[發(fā)明專(zhuān)利]一種依諾肝素鈉的純化方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510905231.1
• 申請(qǐng)日: 2015-12-10
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105418806A
• 公開(kāi)（公告）日: 2016-03-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉冠男;夏襯來(lái);遲培升
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 青島九龍生物醫(yī)藥有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C08B37/10
• 分類(lèi)號(hào): C08B37/10
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種生物藥用原料的制備方法，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體是一種依諾肝素鈉純化方法。

背景技術(shù)

依諾肝素鈉(EnoxaparinSodium)屬于低分子肝素，主要特征為分子中有一個(gè)4一烯吡喃糖醛酸結(jié)構(gòu)。本品抗血栓作用強(qiáng)、出血危險(xiǎn)性小，是目前抗凝血、抗血栓形成的主要治療藥物之一，2006年的全球銷(xiāo)售額達(dá)24.3ML歐元。法國(guó)Aventis公司曾研發(fā)，并于1993年申請(qǐng)過(guò)制備工藝的專(zhuān)利。但該專(zhuān)利未涉及生產(chǎn)過(guò)程中酯化率、成環(huán)率　及產(chǎn)物純化等關(guān)鍵工藝。

以豬黏膜肝素為起始原料，經(jīng)肝素季銨鹽制備、肝素芐酯制備、對(duì)肝素芐酯進(jìn)行堿解聚，以酸中和、醇沉淀，精制、脫色，脫水干燥，得到依諾肝素鈉成品。其中，在酸中和、醇沉淀后得到的依諾肝素鈉中間體，其澄清度往往很差，如果不加以精制純化，就無(wú)法達(dá)到藥典中澄清度的要求。

由于依諾肝素鈉廣闊的市場(chǎng)前景和現(xiàn)有純化技術(shù)存在諸多弊端，開(kāi)發(fā)一種能夠適合工業(yè)生產(chǎn)使用的、快速簡(jiǎn)便的純化依諾肝素鈉的方法就成為了亟待解決的問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種工藝操作簡(jiǎn)單，安全可控，收率高純化依諾肝素鈉的方法。

一種純化依諾肝素鈉的純化方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）將依諾肝素鈉粗品，放入氯化鈉溶液中溶解，得到依諾肝素鈉粗品溶液，過(guò)濾；

（2）將步驟（1）所得濾液經(jīng)離心分離，得上清液和沉淀物；

（3）將乙醇或甲醇加入到步驟（2）中獲得的上清液中，攪拌并靜置后得到沉淀物；

（4）將沉淀物用純化水溶解成10wt~15wt%的溶液，用0.22μm濾膜過(guò)濾后，噴霧干燥得依諾肝素鈉成品。

步驟（1）中氯化鈉溶液的濃度為4-10%，依諾肝素鈉粗品與氯化鈉溶液的重量與體積比為1:6-12。

步驟（2）中離心分離的轉(zhuǎn)速為1000~5000r/min。

步驟（3）中乙醇或甲醇與上清液的體積比為2-6:1，攪拌時(shí)間為2~4h，靜置時(shí)間為5-12h。

研究發(fā)現(xiàn)，影響依諾肝素鈉澄清度的雜質(zhì)主要來(lái)源于肝素鈉中的大分子蛋白和小分子的寡糖，這些雜質(zhì)在依諾肝素鈉的制備過(guò)程中，其分子中的醛基經(jīng)“美拉德反應(yīng)”會(huì)產(chǎn)生有色物質(zhì)。本發(fā)明先采用高速低溫離心除去了大分子的蛋白，再通過(guò)醇沉法除去寡糖等小分子雜質(zhì)，從而達(dá)到了純化依諾肝素鈉的目的。

與現(xiàn)有純化方法相比，本發(fā)明所述方法收率可達(dá)90%以上，且產(chǎn)品澄清度好，純化操作簡(jiǎn)便，非常適合制藥工業(yè)生產(chǎn)。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。

實(shí)施例

將制備得到的依諾肝素鈉粗品1.1kg放入5L10%的氯化鈉溶液中攪拌溶解，得到依諾肝素鈉粗品溶液，過(guò)濾得到濾液。將濾液在3000r/min的離心機(jī)中30min，得上清液和沉淀物。將10L乙醇加入到上清液中，攪拌1h后靜置3h，得沉淀物。將沉淀物用純化水溶解成10wt~15wt%的溶液，用0.22μm濾膜過(guò)濾后，噴霧干燥得依諾肝素鈉成品1.02kg，純化收率93.5%。

以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并非是對(duì)本發(fā)明作其它形式的限制，任何熟悉本專(zhuān)業(yè)的技術(shù)人員可能利用上述揭示的技術(shù)內(nèi)容加以變更或改型為等同變化的等效實(shí)施例。但是凡是未脫離本發(fā)明技術(shù)方案內(nèi)容，依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實(shí)質(zhì)對(duì)以上實(shí)施例所作的任何簡(jiǎn)單修改、等同變化與改型，仍屬于本發(fā)明技術(shù)方案的保護(hù)范圍。