[發明專利]一株*降解菌及其應用

有效

• 申請號: 201510097223.9
• 申請日: 2015-03-05
• 公開（公告）號: CN104673725B
• 公開（公告）日: 2018-10-26
• 發明（設計）人: 朱宜;秦偉;謝恩;鄭蕾;丁愛中;豆俊峰
• 申請（專利權）人: 北京師范大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;B09C1/10;C12R1/01
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了屬于生物降解處理技術領域的一株對具有降解功能的菌株。降解菌經鑒定為人蒼白桿菌Ochrobactrum?anthropi?DW1，菌種保藏號為CGMCC?No.8621。將該菌株制成含菌量為1.25×10⁸CFU/ml的菌懸液，對初始濃度為0.14mg/L的在7天后的降解去除率為56.2％。

技術領域

本發明屬于受污染土壤與水的生物降解處理技術領域，特別涉及一株降解菌。

背景技術

多環芳烴(Polycyclic Aromatic Hydrocarbons，PAHs)是一類含有兩個或兩個以上苯環，以線狀、角狀或簇狀排列的稠環型化合物，具有疏水性、低溶解度、低蒸汽壓、高熔點和沸點、辛醇-水分配系數高等特性。多環芳烴類化合物具有強烈的致癌作用、致畸作用和致突變作用，一般來說，2～3環的低分子量PAHs具有顯著的急性毒性，而某些高分子量的PAHs具有潛在的致癌性。由于PAHs分子中存在共軛大π鍵電子體系，因此具有較高的穩定性，其光解作用和生物降解作用緩慢，能夠通過各種環境介質長距離遷移并長期存在于環境中，通過環境蓄積、生物蓄積、生物轉化或化學反應等方式損害健康和環境，已引起各國環境科學家的高度重視。美國環保局早在80年代就已把16種未帶分支的PAHs確定為環境中的優先污染物，我國也把PAHs列入環境污染的黑名單中。生物降解是實現恢復PAHs污染環境的最有效手段之一，常見的具有降解PAHs功能微生物有假單胞菌屬(Pseudomonas)、鞘氨醇單胞菌屬(Sphingomonas)、紅球菌屬(Rhodococcus)、分枝桿菌屬(Mycobacterium)、芽抱桿菌屬(Bacillus)、黃桿菌屬(Flavobacterium)、氣單胞菌屬(Aeromonas)、拜葉林克氏菌屬(Beijernckia)、棒狀桿菌屬(Corynebaeterium)、藍細菌(Cyanobacteria)、微球菌屬(Micrococcus)、諾卡氏菌屬(Nocardia)和弧菌屬(Vibrio)等。

然而由于缺少高效的多環芳烴降解菌，制約了多環芳烴污染土壤生物修復技術的進一步發展和應用。因此，需要從污染的環境中馴化篩選出對多環芳烴降解速率較快的微生物菌種，然后再把它們應用于實際PAHs污染環境的生物治理，這對于治理和修復多環芳烴污染土壤有重要的意義。

發明內容

本發明提供一株降解菌。所用菌株經鑒定為人蒼白桿菌Ochrobactrumanthropi DW1，2013年12月20日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，該中心位于北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，菌種保藏號為CGMCC No.8621。將該菌株制成含菌量為1.25×10⁸CFU/ml的菌懸液，可用于環境中的降解。

從污染土壤中分離純化所述降解菌的步驟如下：

(1)選取受石油污染的土壤，將其通過直徑為2mm的網篩后立即放置于4℃冰箱中保存備用。

(2)向體積為1000mL的開口玻璃瓶中加入25～30mL濃度為1g/L的的丙酮混合溶液，為除去丙酮將玻璃瓶開口放置2天。

(3)向步驟(2)中開口玻璃瓶中加入500～600mL基礎培養基，在轉速為100r/min的條件下攪拌40～50min后加入步驟(1)中的土壤250g；然后置于溫度為25～30℃的環境中在轉速為100r/min的條件下攪拌富集馴化培養30d，在培養期間定期向玻璃瓶中加入基礎培養基以維持玻璃瓶中泥漿系統的水土比例保持不變；其中基礎培養基的組成為：NH₄Cl：1.5g·L^-1，KH₂PO₄：1.5g·L^-1，MgCl₂：0.25g·L^-1，CaCl₂·2H₂O：0.10g·L^-1。