[發(fā)明專利]馬齒莧中新生物堿Oleracone及其提取分離方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510665485.0
• 申請日: 2015-10-16
• 公開（公告）號: CN105330588A
• 公開（公告）日: 2016-02-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 英錫相;張文潔;孟一晗;英哲銘
• 申請（專利權(quán)）人: 遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
• 主分類號: C07D209/52
• 分類號: C07D209/52;A61P29/00
• 代理公司: 沈陽亞泰專利商標(biāo)代理有限公司 21107
• 代理人: 史力伏

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及中藥提取、分離領(lǐng)域，尤其涉及一種從馬齒莧藥材中提取、分離和鑒別出的新骨架生物堿及其提取分離方法。

背景技術(shù)

馬齒莧（PortulacaoleraceaL.）為馬齒莧科植物，2015版《中華人民共和國藥典》中收載馬齒莧的干燥地上部分入藥，具有清熱解毒、涼血止血、止痢等功效，用于熱毒血痢、癰腫疔瘡、濕疹、丹毒、蛇蟲咬傷、便血、痔血、崩漏下血等。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，馬齒莧具有抗菌抗病毒、降血壓、降血脂、抗氧化、抗癌、松弛骨骼肌和平滑肌、消炎止痛、調(diào)節(jié)免疫功能等作用；這些藥理作用與其主要化學(xué)成分包括黃酮類、香豆素、萜類、甾類、生物堿、氨基酸、各種色素類和礦物質(zhì)類等有很大關(guān)系。其中生物堿是馬齒莧中一類主要的化學(xué)成分，馬齒莧中含有去甲腎上腺素、多巴胺、少量多巴、腺苷、尿嘧啶、腺嘌呤、N，N-二環(huán)己基脲、尿囊素、N-反式-阿魏酰基酪胺；還有環(huán)二肽生物堿和酰胺類生物堿：馬齒莧酰胺A、B、C、D、E、F、G、H（OleraceinA-H）等。但是，對本發(fā)明中馬齒莧新骨架化合物的分離和藥理活性研究未見報(bào)道。

目前，從馬齒莧中分離出的化學(xué)成分大多數(shù)是已知的，并且是藥理活性比較弱的，因此對馬齒莧中新化合物的開發(fā)和分離是亟待需要的。

發(fā)明內(nèi)容

針對上述問題，本發(fā)明提供一種簡便、環(huán)保、快速，純度高的馬齒莧中新生物堿Oleracone及其提取分離方法。

為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，本發(fā)明提供一種馬齒莧中新生物堿，分子式為C₁₄H₁₇NO₂，命名為Oleracone，化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下。

本發(fā)明還提供一種馬齒莧中新生物堿Oleracone的提取分離方法，包括以下步驟。

步驟1、取馬齒莧干燥藥材，采用水煎煮提取，水提液過濾，合并濾液直接濃縮，得藥液備用。

步驟2、將步驟1中所得藥液直接經(jīng)預(yù)處理過的大孔吸附樹脂吸附除雜，分別以水和乙醇洗脫，對乙醇洗脫液進(jìn)行減壓濃縮，得到濃縮液備用。

步驟3、將步驟2中濃縮液用乙酸乙酯反復(fù)多次萃取，減壓回收乙酸乙酯至浸膏，得到乙酸乙酯萃取物。

步驟4、將步驟3中乙酸乙酯萃取物經(jīng)硅膠柱層析分離，依次用石油醚-丙酮梯度洗脫得到130個(gè)洗脫部位，按順序記為洗脫部位1-130，經(jīng)薄層色譜進(jìn)行檢測，顯色，合并90-130洗脫部位，將合并后的洗脫部位經(jīng)減壓濃縮至干，備用。

步驟5、將步驟4中所得物再經(jīng)ODS柱層析分離，用甲醇-水（30/70，v/v）等度洗脫，得到10個(gè)洗脫部位，按順序記為部位1-10，經(jīng)薄層色譜進(jìn)行檢測，顯色，將洗脫部位3減壓濃縮至干，得濃縮物備用。

步驟6、將步驟5中所得濃縮物經(jīng)SephadexLH-20（羥丙基葡聚糖凝膠），以甲醇-水（50/50，v/v）等度洗脫得到新骨架生物堿化合物。

本發(fā)明馬齒莧中新生物堿Oleracone在制備抗炎藥物中的應(yīng)用。

與現(xiàn)有技術(shù)相比本發(fā)明的有益效果。

本發(fā)明提供的馬齒莧中新生物堿Oleracone及其提取分離方法，依次用水煎煮提取、大孔吸附樹脂、乙酸乙酯萃取、硅膠柱層析、ODS中壓柱和SephadexLH-20，成功的分離出馬齒莧新骨架生物堿，這種化合物可以作為其他化合物合成先導(dǎo)物，以及新藥開發(fā)和藥理活性研究的原料，也可用于制備抗炎藥物。

附圖說明

圖1為本發(fā)明馬齒莧中新生物堿Oleracone的結(jié)構(gòu)式。

圖2為本發(fā)明馬齒莧中新生物堿Oleracone的IR譜圖。

圖3為本發(fā)明馬齒莧中新生物堿Oleracone的質(zhì)譜譜圖。

圖4為本發(fā)明馬齒莧中新生物堿Oleracone的¹³C譜圖。

圖5為本發(fā)明馬齒莧中新生物堿Oleracone的¹H譜圖。

圖6為本發(fā)明馬齒莧中新生物堿Oleracone的DEPT譜圖。

圖7為本發(fā)明X射線單晶衍射譜圖。

圖8為本發(fā)明馬齒莧中新生物堿Oleracone的H-HCOSY譜圖。

圖9為本發(fā)明馬齒莧中新生物堿Oleracone的HSQC譜圖。

圖10為本發(fā)明馬齒莧中新生物堿Oleracone的NOESY譜圖。

圖11為本發(fā)明馬齒莧中新生物堿Oleracone的HMBC譜圖。

圖12為oleracone對LPS刺激RAW264.7細(xì)胞產(chǎn)生NO的抑制作用示意圖。