[發明專利]一種基于二氧化鈰空心球構建的伏馬毒素傳感器的制備方法及應用

有效

• 申請號: 201510664276.4
• 申請日: 2015-10-14
• 公開（公告）號: CN105241932A
• 公開（公告）日: 2016-01-13
• 發明（設計）人: 魏琴;馬洪敏;范大偉;曹偉;羅川南;吳丹;龐雪輝;胡麗華
• 申請（專利權）人: 濟南大學
• 主分類號: G01N27/26
• 分類號: G01N27/26;G01N27/30
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種基于二氧化鈰空心球構建的伏馬毒素傳感器的制備方法，其特征在于，步驟如下：

（1）依次用1.0、0.3、0.05μm的氧化鋁粉末對玻碳電極進行拋光，分別在超純水和乙醇中超聲清洗，氮氣吹干；

（2）在電極表面滴加6μL濃度為1~2mg/mL的二氧化鈰空心球-亞甲基藍-殼聚糖-離子液體水溶液，干燥；

（3）繼續將6μL濃度為5~20μg/mL的伏馬毒素抗體溶液滴加到修飾電極表面，于4℃冰箱中孵化1h，清洗干凈；

（4）用3μL濃度為5~20mg/mL的牛血清白蛋白溶液封閉非特異性活性位點，于4℃冰箱中孵化1h，清洗干凈；

（5）將6μL濃度為0.0001~10ng/mL的一系列不同濃度的伏馬毒素抗原用于和抗體的特異性識別，室溫下孵化1h，清洗干凈，于4℃冰箱中儲存備用。

2.如權利要求1所述的一種基于二氧化鈰空心球構建的伏馬毒素傳感器的制備方法，所述二氧化鈰空心球-亞甲基藍-殼聚糖-離子液體的制備，其特征在于，步驟如下：

將0.05~0.2g七水合二氧化鈰和0.89~0.356g聚乙烯吡咯烷酮溶解在19mL水中，隨后加入0.5~2mL的甲酰胺和0.05~0.2mL的雙氧水，攪拌30min后，將上述混合溶液轉移到反應釜中，在180℃下反應24h，離心洗滌后干燥，得到二氧化鈰空心球；

將1mL的1~4mg/mL二氧化鈰空心球水溶液和1mL的1~4mg/mL亞甲基藍溶液混合，震蕩12h后離心，加入含有0.4~1.6mL的離子液體的濃度為10mg/mL的殼聚糖溶液，繼續震蕩1h，離心后重新分散在1mL的水中，得到二氧化鈰空心球-亞甲基藍-殼聚糖-離子液體水溶液；

所述殼聚糖為羧甲基殼聚糖，所述離子液體為1-丁基吡啶四氟硼酸鹽。

3.如權利要求1所述的制備方法制備的一種基于二氧化鈰空心球構建的伏馬毒素傳感器對伏馬毒素的檢測方法，其特征在于，步驟如下：

（1）使用電化學工作站以三電極體系進行測試，飽和甘汞電極為參比電極，鉑絲電極為輔助電極，所制備的傳感器為工作電極，在10mL的pH值為6.8的磷酸鹽緩沖溶液中進行測試；

（2）選擇差分脈沖伏安法對伏馬毒素抗原進行檢測，選擇在-0.6~0V電壓下進行掃描，記錄電流變化；

（3）將待測樣品溶液代替伏馬毒素抗原標準溶液進行檢測。