[發明專利]一種丁酸梭菌及其在厭氧發酵產氫中的應用有效
| 申請號： | 201510828896.7 | 申請日： | 2015-11-25 |
| 公開（公告）號： | CN105462874B | 公開（公告）日： | 2019-04-30 |
| 發明（設計）人： | 王建龍;陰亞楠 | 申請（專利權）人： | 清華大學 |
| 主分類號： | C12N1/20 | 分類號： | C12N1/20;C12P3/00;C12R1/145 |
| 代理公司： | 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246 | 代理人： | 黃家俊 |
| 地址： | 100084 北京*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 丁酸 及其 發酵 中的 應用 | ||
1.一種丁酸梭菌，其特征在于，所述丁酸梭菌菌株為INET1，分類命名為Clostridiumbutyricum，在中國普通微生物菌種保藏管理中心的保藏號為CGMCC1.5199。
2.根據權利要求1所述的一種丁酸梭菌，其特征在于，所述丁酸梭菌的16S rDNA基因序列如SEQ ID No.1所示。
3.根據權利要求1所述的一種丁酸梭菌，其特征在于，所述丁酸梭菌的生物學特性為：菌株在36℃厭氧條件下培養24h，生長良好，可形成表面光滑、有凸起、邊緣整齊的乳白色菌落，菌落直徑為3-4mm；菌株革蘭氏染色呈陽性、嚴格厭氧；顯微鏡下細胞形態呈梭形，兩端鈍圓、中部輕度膨脹，有芽孢，無鞭毛。
4.權利要求1-3任意一項所述的丁酸梭菌在厭氧發酵產氫中的應用。
5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述丁酸梭菌在厭氧條件下發酵產氫的步驟為：
將丁酸梭菌從分離培養基上接種至富集培養基中，于35-38℃，80-120r/min條件下厭氧培養至菌株生長的對數期；
將培養至生長對數期的丁酸梭菌以5-30％的接種比接入初始pH＝5-10的發酵培養基中，在溫度25-40℃，80-120r/min條件下厭氧發酵20-48h產氫；
所述富集培養基的組分為：葡萄糖50g/L，蛋白胨10g/L，酵母粉0.5g/L，營養液10mL/100mL；
所述的分離培養基為含15％瓊脂的發酵培養基；
所述發酵培養基的組分為：有機物5-20g/L，營養液10mL/100mL；
所述營養液的組分為：NaHCO3 40g/L，NH4Cl 5g/L，NaH2PO4·2H2O 5g/L，K2HPO4·3H2O5g/L，FeSO4·7H2O 0.25g/L，MgCl2·6H2O 0.085g/L，NiCl2·6H2O0.004g/L。
6.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，所述的有機物為葡萄糖、蔗糖、乳糖或甘油。
7.根據權利要求6所述的應用，其特征在于，所述的丁酸梭菌以葡萄糖為底物時發酵產氫能力最強，隨后依次是乳糖、蔗糖和甘油。
8.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，所述發酵培養基優選的初始pH＝7。
9.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，所述丁酸梭菌厭氧發酵產氫時優選的接種比為10％。
10.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，所述丁酸梭菌厭氧發酵產氫時優選的培養溫度為35℃。
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