[發明專利]一種黑色素細胞激素的制備方法

在審

• 申請號: 201510826532.5
• 申請日: 2015-11-25
• 公開（公告）號: CN105384810A
• 公開（公告）日: 2016-03-09
• 發明（設計）人: 劉乃山;趙葉華;劉翠珍
• 申請（專利權）人: 青島康原藥業有限公司
• 主分類號: C07K14/68
• 分類號: C07K14/68;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30
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• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體地說涉及一種制備黑色素細胞激素的方法。

背景技術

黑色素細胞激素（MSH），是在1916年，從切除蛙的腦下垂體后，其表皮色素細胞及細胞內色素均減少的變化中發現的。1932年進一步證明對色素細胞有影響的一種激素，存在于腦下垂體的中葉。后來，臨床報告長期使用ACTH制品有引起皮膚黑色素沉著的作用，引起了人們的重視和深入的研究。

MSH來源于腦下垂體主要作用是促進皮膚黑色素細胞分泌黑色素，使皮膚變黑，對于皮膚、頭發的黑色素缺乏癥有顯著地療效。據稱，MSH能游離脂肪組織的的脂肪酸，改善人的視覺。

經專利檢索，并沒有黑色素細胞激素制備方法方面的專利文獻。

發明內容

本發明的目的是提供了一種黑色素細胞激素的制備方法。

本發明的技術方案是：將哺乳動物腦垂體經脫水干燥、取垂體前葉研磨成粉后，經有機溶劑、無機酸兩次提取，過濾去雜蛋白等步驟得黑色素細胞激素，包括如下步驟：

（1）原料處理：將豬腦垂體取出后，立即投入丙酮中，浸泡脫水3~5次，每次約24小時，至腦垂體變硬為止，分離前葉，真空干燥，磨粉，得前葉干粉；

（2）一次提?。喝∏叭~干粉，按1:5-1:10的比例加入丙酮，再按1:2-1:5的比例，加入0.5mol∕L~5mol∕L鹽酸溶液，攪拌溶解，加熱至40℃~60℃，保溫20~40分鐘，然后冷卻至10~25℃，離心20~40分鐘，過濾，取上清液，上清液預冷至1~5℃；

（3）二次提取：將一次提取中的渣子再加入步驟（2）一半量的丙酮0.05mol∕L~0.5mol∕L鹽酸溶液，攪拌溶解，加熱至40℃~60℃，保溫20~40分鐘，然后冷卻至10~25℃，離心20~40分鐘，去渣過濾，取上清液；

（4）沉淀：合并兩次上清液，將上清液冷卻至1~5℃，過濾至澄清；加入5~10倍量體積的丙酮，沉淀10~30分鐘后，去上清液，立即用丙酮洗滌去除沉淀物上的上清液，沉淀物用無水丙酮脫水洗滌2~5次；

（5）干燥：真空干燥，即得黑色素細胞激素。

本發明的優點和積極效果：

本制備方法的的優勢之處在于，工藝簡單，成本低，過程溫和，制得的黑色素細胞激素的效價達到3單位/mg。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明作進一步說明。

實施例1

所述的利用將哺乳動物腦垂體經脫水干燥、研磨成粉后，經有機溶劑、無機酸兩次提取，去雜蛋白過濾等步驟得黑色素細胞激素，包括如下步驟：

（1）原料處理：將豬腦垂體取出后，立即投入丙酮中，浸泡脫水3次，每次約24小時，至腦垂體變硬為止，分離前葉，分別干燥，磨粉，得前葉干粉；

（2）一次提取：取3.2kg前葉干粉，加入22.4L丙酮，在攪拌下加入10L的1mol∕L鹽酸溶液，攪拌溶解后，加熱至50℃，保溫28分鐘，然后冷卻至18℃，離心30分鐘，過濾，取上清液，上清液預冷至3℃；

（3）二次提?。簩⒁淮翁崛≈械脑蛹尤?1.2L丙酮，攪拌下加入5L的0.1mol∕L鹽酸溶液，攪拌溶解后，加熱至50℃，保溫30分鐘，然后冷卻至20℃，離心25分鐘，過濾，取上清液；

（4）沉淀：合并兩次上清液，將上清液冷卻至3℃，過濾至澄清；加入336L丙酮，沉淀15分鐘后，吸出上清液，立即用丙酮洗滌去除沉淀物上的上清液，沉淀物用無水丙酮脫水洗滌3次；

（5）干燥：真空干燥，天平稱重即得黑色素細胞激素成品230g。

實施例2

（1）原料處理：將豬腦垂體取出后，立即投入丙酮中，浸泡脫水4次，每次約24小時，至腦垂體變硬為止，分離前葉，分別干燥，磨粉，得前葉干粉；

（2）一次提?。喝?.6kg前葉干粉，加入21.6L丙酮，在攪拌下加入8L的1mol∕L鹽酸溶液，攪拌溶解后，加熱至40℃，保溫35分鐘，然后冷卻至25℃，離心20分鐘，過濾，取上清液，上清液預冷至2℃；

（3）二次提?。簩⒁淮翁崛≈械脑蛹尤?0.8L丙酮，攪拌下加入4L的0.1mol∕L鹽酸溶液，攪拌溶解后，加熱至40℃，保溫35分鐘，然后冷卻至20℃，離心20分鐘，過濾，取上清液；

（4）沉淀：合并兩次上清液，將上清液冷卻至2℃，過濾至澄清；加入200L丙酮，沉淀20分鐘后，吸出上清液，立即用丙酮洗滌去除沉淀物上的上清液，沉淀物用無水丙酮脫水洗滌5次；

（5）干燥：真空干燥，天平稱重即得黑色素細胞激素成品248g。

以上所述，僅是本發明的較佳實施例而已，并非是對本發明作其它形式的限制，任何熟悉本專業的技術人員可能利用上述揭示的技術內容加以變更或改型為等同變化的等效實施例。但是凡是未脫離本發明技術方案內容，依據本發明的技術實質對以上實施例所作的任何簡單修改、等同變化與改型，仍屬于本發明技術方案的保護范圍。