[發明專利]一種類風濕因子檢測試劑

有效

• 申請號: 201510554489.1
• 申請日: 2015-09-02
• 公開（公告）號: CN105181962A
• 公開（公告）日: 2015-12-23
• 發明（設計）人: 郁東;高雪萍;甘宜梧;謝清華;譚柏清
• 申請（專利權）人: 郁東
• 主分類號: G01N33/564
• 分類號: G01N33/564
• 代理公司: 濟南泉城專利商標事務所 37218
• 代理人: 賈波

技術領域

本發明涉及臨床體外檢測試劑技術領域，具體涉及一種準確度好、線性范圍寬的類風濕因子檢測試劑。

背景技術

類風濕因子（rheumatoidfactor，RF）檢測在臨床上是比較常用的檢測項目，主要用在對自身免疫性疾病的診斷，特別是對類風濕關節炎的診斷。類風濕因子（RF）是一種以變性IgG為靶抗原的自身抗體，是由于溶血性鏈球菌或其它細菌的代謝產物、慢性病毒等感染因子所引起的。RF最初由Rose和Waller（1984年）在類風濕性關節炎（RA）患者血清中發現。RF主要為19S的IgM，它與天然IgG結合的能力較差，最易與人和動物的變性IgG或免疫復合物中的IgG結合。有研究表明RF陽性率在正常人中只有2%，在老年人中是5%，而在RA患者體內可高達80%，因此普遍認為RF是RA患者體內發現的最有診斷價值的自身抗體，RA患者的RF越高，病越嚴重。

目前，類風濕因子的檢測方法主要有膠乳凝集法、雙抗原夾心ELISA法、免疫比濁法等。其中乳膠凝集法易受血脂等因素的影響，干擾因素較多，重復性不好，靈敏度及特異性不高，具有較高的假陽性，且只能進行定性或半定量測定，具有明顯的局限性和缺陷。雙抗原夾心ELISA法可對各種RF分子進行精確測定，但也存在耗時長，步驟多容易造成較大誤差，存在假陽性和假陰性等缺點。免疫比濁法的優點是反應速度快，可以標準化，可以使用全自動生化分析儀，適合大批量的自動化操作。免疫比濁法又分為免疫透射比濁法和速率散射比濁法，臨床研究表明免疫透射比濁法的抗干擾能力優于速率散射比濁法，同時免疫透射比濁法的速度更快于速率散射比濁法，但免疫透射比濁法在檢測高值時出現偏差，線性范圍較窄。

目前市面上主要流通的RF檢測試劑盒的檢測范圍在0-80IU/mL，研究表明在RA患者血清中若IgM型RF的效價>80IU/mL，且伴有嚴重關節功能障礙時，這就表明患者預后不良。因此，提高RF檢測試劑盒的檢測線性范圍是一項十分具有臨床意義的項目。

發明內容

本發明針對現有技術的缺點，在免疫透射比濁法的基礎上，優化反應體系，提供了一種準確度好、線性范圍寬的類風濕因子檢測試劑。

本發明的目的是通過如下技術方案實現的：

一種類風濕因子檢測試劑，是由試劑R1和試劑R2組成的；

所述的，試劑R1是由以下組分組成的：

磷酸鹽緩沖液50mmol/L

月桂基咪唑啉甜菜堿1ml/L-5ml/L

雙十八烷基二甲基氯化銨0.1ml/L-1ml/L

十二烷基三甲基氯化銨0.1g/L-1g/L

烷基酚聚氧乙烯醚(APEO)2g/L

羥基乙叉二膦酸1ml/L-5ml/L

疊氮化鈉0.095%

穩定劑SHE-500.15%

所述的，試劑R2是由以下組分組成的：

磷酸鹽緩沖液50mmol/L

熱聚合I人IgG30ml/L

膠乳微球5%

Kathon-CG0.05%

烷基酚聚氧乙烯醚(APEO)2g/L

疊氮化鈉0.095%。

所述的，試劑R1和試劑R2的體積比為4:1。

所述的，磷酸鹽緩沖液的pH為7.4。

本發明所用的膠乳微球來自于上海元升生物有限公司，產品批號為：PS2702。

本發明的試劑在具有雙試劑功能的全自動生化分析儀上進行，其具體使用方法如下：加入生理鹽水、樣本或校準品5μl，之后再加入R1試劑280μl預孵育5min后讀取吸光度A1，之后再加入70μl的試劑R2反應5min后，主波長為600nm，讀取吸光度A2，并計算ΔA。

本發明的有益效果：

1.本發明的試劑R1中添加入了月桂基咪唑啉甜菜堿、十二烷基三甲基氯化銨和雙十八烷基二甲基氯化銨三種表面活性劑，能有較好的提高試劑的乳化作用，從而提高試劑的準確度和特異性；

2.本發明采用新型表面活性劑烷基酚聚氧乙烯醚(APEO)，不僅顯著改善試劑的檢測性能，而且增強試劑的穩定性和抗干擾能力；

3.本發明的試劑R1中加入了羥基乙叉二膦酸，能夠有效的螯合重金屬離子，提高試劑的準確性；

4.本發明中的Kathon-CG是一種新型高效環保型廣譜殺菌劑、防腐劑，能夠有效地增強試劑盒的穩定性，卻不會影響試劑的準確度；

5.本發明試劑中的多種試劑協同作用，試劑的準確度和穩定性好，線性范圍更寬，價格便宜，使用方便，完全可以滿足臨床需要。

附圖說明