[發(fā)明專利]一種恢復耐藥菌敏感性的微囊及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510406276.4
• 申請日: 2015-07-11
• 公開（公告）號: CN105018376B
• 公開（公告）日: 2018-03-30
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳暢;姬金麗;黃光美
• 申請（專利權(quán)）人: 北京化工大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20
• 代理公司: 北京太兆天元知識產(chǎn)權(quán)代理有限責任公司11108
• 代理人: 張洪年

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于藥物制備技術(shù)領(lǐng)域，具體來說，涉及到一種恢復耐藥菌敏感性的微囊及其制備方法。

背景技術(shù)

一氧化氮(nitric oxide，NO)是一種具有多種生物活性的氣體小分子物質(zhì)。在體內(nèi)由NO前體物質(zhì)L-精氨酸在一氧化氮合酶(NOS)的催化下與氧分子作用產(chǎn)生NO和L-胍氨酸。NO普遍存在于脊椎動物的各種細胞，如內(nèi)皮細胞、巨噬細胞、神經(jīng)細胞中，是細胞間和細胞內(nèi)信息傳遞的重要調(diào)節(jié)因子，同時還是宿主免疫反應中一種細胞毒性因子。它被證實具有多種生物學活性，這包括調(diào)節(jié)血管擴張和血流、神經(jīng)信號傳遞、信號轉(zhuǎn)導、免疫調(diào)制、細胞的氧化還原狀態(tài)、肝細胞的凋亡及防御微生物等。一氧化氮供體(NO donor)是指一類能在體內(nèi)經(jīng)酶促反應或非酶促反應引入并釋放外源性NO的一類前體藥物。NO在病理生理過程中具有廣泛且重要的作用，隨著對NO認識的不斷深入，人們對NO供體的研究興趣也越來越高。

在近十幾年，許多具有不同生物學特性和治療潛力的NO供體都已被合成，按其結(jié)構(gòu)類型，常用的大致包括有機硝酸酯類如硝酸甘油(NG)、斯德酮亞胺類如嗎多明、亞硝基硫醇類如S-亞硝基卡托普利、NO-供體復合類如NO-阿司匹林(NCX-4061)以及金屬-NO配合物類如硝普鈉等。但傳統(tǒng)的NO供體在使用時，一方面，它只在溶液中釋放NO，因NO的生物半衰期極短，只有10s左右，一旦生成就會被迅速氧化，導致細胞內(nèi)的NO很難達到有效濃度；另一方面，NO釋放缺乏特異性使其在攻擊目的細胞的同時，也可殺傷正常細胞，如促進肝細胞纖維化等。因此，NO供體的組織特異性在NO控釋中越來越受到重視。

有文獻報道，設(shè)計并合成了一個新型的糖基化NO供體化合物β-半乳糖基化偶氮烯翁二醇(β-Gal-NONOate)，其利用半乳糖連接偶氮烯翁二醇末端氧來保護在水溶液中易自發(fā)分解產(chǎn)生NO的偶氮烯翁二醇，此外，更主要的是，由于分子中引入了半乳糖，使其對高表達β-半乳糖苷酶的病菌及腫瘤細胞具有了特異性。實驗表明：在異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的誘導下，β-半乳糖基化偶氮烯翁二醇具有恢復耐藥菌敏感性的作用，且與氨芐青霉素(Amp)聯(lián)合應用后具有協(xié)同作用。然而，β-半乳糖基化偶氮烯翁二醇和氨芐青霉素在處理耐藥菌時，若要使恢復敏感性的協(xié)同效應達到最大，NO供體與氨芐青霉素如何連接，從而實現(xiàn)靶向性？溶解NO供體藥物和氨芐青霉素的最佳溶劑該如何選擇？比例多少？采用何種制劑技術(shù)，才能使組合藥物能夠更穩(wěn)定、作用時間更持久、作用效果更好？這些問題都還未解決。

發(fā)明內(nèi)容

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種穩(wěn)定性好、協(xié)同作用強的恢復耐藥菌敏感性的微囊及其制備方法。

本發(fā)明所述的一種恢復耐藥菌敏感性的微囊由β-半乳糖基化偶氮烯翁二醇、氨芐青霉素、賴氨酸的反應產(chǎn)物與異丙基硫代半乳糖苷、囊材、乳化劑、甜味劑、防腐劑、抗氧劑和附加劑配制乳化而成；β-半乳糖基化偶氮烯翁二醇、氨芐青霉素、異丙基硫代半乳糖苷與賴氨酸的質(zhì)量比為1-2:1-6:1-4:1-8；按微囊總質(zhì)量百分數(shù)計，囊材為1.5％-3.5％、乳化劑為0.1％-0.5％、甜味劑為0.03％、防腐劑為0.01％-0.05％、抗氧劑為0.1％-0.2％、附加劑為0.25％。

本發(fā)明所述的一種恢復耐藥菌敏感性的微囊，所述囊材為海藻酸鈉；所述甜味劑為糖精鈉；所述乳化劑為吐溫80；所述防腐劑為桉葉油80；所述抗氧劑為焦亞硫酸鈉或小花金挖耳素；所述附加劑為局部止痛劑利多卡因。

本發(fā)明所述的恢復耐藥菌敏感性的微囊的制備方法，所述制備方法具體為：1)在室溫環(huán)境下，把β-半乳糖基化偶氮烯翁二醇配制成pH為7的10mM的磷酸鹽緩沖溶液；2)然后加入氨芐青霉素，攪拌下用2wt％的氫氧化鈉溶液維持體系pH為7，加熱至沸騰，蒸餾反應完畢后，取揮發(fā)性成分，濾去不溶物，將濾液濃縮過硅膠柱，用醇水溶液洗脫，收集最先流出的色帶，得氨芐青霉素-β-半乳糖基化偶氮烯翁二酯；3)將氨芐青霉素-β-半乳糖基化偶氮烯翁二酯與賴氨配制于醇水溶液中，其中氨芐青霉素-β-半乳糖基化偶氮烯翁二酯濃度為2-5mg/ml，控制溫度為70-105℃、反應時間1-1.5h，濾除反應液，即得氨芐青霉素-β-半乳糖基化偶氮烯翁二酯與賴氨酸復合物；4)將海藻酸鈉用水配成溶液，再和氨芐青霉素-β-半乳糖基化偶氮烯翁二酯與賴氨酸復合物、異丙基硫代半乳糖苷、甜味劑、防腐劑、抗氧劑、附加劑及吐溫80進行乳化，將乳化液加入CaCl₂溶液中，凝聚、固化，自然干燥即得微囊。