[發明專利]一種芒果莖段的培養方法

在審

• 申請號: 201510918009.5
• 申請日: 2015-12-11
• 公開（公告）號: CN105475136A
• 公開（公告）日: 2016-04-13
• 發明（設計）人: 農艷豐;岑湘濤;蘇仕林
• 申請（專利權）人: 百色學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京天奇智新知識產權代理有限公司 11340
• 代理人: 但玉梅

【技術領域】

本發明屬于植物組織培養領域，涉及一種芒果莖段的培養方法。

【技術背景】

芒果(mangiferaindica)屬于漆樹科(anacardiaceae)芒果屬(meagifera)，是熱帶 優質水果之一，是世界第二大熱帶水果。芒果肉質細嫩，風味濃郁，營養豐富，具有十二種 必需氨基酸，維生素A和C、胡蘿卜素等含量較高。食用芒果具有抗癌、美化肌膚、防止高血 壓、動脈硬化、防止便秘、止咳、清腸胃的功效，是消費者非常喜愛的熱帶亞熱帶著名水果， 素有“熱帶果王”之美譽。中國是僅次于印度的第二大芒果生產國，芒果栽培地區主要分布 于海南、廣西、廣東、云南和四川的金沙江干熱河谷區域，廣西百色市則以盛產芒果而聞名， 具有很高的經濟價值和社會價值。在芒果組織培養中，傷口容易發生褐化作用，給芒果組培 造成很大的困難。

【發明內容】

鑒于以上內容，本發明提供一種芒果莖段的培養方法，該方法能夠防止芒果莖段在培養 過程中傷口褐化而提高培養成功率。

本發明所采用的技術方案是：一種芒果莖段的培養方法，包括以下步驟：1)沙床催芽； 2)預處理；3)滅菌；4)接種；5)白熾光照培養；6)獲取無菌芽。

進一步地，在步驟1)中，選取健康的芒果核，洗凈剖開去殼，將芒果胚埋在洗凈的沙 床中催芽，隔天澆水，保持沙床濕潤。

進一步地，在步驟2)中，待芒果胚長出的苗高至15cm，剪取芒果苗的頂端向下5cm， 剪去葉片，留0.5cm的葉柄，枝條剪成1.5cm長帶一個腋芽的莖段和頂芽作為外植體，將外 植體用5g/L多菌靈溶液浸泡10min，再用流水沖洗10min。。

進一步地，將步驟2)中的外植體放置在滅過菌的超凈工作臺上，用0.1％HgCl₂滅菌10min， 無菌水沖洗5次后，轉入無菌的0.1g/LVC溶液浸泡5min。

進一步地，將經步驟3)滅菌后的外植體接種到誘導培養基，該誘導培養基為WPM培養 基。

進一步地，在步驟4)中，將經步驟3)滅菌后的外植體接種到誘導培養基，該誘導培養 基為WPM培養基。

進一步地，在步驟5)中，將步驟4)接種后的外植體放置在白熾光照環境下培養3天， 光照時間為10-11h。

進一步地，在步驟6)中，將經步驟5)得到的外植體轉接到新的培養基中繼續培養30-40 天，得再生無菌芽；該新的培養基是以WPM培養基為基礎，添加人工激素濃度為1.0mg/L6-BA 和0.1mg/LNAA，同時添加40mg/L苯甲酸鈉。

相對現有技術，本發明的有益效果是：打破傳統的以體細胞胚發生途徑獲得芒果再生無 菌芽，同時能夠防止芒果莖段在培養過程中傷口褐化而提高培養成功率。

【具體實施方式】

以下實施例對本發明作進一步說明。

一種芒果莖段的培養方法，所述方法包括以下步驟：

1)沙床催芽：選取健康的芒果核，洗凈剖開去殼，將芒果胚埋在洗凈的沙床中催芽，隔 天澆水，保持沙床濕潤；

2)預處理：待芒果胚長出的苗高至15cm，剪取芒果苗的頂端向下5cm，剪去葉片，留0.5cm 的葉柄，枝條剪成1.5cm長帶一個腋芽的莖段和頂芽作為外植體，將外植體用5g/L多菌靈溶 液浸泡10min，再用流水沖洗10min，沖洗完成后備用；

3)滅菌：將步驟2)中的外植體放置在滅過菌的超凈工作臺上，用0.1％HgCl2滅菌10min， 無菌水沖洗5次后，轉入無菌的0.1g/LVC溶液浸泡5min后備用；

4)接種：在步驟4)中，將經步驟3)滅菌后的外植體接種到誘導培養基，該誘導培養基 為WPM培養基；

5)白熾光照培養：將步驟4)接種后的外植體放置在白熾光照環境下培養3天，光照時 間為10-11h；

6)獲取無菌芽：將經步驟5)得到的外植體轉接到新的培養基中繼續培養30-40天，得 再生無菌芽，該新的培養基是以WPM培養基為基礎，添加人工激素濃度為1.0mg/L6-BA和 0.1mg/LNAA，同時添加40mg/L苯甲酸鈉。

上述芒果莖段的培養方法打破傳統的以體細胞胚發生途徑獲得芒果再生無菌芽，克服了 現有芒果莖段在培養過程中傷口褐化而造成培養率低的情況。