)合檢測，一次檢測獲得兩種檢測指標(biāo)，節(jié)約時(shí)間和成本，減輕患者的痛苦。具有操作簡便、反應(yīng)快速、敏感性高、特異性強(qiáng)、適合現(xiàn)場檢測和經(jīng)濟(jì)實(shí)用等優(yōu)點(diǎn)。

本專利所述的一種快速聯(lián)合檢測HE4和CA125的試劑盒，樣本要求如下：

人體血液中的某些成分具有潛在的傳染性，操作時(shí)應(yīng)按照微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通則進(jìn)行。

血清樣本按照常規(guī)方法采集獲得。

如果不能立即檢測，3天以內(nèi)的樣本可以4度保存，如果放置-20度至少保存3個(gè)月。

測試前將冷凍保存的樣本慢慢恢復(fù)至室溫后混勻使用，避免樣本反復(fù)凍融。

檢測樣本中如果有明顯顆粒物或者沉淀時(shí)，離心取上清進(jìn)行檢測。

本專利所述的一種快速聯(lián)合檢測HE4和CA125的試劑盒檢測方法如下：

步驟1、將試劑盒和待測樣品取出，平衡至室溫；