[發明專利]珊瑚豆堿在制備抗腫瘤藥物中的應用

在審

• 申請號: 201510263739.6
• 申請日: 2015-05-22
• 公開（公告）號: CN104906122A
• 公開（公告）日: 2015-09-16
• 發明（設計）人: 劉東鋒;楊成東
• 申請（專利權）人: 南京澤朗醫藥科技有限公司
• 主分類號: A61K31/706
• 分類號: A61K31/706;A61P35/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于醫藥領域，涉及珊瑚豆堿在制備抗腫瘤藥物中的應用。

背景技術

珊瑚豆堿，無色針晶，mp.220～221℃，[α]21/D-25.5°(c=0.1，氯仿)，分子式為C33H55NO7，分子量為577.8。珊瑚豆堿（Alexine）屬生物堿類化合物，具有保肝作用，0.1～3mg/kg時，對小鼠CCl4引起的肝損害有強的抑制作用；還具有細胞毒活性，體外對肝癌PLC/PRF/5細胞的ED₅₀為1.78μg/ml。

珊瑚豆堿主要來源于茄科茄科(Solanaceae)?珊瑚豆?Solanum?capsicastrum?Link.根皮。

通過文獻檢索，?國內尚未見珊瑚豆堿用于制備抗腫瘤藥物。

發明內容

為滿足臨床需要，擴大用藥品種，更好地治療癌癥，應用珊瑚豆堿制備抗腫瘤藥物。

本發明的技術方案如下：

本發明所述的珊瑚豆堿，其制備方法包括以下步驟：

（1）取珊瑚豆根皮粉碎，按固液體積比為5：1.5-2加入夾帶劑，在壓力22-35MPa，溫度35-48℃條件下，通入液態CO₂萃取90-180min，在壓力7-9MPa，溫度30-35℃條件下解析，收集萃取液；

（2）將步驟（1）中得到的萃取液加硅藻土攪拌脫色，過濾得到脫色液；

（3）將步驟（2）中得到的脫色液濃縮至相對密度為1.12，上中性氧化鋁柱，用石油醚-乙酸乙酯洗脫純化，得到珊瑚豆堿粗品；

（4）粗品經過制備型高效液相色譜精制得到高純度的珊瑚豆堿。

所述步驟（1）中，夾帶劑為甲醇或乙醇溶液。

所述步驟（2）中，硅藻土加入量為藥材量的3-4.5%

所述步驟（3）中，石油醚-乙酸乙酯的體積比為3:14。

所述步驟（4）中，制備型高效液相色譜流動相為甲醇-乙腈-水，體積比為19:38:45。

珊瑚豆堿在制備抗腫瘤藥物中的應用。

通過體外腫瘤細胞體外抑制試驗，觀察珊瑚豆堿的抗腫瘤作用，結果表明珊瑚豆堿對GLC4肺癌和COLO結腸癌均有一定的抑制作用，具有顯著抗癌活性，且其毒副作用小。

本發明的有益效果通過以下實驗得到了驗證：

實驗方法：

1、受試提取物：珊瑚豆堿提取物

（1）性狀：結晶，味苦。

（2）規格：含珊瑚豆堿≥90%。

（3）溶劑：乙醇或甲醇。

（4）儲存條件：4℃，密封保存。

2、細胞株：肺癌細胞株GLC4、結腸癌細胞株COLO。

3、給藥劑量和方法

珊瑚豆堿組：10mg/kg/天，灌胃給藥，隔一天一次，共五天。

陰性對照組：10mg/kg/天，生理鹽水肌注給藥，隔一天一次，共五天。

陽性對照組：30mg/kg/天，5-氟尿嘧啶肌注給藥，隔一天一次，共五天。

灌胃后2h，用HPLC檢測血漿藥物濃度。

4、種植瘤模型的建立與給藥

（1）皮下種植：分別將上述細胞培養至90%融合，收集細胞，取2×10^?6細胞懸液，注射至小鼠肋下皮下組織，于術后15天取材，稱量瘤重。另取同樣模型，觀察30天，計算藥物對模型動物存活率的影響。

（2）肺內種植瘤肺轉移模型：取2×10^?6細胞懸液注射至小鼠肺包膜內，于術后15天取肺，測量瘤重和肺轉移數。

（3）給藥方式：種植瘤細胞同時給藥。

5、結果

結果如表1、表2和表3顯示，珊瑚豆堿組用藥均有不同程度的抑制腫瘤生長和轉移的作用，可延長實驗小鼠的生存期。

表1??珊瑚豆堿對種植瘤的抑制作用（n=20，?±S）

表2??珊瑚豆堿對腫瘤轉移發生率的影響（n=20，%）

表3??珊瑚豆堿對實驗小鼠生存率的影響（n=20，%）