[發(fā)明專利]重組核酸片段RecCR023411及其檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510524698.1
• 申請(qǐng)日: 2015-08-24
• 公開（公告）號(hào): CN106480061B
• 公開（公告）日: 2021-03-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周發(fā)松;喻輝輝;張學(xué)堂;邱樹青;張小波;雷昉;律文堂;姚玥;馮芳;李菁;韋懿;陳光;何予卿;劉建豐;田冰川;張啟發(fā)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)種子集團(tuán)有限公司
• 主分類號(hào): C12N15/29
• 分類號(hào): C12N15/29;C12Q1/6895;C12N15/11;A01H1/02;A01H1/04
• 代理公司: 北京英賽嘉華知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11204
• 代理人: 王達(dá)佐;洪欣

1.重組核酸片段，其由以下的第一重組核酸片段和第二重組核酸片段組成：

-第一重組核酸片段，其為SEQ ID NO:1所示序列的序列或其互補(bǔ)序列；

-第二重組核酸片段，其為SEQ ID NO:2所示序列的序列或其互補(bǔ)序列。

2.檢測(cè)權(quán)利要求1所述片段的引物組，其中所述引物組由以下的檢測(cè)第一重組核酸片段的引物和檢測(cè)第二重組核酸片段的引物組成：

-檢測(cè)第一重組核酸片段的引物，其選自：

(I)特異性識(shí)別SEQ ID NO:1所示序列1-1274位核苷酸的序列的正向引物和特異性識(shí)別SEQ ID NO:1所示序列1810-1979位核苷酸的序列的反向引物；

(II)以下第一組引物對(duì)與第二組引物對(duì)的組合，其包含

(a)第一組引物對(duì)：特異性識(shí)別SEQ ID NO:1所示序列第1-1274位核苷酸的序列的正向引物和特異性識(shí)別SEQ ID NO:1所示序列第1275-1809位核苷酸的序列的反向引物；和

(b)第二組引物對(duì)：特異性識(shí)別SEQ ID NO:1所示序列第1275-1809位核苷酸的序列的正向引物和特異性識(shí)別SEQ ID NO:1所示序列第1810-1979位核苷酸的序列的反向引物；

-檢測(cè)第二重組核酸片段的引物，其選自：

(III)特異性識(shí)別SEQ ID NO:2所示序列1-216位核苷酸的序列的正向引物和特異性識(shí)別SEQ ID NO:2所示序列773-994位核苷酸的序列的反向引物；

(VI)以下第三組引物對(duì)與第四組引物對(duì)的組合，其包含

(c)第三組引物對(duì)：特異性識(shí)別SEQ ID NO:2所示序列第1-216位核苷酸的序列的正向引物和特異性識(shí)別SEQ ID NO:2所示序列第217-772位核苷酸的序列的反向引物；和

(d)第四組引物對(duì)：特異性識(shí)別SEQ ID NO:2所示序列第217-772位核苷酸的序列的正向引物和特異性識(shí)別SEQ ID NO:2所示序列第773-994位核苷酸的序列的反向引物。

3.檢測(cè)權(quán)利要求1所述片段的引物組，其中所述引物組為：

(I)擴(kuò)增SEQ ID NO:1所示序列的引物對(duì)

5’-AATAGTCCGACCTGGAATGAAAT-3’，

5’-TCTTTCGAGCGGATCTAATGC-3’；

(II)測(cè)序SEQ ID NO:1所示序列的引物

5’-AATAGTCCGACCTGGAATGAAAT-3’；

5’-ACCGCTTCCCTATCCTATTT-3’；

5’-CTGTGATTTGCTATGGGTAA-3’；

5’-TCTTTCGAGCGGATCTAATGC-3’；

(III)擴(kuò)增SEQ ID NO:2所示序列的引物對(duì)

5’-TCATGCTCCCCATGATCTTGTT-3’，

5’-AATTATGTGCCTCCGTACCACC-3’；以及

(IV)測(cè)序SEQ ID NO:2所示序列的引物

5’-TCATGCTCCCCATGATCTTGTT-3’；

5’-CGAGACTTGAAAGCCACAGA-3’；

5’-AATTATGTGCCTCCGTACCACC-3’。

4.檢測(cè)權(quán)利要求1所述的重組核酸片段的方法，其包括采用權(quán)利要求2或3所述的引物組，以待測(cè)基因組為模板進(jìn)行PCR反應(yīng)，并分析擴(kuò)增產(chǎn)物的步驟。

5.檢測(cè)權(quán)利要求1所述的重組核酸片段的試劑盒，其包括權(quán)利要求2或3所述的引物組。

6.篩選含有權(quán)利要求1所述的重組核酸片段的水稻植株或種子的方法，其包括檢測(cè)待測(cè)水稻植株或種子的基因組中是否含有權(quán)利要求1所述的重組核酸片段的步驟。

7.如權(quán)利要求6所述的方法，其中采用權(quán)利要求2或3所述的引物組來檢測(cè)待測(cè)水稻植株或種子的基因組中是否含有權(quán)利要求1所述的重組核酸片段。