[發(fā)明專利]一種晾曬煙中異丁烯基黃酮的制備及其抗煙草花葉病毒的用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510381632.1
• 申請(qǐng)日: 2015-07-02
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105017198B
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-05-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 申欽鵬;劉春波;繆明明;楊光宇;劉志華;張鳳梅;何沛;司曉喜;王晉;蘇鐘璧;陳永寬;朱瑞芝;王昆淼
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 云南中煙工業(yè)有限責(zé)任公司
• 主分類(lèi)號(hào): C07D311/30
• 分類(lèi)號(hào): C07D311/30;C07D311/40;A01P1/00
• 代理公司: 北京權(quán)泰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙)11460
• 代理人: 任永利

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于植物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種源于云南地方晾曬煙中異丁烯基黃酮類(lèi)化合物及其制備方法與應(yīng)用。

背景技術(shù)

云南地方晾曬煙是煙草的云南特有變種，煙草從明萬(wàn)歷末年進(jìn)入云南，至清乾隆年間成為當(dāng)?shù)爻Ｒ?jiàn)的農(nóng)作物。云南自然條件好，溫暖的河谷，冷涼的半山區(qū)、山區(qū)都適應(yīng)煙草的生長(zhǎng)。而且云南多樣的氣候、地理環(huán)境，煙草在多年的栽培過(guò)程中形成了很多個(gè)具有地方特色的晾曬煙品種，其中著名的有：羅平八大河煙、師宗五洛河煙、會(huì)澤樂(lè)業(yè)煙、蒙自新安所煙、富源大河煙、大姚趙戶沖煙、云龍?zhí)斓菬煛①e川白塔煙、巍山南門(mén)煙、南澗樂(lè)居煙、騰沖綺羅生煙等。這些晾曬煙在當(dāng)?shù)爻Ｊa(chǎn)不衰；但其次生代謝產(chǎn)物的研究還從未見(jiàn)報(bào)道過(guò)。

黃酮(flavone)，是黃酮類(lèi)化合物的總稱，泛指兩個(gè)具有酚羥基的苯環(huán)(A-與B-環(huán))通過(guò)中央三碳原子相互連結(jié)而成的一系列化合物。研究表明，黃酮類(lèi)化合物具有心血管系統(tǒng)活性、抗菌及抗病毒活性、抗腫瘤活性、抗氧化自由基活性、抗炎、鎮(zhèn)痛、抗變態(tài)等多種藥理活性。同時(shí)已有研究證實(shí)，其藥理作用與化學(xué)結(jié)構(gòu)密切相關(guān)，為了研究這類(lèi)化合物的構(gòu)效關(guān)系，可進(jìn)一步研究和開(kāi)發(fā)更多的黃酮類(lèi)化合物，從中尋找有效的先導(dǎo)化合物和活性基團(tuán)。本發(fā)明從云南地方晾曬煙中分離得到了一種新的異丁烯基黃酮類(lèi)化合物，該化合物至今尚未見(jiàn)到相關(guān)報(bào)道，值得一提的是該化合物具有顯著的抗煙草花葉病病毒活性。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一方面在于提供一種結(jié)構(gòu)新穎的異丁烯基黃酮類(lèi)化合物，該化合物從云南地方晾曬煙中分離得到，其分子式為C₂₁H₂₀O₆，經(jīng)過(guò)分析化學(xué)鑒定，其具有下述結(jié)構(gòu)：

該化合物為橘黃色粉末，按IUPAC系統(tǒng)命名法將其命名為：4',7-二甲氧基-6-羥基-8-氧化異丁烯基黃酮。

本發(fā)明人將其英文名命名為4',7-dimethoxy-6-hydroxy-8-[(E)-3-hydroxy-2-methylprop-1-enyl]-flavone。

本發(fā)明的第二方面提供了上述第一方面所述的黃酮類(lèi)化合物的制備方法，該方法包括如下步驟：

a.制備晾曬煙提取物浸膏：以晾曬煙葉片為原料，將其粉碎并用第一溶劑浸泡并提取所述煙草2～4次，每次12h～72h，將提取液合并、過(guò)濾并濃縮后得到所述煙草提取物浸膏；其中所述第一溶劑是選自乙醇、甲醇或丙酮的有機(jī)溶劑與水的混合物，其中有機(jī)溶劑占該第一溶劑的60wt％～100wt％，且第一溶劑：煙草＝1.5～4:1，重量比；

b.硅膠柱層析：將上述煙草提取物浸膏用選自純甲醇、純乙醇或純丙酮的第二溶劑溶解后與為晾曬煙提取物浸膏的1～1.6重量倍的60～120目硅膠拌樣，將拌樣后的混合物再與為晾曬煙提取物浸膏的2～5重量倍的160～300目硅膠混合后干法裝柱，然后用體積比依次為10:0、9:1、8:2、7:3、6:4和5:5的一系列氯仿-甲醇溶液進(jìn)行梯度洗脫，收集其中用體積比為9:1的氯仿-甲醇溶液洗脫時(shí)得到的洗脫液，稱為第一洗脫液；將上述第一洗脫液用硅膠層析柱繼續(xù)分離，用體積比依次為15:1、12:1、10:1、8:2、7:3和2:1的一系列氯仿-丙酮溶液進(jìn)行梯度洗脫，收集其中用體積比為7:3的氯仿-丙酮溶液洗脫時(shí)得到的洗脫液，稱為第二洗脫液；

c.高壓液相色譜分離：將上述7:3洗脫部分通入高壓液相色譜進(jìn)行分離純化，該高壓液相色譜采用21.2mm×250mm，5μm的C₁₈色譜柱，流動(dòng)相為48wt％的甲醇水溶液，流動(dòng)相流速為12mL/min，紫外檢測(cè)器檢測(cè)波長(zhǎng)為364nm，第二洗脫液液每次進(jìn)樣60～150μL，收集每次進(jìn)樣后色譜峰保留時(shí)間為20.6min時(shí)所對(duì)應(yīng)的洗脫液，蒸干溶劑后即得所述黃酮類(lèi)化合物。

前述高壓是指使用時(shí)壓力在5-15MPa的反相制備色譜。

在優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明還包括以下進(jìn)一步提純的步驟：將在所述高壓液相色譜分離之后得到的所述黃酮類(lèi)化合物再次溶于甲醇溶液，并以甲醇溶液的為流動(dòng)相，通過(guò)凝膠柱進(jìn)行層析分離，提到進(jìn)一步提純的所述黃酮類(lèi)化合物。

本發(fā)明的第三方面提供了第一方面所述的黃酮類(lèi)化合物在制備抗煙草花葉病毒藥物中的應(yīng)用。

附圖說(shuō)明

圖1為本發(fā)明的新型黃酮類(lèi)化合物的核磁共振碳譜。

圖2為本發(fā)明的新型黃酮類(lèi)化合物的核磁共振氫譜。

圖3為本發(fā)明的新黃酮類(lèi)化合物的主要HMBC相關(guān)圖示。

具體實(shí)施方式