[發明專利]活化部分凝血活酶時間測定試劑盒及其制備方法

有效

• 申請號: 201510768217.1
• 申請日: 2015-11-12
• 公開（公告）號: CN105445478B
• 公開（公告）日: 2017-08-29
• 發明（設計）人: 馬全新;肖成;陳瑩
• 申請（專利權）人: 武漢中太生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/86
• 分類號: G01N33/86
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司44102
• 代理人: 倪婭,陳衛

技術領域

本發明涉及一種體外診斷試劑盒及其制備方法，尤其涉及一種活化部分凝血活酶時間測定試劑盒及其制備方法，屬于生物技術領域。

背景技術

機體的止血功能是由血小板、凝血系統、纖溶系統和血管內皮系統等的共同作用來完成的。過去我們曾用出血時間作為止血功能缺陷的篩檢試驗，但因其操作標準化程度不高，敏感性不好，且無法反映凝血因子的含量及活性，故目前已為凝血功能檢查所取代。凝血功能檢查主要是凝血四項——凝血酶原時間、活化部分凝血活酶時間、凝血酶時間和纖維蛋白原含量。凝血四項是檢驗科的重要臨檢項目，也是手術前必須檢測的項目之一，凝血四項檢測對了解檢查對象的凝血功能有重要意義。

活化部分凝血活酶時間(APTT)測定是內源性凝血因子缺乏最可靠的篩選試驗，是用來證實先天性或獲得性凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ的缺陷或是否存在它們相應的抑制物。APTT延長見于：(1)因子Ⅷ、Ⅸ和Ⅺ血漿水平減低，如血友病。(2)嚴重的凝血酶原(因子Ⅱ)因子Ⅴ、Ⅹ和纖維蛋白原缺乏，如肝臟疾病、阻塞性黃疸、新生兒出血癥、腸道滅菌綜合征、吸收不良綜合征、口服抗凝劑、應用肝素以及低(無)纖維蛋白原血癥。(3)纖容活力增強，如繼發性或原發性纖溶以及血循環中有纖維蛋白(原)降解物(FDP)。(4)血循環中有抗凝物質，如抗因子Ⅷ或Ⅸ抗體、SLE等。APTT縮短見于：(1)高凝狀態，如DIC的高凝血期，促凝物質進入血流以及凝血因子的活性增高等。(2)血栓性疾病，如心肌梗塞、不穩定性心絞痛、腦血管病變、糖尿病伴血管病變、肺梗死、深靜脈血栓形成、妊娠高血壓綜合征和腎病綜合征等。

由于市售的活化部分凝血活酶時間(APTT)測定試劑盒種類繁多且質量參差不齊，使得同個患者在不同的實驗室中測定的結果差別較大，使得檢測結果不準確，從而影響醫生對疾病的正確診斷與治療。因此，活化部分凝血活酶時間(APTT)測定試劑的質量成了準確的測定結果及正確診斷治療的關鍵性因素。同時，由于很多干粉試劑需復溶后使用，而復溶后的試劑穩定性又較差，又會給APTT測定的操作帶來麻煩并且造成不必要的浪費，因此，研制一種有效可靠、使用方便的活化部分凝血活酶時間(APTT)測定試劑無疑是相當必要的。

發明內容

為了克服上述現有背景技術中的不足，本發明提供一種活化部分凝血活酶時間測定試劑盒及其制備方法，該活化部分凝血活酶時間測定試劑盒免去了配制過程中的分裝和凍干等步驟，避免了使用過程中復溶所導致試劑穩定性和測定效果變差的問題，保證了試劑的穩定性，同時也避免了試劑的浪費，進一步得到準確性、重復性及穩定性等總體性能更好且操作更簡便的活化部分凝血活酶時間測定試劑。

為了實現上述目的，本發明提供一種活化部分凝血活酶時間測定試劑盒，包含磷脂試劑和氯化鈣試劑，兩種試劑儲存在不同容器中；

所述磷脂試劑由固體激活劑、磷脂和緩沖體系混合而成，所述固體激活劑的含量為0.01～2g/L，所述固體激活劑選自鞣花酸、皂土、高嶺土、硅藻土、硅酸鎂鋁其中一種或幾種的混合物；所述磷脂的含量為2.5～8wt％，所述緩沖體系的pH為6.0～8.0，所述緩沖體系中各組分含量為包括：0.1～1M的緩沖劑、0.01～0.2wt％的穩定劑、0.1～1.0wt％的聚乙二醇、其余為水；所述緩沖劑選自于：Tris-Hcl、Hepes、PBS、MPOS；所述穩定劑選自于：疊氮鈉、Kathon、Proclin、甘氨酸、牛血清白蛋白、硫柳汞、硝酸汞苯、氯仿、石炭酸；

所述氯化鈣試劑的工作濃度為15～40mM。

優選地，在上述技術方案中，所述固體激活劑的含量為0.05～1g/L。

優選地，在上述技術方案中，所述磷脂含量為5～7wt％。

優選地，在上述技術方案中，所述磷脂為兔腦磷脂。

優選地，在上述技術方案中，所述緩沖劑在緩沖體系中的含量為0.4～0.75M。

優選地，在上述技術方案中，所述穩定劑在緩沖體系中的含量為0.05～0.1wt％，更優選地，所述穩定劑為Kathon、甘氨酸、血清白蛋白的1:0.86:1.1的混合物。

優選地，在上述技術方案中，所述穩定劑選自于：疊氮鈉、Kathon、Proclin、甘氨酸、牛血清白蛋白、硫柳汞、硝酸汞苯、氯仿、石炭酸。

優選地，在上述技術方案中，所述聚乙二醇在緩沖體系中的含量為0.3～0.8wt％。

優選地，在上述技術方案中，所述氯化鈣試劑的工作濃度為20～35mM。