[發(fā)明專利]一種利用棘孢木霉菌合成納米銀的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510367573.2
• 申請(qǐng)日: 2015-06-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105039419A
• 公開(kāi)（公告）日: 2015-11-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙蕾;張嬌嬌
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東師范大學(xué)
• 主分類號(hào): C12P3/00
• 分類號(hào): C12P3/00;C12R1/885
• 代理公司: 濟(jì)南圣達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37221
• 代理人: 趙妍

1.一種利用棘孢木霉菌合成納米銀的方法，其特征在于：包括如下步驟：在棘孢木霉菌培養(yǎng)上清液中加入銀離子和硝酸鹽，使銀離子的濃度為1-5mmol/L，硝酸鹽的濃度為0.1-0.15mol/L，26-30℃下避光培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間為24-72h，即得納米銀。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用棘孢木霉菌合成納米銀的方法，其特征在于：所述硝酸鹽為硝酸鉀，所述硝酸鉀的濃度為0.1mol/L，培養(yǎng)的時(shí)間為2d。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的利用棘孢木霉菌合成納米銀的方法，其特征在于：所述棘孢木霉菌的培養(yǎng)上清液的獲得方法，包括如下步驟：

1)木霉菌孢子懸液的制備：將木霉菌株接種于培養(yǎng)基平板上進(jìn)行培養(yǎng)后，得到木霉菌孢子，取適量孢子，制得孢子懸液；

2)KNO₃最佳濃度的確定：取上述相同體積的孢子懸液接種到相同體積的含有不同濃度的KNO₃的液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)，每隔設(shè)定時(shí)間進(jìn)行取樣，測(cè)定上清液的硝酸還原酶活性，進(jìn)而確定KNO₃的最佳濃度；

3)棘孢木霉菌的培養(yǎng)：將孢子懸液接種于含有最佳濃度KNO₃的液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)；得到棘孢木霉菌培養(yǎng)上清液。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的利用棘孢木霉菌合成納米銀的方法，其特征在于：步驟1)中，所述的培養(yǎng)基為土豆培養(yǎng)基，土豆培養(yǎng)基由以下重量份的組分組成：馬鈴薯19.5-20.5份，葡萄糖1.5-2.5份，瓊脂1.5-2份，去離子水99.5-100.5份。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的利用棘孢木霉菌合成納米銀的方法，其特征在于：步驟1)中，培養(yǎng)的溫度為26-30℃，培養(yǎng)的時(shí)間為3-5d。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的利用棘孢木霉菌合成納米銀的方法，其特征在于：步驟1)中，所述孢子懸液的濃度為1×10⁷-10⁸CFUml^-1。

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的利用棘孢木霉菌合成納米銀的方法，其特征在于：步驟2)中，培養(yǎng)的溫度為26-30℃，培養(yǎng)的時(shí)間為4-6d。

8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的利用棘孢木霉菌合成納米銀的方法，其特征在于：步驟2)中，上清液的硝酸還原酶活性的測(cè)定方法，包括如下步驟：將上清液和pH為7.5的緩沖液混勻，避光反應(yīng)后，沸水浴反應(yīng)，向反應(yīng)溶液中加入磺胺溶液和N-1-萘基乙二胺溶液，混勻后靜置，540nm處比色，觀察顏色變化，所述緩沖液為含有30mMKNO₃和5％異丙醇的磷酸緩沖液。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的利用棘孢木霉菌合成納米銀的方法，其特征在于：所述磺胺溶液的質(zhì)量濃度為1％，N-1-萘基乙二胺溶液的濃度為0.02％，所述上清液、緩沖液、磺胺溶液以及N-1-萘基乙二胺溶液的體積比為2：2：1：1。

10.根據(jù)權(quán)利要求3所述的利用棘孢木霉菌合成納米銀的方法，其特征在于：步驟3)中，孢子懸液與液體培養(yǎng)基的體積比為1:100，培養(yǎng)的溫度為26-30℃，培養(yǎng)的時(shí)間為36-48h。