[發明專利]一株高效轉化富馬酸生產L-天冬酰胺的工程菌及其應用在審
| 申請號： | 201510445371.5 | 申請日： | 2015-07-27 |
| 公開（公告）號： | CN105154379A | 公開（公告）日： | 2015-12-16 |
| 發明（設計）人： | 程池;張奇;徐友強;裴疆森;李金霞;劉波 | 申請（專利權）人： | 中國食品發酵工業研究院 |
| 主分類號： | C12N1/21 | 分類號： | C12N1/21;C12P13/20;C12R1/19 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 100015 北京*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 高效 轉化 富馬酸 生產 天冬 工程 及其 應用 | ||
【權利要求書】：
1.本發明公開一株基因工程菌E.coli11022S/pET28-asnACICC11033S。
2.如權利要求1所述基因工程菌株，是一株用于生產l-天冬酰胺的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌是含有l-天冬酰胺合成酶基因載體pET28-asnA，宿主為高產L-天冬氨酸酶的E.coliCICC11022S，l-天冬酰胺合成酶基因來源于E.coliJM109或者其他能夠表達相同功能酶的微生物。
3.如權利要求2所述基因工程菌，其特征在于，可以高效表達l-天冬酰胺合成酶和L-天冬氨酸酶，并轉化富馬酸生產l-天冬酰胺；轉化體系以氨水調pH7-9，葡萄糖0.01-0.03M（或0.8-1.2MATP），氯化鎂1-3mM，富馬酸0.8-1.2M，菌體濃度為OD600nm=10-20，25-50oC，30-80rpm攪拌，轉化6-14h。
4.如權利要求3所述轉化過程，優選體系為pH8.0，0.02M葡萄糖，2mM氯化鎂，底物富馬酸濃度為1M，菌體濃度為OD600=12，37oC，50rpm，10h。
5.如權利要求3所述轉化過程，葡萄糖通過活菌體細胞ATP再生系統產生ATP，為L-天冬酰胺合成酶轉化L-天冬氨酸生產L-天冬酰胺提供ATP。
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