[發(fā)明專利]一種基于CRISPR-Cas9基因敲除技術(shù)的miR-205基因敲除試劑盒有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201510296784.1 | 申請日： | 2015-06-02 |
| 公開（公告）號： | CN105112445B | 公開（公告）日： | 2018-08-10 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 江福能;鄒翠云;鐘惟德;劉文華 | 申請（專利權(quán)）人： | 廣州輝園苑醫(yī)藥科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/85 | 分類號： | C12N15/85;C12N15/113 |
| 代理公司： | 廣州三環(huán)專利商標代理有限公司 44202 | 代理人： | 劉孟斌;劉宇峰 |
| 地址： | 510530 廣東省廣州市經(jīng)濟技術(shù)*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 基于 crispr cas9 基因 技術(shù) mir 205 試劑盒 | ||
1.一種基于CRISPR-Cas9基因敲除技術(shù)的miR-205基因敲除試劑盒，包括：
1）質(zhì)粒miR-205-Cas9，其含有一段互補的DNA序列，其序列為SEQ ID No:6和SEQ IDNo:7；該DNA序列能被轉(zhuǎn)錄為特異識別序列如SEQ ID NO:2所示的miR-205基因的靶標序列的sgRNA，該sgRNA能與trRNA構(gòu)成特異的識別結(jié)構(gòu)，以致引導Cas9酶特異地剪切miR-205基因?qū)?yīng)序列；
2）以及配套的檢測試劑，用于檢測miR-205基因的剪切效果和評估基因敲除效率。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的miR-205基因敲除試劑盒，其特征在于，所述質(zhì)粒miR-205-Cas9是用包括如下步驟的方法構(gòu)建的：
以PXC9-puro質(zhì)粒為起始載體，先用Bbsl酶切并回收骨架；
設(shè)計合成SEQ ID No:6和SEQ ID No:7兩個帶有接頭的核苷酸序列，合成好后稀釋并退火作為插入片段；
用T4 DNA 連接酶在16℃連接2 h將骨架和接入片段接上，連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化，挑克隆測序鑒定，獲得表達質(zhì)粒PXC9--puro-miR205-sgRNA。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于廣州輝園苑醫(yī)藥科技有限公司，未經(jīng)廣州輝園苑醫(yī)藥科技有限公司許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201510296784.1/1.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
- 上一篇：一種車輛防傾斜支撐裝置
- 下一篇：校車用主動式兒童安全氣囊裝置
- 一種成簇的規(guī)律間隔的短回文重復序列識別方法及裝置
- 一種基于CRISPR-Cas9系統(tǒng)的基因編輯載體及其應(yīng)用
- 一種阪崎克羅諾桿菌CRISPR分型方法
- 降低脫靶效應(yīng)的CRISPR酶突變
- CRISPR報告體非人類動物及其用途
- 無PAM限制的CRISPR/Cas9系統(tǒng)及其應(yīng)用
- 基于CRISPR效應(yīng)系統(tǒng)的擴增方法、系統(tǒng)和診斷
- CRISPR/Cas9雙靶點靶向敲除目的基因載體構(gòu)建方法
- CRISPR雜合DNA/RNA多核苷酸及使用方法
- III-A型CRISPR-Cas系統(tǒng)抑制劑AcrIIIA2及其應(yīng)用
