[發明專利]一種軟骨組織工程支架及其制備方法

有效

• 申請號: 201510724697.1
• 申請日: 2015-10-29
• 公開（公告）號: CN105268028B
• 公開（公告）日: 2018-09-25
• 發明（設計）人: 敖英芳;孟慶陽;黃洪杰;胡曉青;代嶺輝;邵振興
• 申請（專利權）人: 北京大學第三醫院
• 主分類號: A61L27/50
• 分類號: A61L27/50;A61L27/20;A61L27/22;A61L27/36
• 代理公司: 北京三高永信知識產權代理有限責任公司 11138
• 代理人: 江崇玉

1.一種軟骨組織工程支架，包括殼聚糖水凝膠外骨架，包覆在所述殼聚糖水凝膠外骨架中的至少一個表面修飾有骨髓間充質干細胞親和肽的脫鈣皮質骨基質微球；

所述脫鈣皮質骨基質微球的球徑為500-800μm；

所述殼聚糖水凝膠外骨架的彈性模量為6-8kPa；

每1ml所述殼聚糖水凝膠外骨架中，含有150-200mg的所述表面修飾有骨髓間充質干細胞親和肽的脫鈣皮質骨基質微球。

2.根據權利要求1所述的支架，其特征在于，每1mg所述脫鈣皮質骨修飾有300-400ng所述骨髓間充質干細胞親和肽。

3.根據權利要求1所述的支架，其特征在于，所述骨髓間充質干細胞親和肽為E7多肽。

4.權利要求1所述的軟骨組織工程支架的制備方法，包括：制備至少一個球徑為500-800μm的脫鈣皮質骨基質微球；

將骨髓間充質干細胞親和肽修飾到所述至少一個脫鈣皮質骨基質微球表面，并加入殼聚糖水凝膠溶液中，在32-38℃下進行凝膠化反應28-32min，使所述殼聚糖水凝膠溶液凝膠化成殼聚糖水凝膠外骨架，并將所述脫鈣皮質骨基質微球包覆在所述殼聚糖水凝膠溶液中，得到軟骨組織工程支架；

所述殼聚糖水凝膠外骨架的彈性模量為6-8kPa；

每1ml所述殼聚糖水凝膠外骨架中，含有150-200mg的所述表面修飾有骨髓間充質干細胞親和肽的脫鈣皮質骨基質微球。

5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述脫鈣皮質骨基質微球的制備方法如下：

將股骨上附著的軟組織剔去，獲取股骨的皮質骨，對所述皮質骨進行脫脂、脫鈣處理及清洗處理后，進行粉碎，得到脫鈣皮質骨基質微球，篩取球徑為500-800μm的所述脫鈣皮質骨基質微球，冷凍干燥后備用。

6.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述將骨髓間充質干細胞親和肽修飾到所述至少一個脫鈣皮質骨基質微球表面，具體為：

將所述脫鈣皮質骨基質微球置于1,6-已二胺溶液中浸泡1-2h，加入骨髓間充質干細胞親和肽以及交聯劑，進行交聯反應，獲得用骨髓間充質干細胞親和肽修飾的脫鈣皮質骨基質微球。

7.根據權利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述交聯劑為琥珀酰亞胺-4-(N-馬來酰亞胺)環已烷-1-1羥酸酯。

8.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述殼聚糖水凝膠溶液通過如下方法配制：

先配制殼聚糖的乙酸溶液，其中，每7.5g的殼聚糖溶于250-300ml的0.1mol/L的乙酸溶液中，高壓滅菌后于3-4℃保存；再配制質量濃度為50％-60％的甘油磷酸鈉溶液，除菌后于3-4℃保存；在冰浴環境中，將所述甘油磷酸鈉溶液滴加到所述殼聚糖的乙酸溶液中，攪拌至澄清，得到所述殼聚糖水凝膠溶液，室溫保存。

9.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述骨髓間充質干細胞親和肽為E7多肽。