[發(fā)明專利]綜合微生物的培養(yǎng)方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510241971.X
• 申請日: 2015-05-13
• 公開（公告）號: CN104893977A
• 公開（公告）日: 2015-09-09
• 發(fā)明（設計）人: 辜正隆
• 申請（專利權）人: 江蘇恒豐科技有限公司
• 主分類號: C12N1/00
• 分類號: C12N1/00;C02F11/02;C02F3/30;C09K17/00;C09K101/00
• 代理公司: 南京正聯(lián)知識產權代理有限公司 32243
• 代理人: 郭俊玲

技術領域

本發(fā)明屬于微生物生態(tài)學領域，具體涉及一種用于污泥處理的綜合微生物的培養(yǎng)方法。

背景技術

綜合微生物是由大自然中萃取而出，具有強力分解有機物質的特性，不會受到環(huán)境的影響，也不影響環(huán)境。氨氣、硫化氫、甲基硫醇等造成惡臭的物質皆會被微生物吸收分解。適用溫度范圍廣，且可以抑制病原性大腸菌增加的功效也已經獲得公共設施的認可。綜合微生物的作用原理是：綜合微生物內含有多種微生物群，針對有機廢棄物有強烈的分解消化能力，可以將有機物分解成二氧化碳、水和各種無機鹽。另外，綜合微生物會交互作用將造成環(huán)境惡臭的因子分解成其他沒有異味的物質，因此不僅可以有效的分解有機廢棄物同時也可以消除環(huán)境惡臭。

因此，現在需要開發(fā)一種能夠快速穩(wěn)定繁殖綜合微生物的培養(yǎng)方法。

發(fā)明內容

本發(fā)明要解決的技術問題是是，提供一種極短的時間內，可培養(yǎng)出大量的污水和污泥等處理過程中所需要的微生物，且所培養(yǎng)的微生物菌類穩(wěn)定并使處理效果達到最好綜合微生物的培養(yǎng)方法。

為解決上述技術問題，本發(fā)明采用的技術方案是：該綜合微生物的培養(yǎng)方法，包括以下步驟：

（1）前期準備：

（A）滅菌處理：分別對實驗操作空間、操作者衣著和手進行清潔和消毒；對培養(yǎng)桶槽和培養(yǎng)皿進行滅菌處理；

（B）制備Biolite水：取大于預定培菌體積的自來水置入干凈桶槽內；在所述桶槽內加入Biolite絲光細粉；于所述桶槽內導入曝氣，曝氣方式為連續(xù)曝氣，曝氣時間為不小于24h；曝氣完成后靜置3~5天，并測定水中的金屬離子的含量，直至水中的金屬離子含量為零后待用；

（C）檢查設備和材料：觀察培菌桶槽的外觀是否完整無破損，排水孔洞的蓋子是否旋緊；檢查曝氣設備是否安裝完成，曝氣設備以及其閥門是否正常工作；檢查培菌所需的材料的種類和數量是否正確；

（2）按比例配制培養(yǎng)材料，所述培養(yǎng)材料包括MOLT原生菌液、SOFT生菌粉體、Biolite絲光細粉、光合成菌液GPB、Biolite水和有機營養(yǎng)物；

（3）導入曝氣，進行繁殖培養(yǎng)：將步驟（2）中的培養(yǎng)材料放入培養(yǎng)桶槽，并在培養(yǎng)桶內加入營養(yǎng)物質，所述營養(yǎng)物質包括碳源、氮源、無機鹽類及水源；培養(yǎng)基的PH值為6~10，培菌室的溫度為0~60℃；曝氣方式為連續(xù)曝氣和微曝氣，首先進行連續(xù)曝氣，連續(xù)曝氣的時間至少為7天；連續(xù)曝氣完成后，再進行微曝氣，微曝氣時間至少24h；后續(xù)培養(yǎng)的過程中，可以根據菌種繁殖的狀況進行連續(xù)曝氣與微曝氣輪換曝氣；從而得到繁殖的MOLT菌液；

（4）取液觀察：

（a）取液：取出所述步驟（3）中得到的繁殖的MOLT菌液，待用；

（b）稀釋菌液：將步驟（a）中所取出的待用的MOLT菌液，分別取出等量的3份，分別加入生理鹽水稀釋為1000倍、10000倍和100000倍，得到三種不同比例的稀釋菌液；

（c）平板培養(yǎng)：將步驟（b）中的三種不同比例的稀釋菌液用針筒分別取出等量的稀釋菌液放入3個具有培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，將接種環(huán)在酒精燈火焰上灼燒直至燒紅，在酒精燈火焰旁冷卻接種環(huán)，將接種環(huán)伸入平板內，按“之”字形劃線，使菌液均勻分布，蓋上培養(yǎng)皿蓋，不要劃破培養(yǎng)基；將平板倒置放在培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)溫度為30~40℃，培養(yǎng)時間至少為24h；觀察并拍攝照片記錄不同培養(yǎng)時間下的各種菌的菌種和菌相；

（5）分離并檢測：同時將步驟（3）中得到的繁殖的MOLT菌液采用DGGE?電泳設備進行分離并檢測，并分析圖譜；

（6）取液儲存：當觀察發(fā)現步驟（3）中的菌液中菌數達到標準，取出培養(yǎng)桶槽內菌液總重量的6~8%的菌液進行放置保存，然后在按比例添加培養(yǎng)材料至培養(yǎng)桶槽內，使菌液總重量維持不變；同時將曝氣方式改為連續(xù)曝氣，連續(xù)曝氣時間至少為24h，連續(xù)曝氣完成后，再進行微曝氣，并重復步驟（4）和步驟（5），直至觀察發(fā)現菌液中菌數達到標準，則重復步驟（6）的上述操作。