[發(fā)明專利]一種誘導人臍帶間充質(zhì)干細胞分化為胰島樣細胞的培養(yǎng)基及其誘導方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201510814060.1 | 申請日: | 2015-11-23 |
| 公開(公告)號: | CN105670986A | 公開(公告)日: | 2016-06-15 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 王意忠;崔曉蘭;時瀚;申義;山霞 | 申請(專利權(quán))人: | 王意忠 |
| 主分類號: | C12N5/071 | 分類號: | C12N5/071 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 100039 北京市海淀區(qū)*** | 國省代碼: | 北京;11 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 誘導 臍帶 間充質(zhì) 干細胞 化為 胰島 細胞 培養(yǎng)基 及其 方法 | ||
1.一種誘導人臍帶間充質(zhì)干細胞分化為胰島樣細胞的培養(yǎng)基,其特征在于:該培養(yǎng)基 含有以下組分:
活化素A2~6nmol/L
表皮生長因子20~30μg/L
β-神經(jīng)生長因子80~120μg/L
尼克酰胺5~15mmol/L
胰島素-轉(zhuǎn)鐵蛋白-硒0.5~1.5%
堿性成纖維細胞生長因子5~15μg/L
UItraCULTURE培養(yǎng)基余量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基,其特征在于:該培養(yǎng)基含有以下組分:
活化素A4nmol/L
表皮生長因子25μg/L
β-神經(jīng)生長因子100μg/L
尼克酰胺10mmol/L
胰島素-轉(zhuǎn)鐵蛋白-硒1%
堿性成纖維細胞生長因子10μg/L
UItraCULTURE培養(yǎng)基余量。
3.一種誘導人臍帶間充質(zhì)干細胞分化為胰島樣細胞的方法,包括以組織塊法提取人臍 帶間充質(zhì)干細胞進行分離培養(yǎng),將人臍帶間充質(zhì)干細胞用權(quán)利要求1~2任一所述的培 養(yǎng)基進行誘導培養(yǎng),誘導培養(yǎng)至少28天即可獲得胰島樣細胞。
4.權(quán)利要求3所述的誘導方法,其中所述分階段定向誘導的具體步驟為:
(1)在UltraCULTURE培養(yǎng)基中加入4nmol/L活化素A,25μg/L表皮生長因子,100μg/L β-神經(jīng)生長因子,10mmol/L尼克酰胺,培養(yǎng)至14d;
(2)在UltraCULTURE的培養(yǎng)基中加入1%胰島素-轉(zhuǎn)鐵蛋白-硒,10mmol/L尼克酰胺,10 μg/L堿性成纖維細胞生長因子,培養(yǎng)誘導時間為14d。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于:誘導培養(yǎng)至少28天后即可獲得成熟的胰島 樣細胞。
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