[發(fā)明專利]一種甘膽酸的測(cè)定試劑及其制備方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201510929415.1 | 申請(qǐng)日： | 2015-12-14 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN105588936A | 公開（公告）日： | 2016-05-18 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 方朝君 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 浙江達(dá)美生物技術(shù)有限公司 |
| 主分類號(hào)： | G01N33/53 | 分類號(hào)： | G01N33/53 |
| 代理公司： | 紹興市越興專利事務(wù)所(普通合伙) 33220 | 代理人： | 蔣衛(wèi)東 |
| 地址： | 312000 浙*** | 國(guó)省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 膽酸 測(cè)定 試劑 及其 制備 方法 | ||
1.一種甘膽酸測(cè)定試劑，其特征在于：包括R1試劑、R2試劑和甘膽酸標(biāo)準(zhǔn)樣，所述的R1 試劑是由硫代氧化型輔酶I溶解于添加有緩沖液的純化水中所形成的溶液；所述的R2試劑 是由還原型輔酶I溶解于添加有緩沖液、甘膽酸脫氫酶、疊氮鈉的純化水中所形成的溶液； 所述的甘膽酸標(biāo)準(zhǔn)樣是由甘膽酸鈉水合物、緩沖液和疊氮鈉溶解于純化水中形成的溶液。
2.如權(quán)利要求1所述的一種甘膽酸測(cè)定試劑，其特征在于：所述的緩沖液為磷酸鹽緩沖 液或三羥甲基氨基甲烷。
3.如權(quán)利要求2所述的一種甘膽酸測(cè)定試劑，其特征在于：所述的磷酸鹽緩沖液的pH為 7.0，濃度為0.65mol/L。
4.如權(quán)利要求1所述的一種甘膽酸測(cè)定試劑，其特征在于：所述的硫代氧化型輔酶I為 β-硫代煙酰胺脲嘌呤二核苷酸氧化型，其濃度為1g/L。
5.如權(quán)利要求1所述的一種甘膽酸測(cè)定試劑，其特征在于：所述的還原型輔酶I為β-煙 酰胺脲嘌呤二核苷酸還原型，其濃度為6g/L。
6.如權(quán)利要求1所述的一種甘膽酸測(cè)定試劑，其特征在于：所述的甘膽酸脫氫酶濃度≥ 5000U/L。
7.如權(quán)利要求1所述的一種甘膽酸測(cè)定試劑，其特征在于：所述的疊氮鈉濃度為 0.6mol/L。
8.一種權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述甘膽酸測(cè)定試劑的制備方法，其特征在于，包括如下步 驟：
(1)R1試劑配制：向純化水中加入緩沖液，攪拌至完全溶解；加入硫代氧化型輔酶I攪拌 至完全溶解，繼續(xù)攪拌后定容；
(2)R2試劑配制：向純化水中加入緩沖液，攪拌至完全溶解；加入甘膽酸脫氫酶，攪拌至 溶解；添加疊氮鈉攪拌至溶解，加入還原型輔酶I攪拌至完全溶解，繼續(xù)攪拌后定容；
(3)甘膽酸標(biāo)準(zhǔn)樣配制：向純化水中加入甘膽酸鈉水合物，攪拌至完全溶解；加入緩沖 液攪拌至溶解，加入疊氮鈉攪拌至完全溶解，繼續(xù)攪拌后定容；
(4)對(duì)上述制備的R1試劑、R2試劑及甘膽酸標(biāo)準(zhǔn)樣進(jìn)行靈敏度、線性范圍、精密度和準(zhǔn) 確度進(jìn)行測(cè)定。
9.如權(quán)利要求8所述的甘膽酸測(cè)定試劑的制備方法，其特征在于：所述的攪拌速度為 450轉(zhuǎn)/分。
10.如權(quán)利要求8所述的甘膽酸測(cè)定試劑的制備方法，其特征在于：步驟(1)中，所述的 純化水為1500ml，定容體積為1600ml；步驟(2)中，所述的純化水為300ml，定容體積為 400ml；步驟(3)中，所述的純化水為80ml，定容體積為100ml。
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