[發明專利]一種葉酸和細菌纖維素共同修飾的羧化石墨烯氧化物及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 201510084472.4
• 申請日: 2015-02-16
• 公開（公告）號: CN104623675B
• 公開（公告）日: 2017-12-19
• 發明（設計）人: 應漢杰;何林姣;莊偉;吳菁嵐;周精衛;陳勇;朱晨杰;陳小春
• 申請（專利權）人: 南京工業大學
• 主分類號: A61K47/38
• 分類號: A61K47/38;A61K47/04;A61K47/22;A61P35/00;A61K31/337
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙)32204
• 代理人: 肖明芳

技術領域

本發明屬于抗癌藥物靶向傳遞技術領域，具體涉及一種葉酸和細菌纖維素共同修飾的石墨烯氧化物及其制備方法與應用。

背景技術

目前癌癥已成為威脅人類健康的頭號殺手，其診斷與治療方法引起了醫學和生物界的廣泛關注。治療癌癥的方法主要是采用化學藥物治療，但是化療藥物在遏制了腫瘤組織生長的同時，對周圍正常組織會產生嚴重的毒副作用，給病患帶來極大的痛苦。因此，醫學界探索出一種定向給藥的載體系統，克服了傳統化學藥物治療對正常組織產生嚴重毒副作用，且對腫瘤靶向治療效果不明顯的缺點。其中，非共價藥物載體具有良好的緩釋效果、能夠降低藥物的毒副作用、不會破壞藥物結構等優點，而成為靶向給藥的優良載體。非共價藥物載體包括脂質體、無機納米粒子、囊泡以及碳納米材料等。石墨烯氧化物一種碳納米材料，由于其材料成本低、合成方便、與含共軛基團藥物非共價作用力強、載藥量大以及生物相容性好、低毒性等優點成為當前研究的熱門載體材料。

但是，石墨烯氧化物用于生物醫藥領域仍舊存在一定的細胞毒性，因此需對其進行生物相容性修飾以進一步降低潛在的細胞毒性。目前用于生物相容性修飾的材料有很多，無機化合物包括金、銀、鈀、銅、鉑等金屬納米粒，氧化鋅、四氧化三鐵、二氧化錫、氧化鈷、氧化錳、氧化銅等金屬氧化物納米粒，硅、介孔生物活性玻璃等非金屬納米粒子，有機化合物包括聚乳酸-羥基乙酸納米微球、聚乳酸納米微球、脂質體、明膠納米球、微凝膠聚乙二醇胺、聚多巴胺、纖維素等有機高分子納米粒。

發明內容

本發明需要解決的技術問題是提供一種葉酸和細菌纖維素共同修飾的羧化石墨烯氧化物。

本發明還要解決的技術問題是提供上述葉酸和細菌纖維素共同修飾的羧化石墨烯氧化物的制備方法。

本發明最后要解決的技術問題是提供上述葉酸和細菌纖維素共同修飾的羧化石墨烯氧化物作為藥物載體在制備抗癌納米復合物中的應用。

為解決以上技術問題，本發明采用如下技術方案：

一種葉酸和細菌纖維素共同修飾的羧化石墨烯氧化物的制備方法，該方法包括以下步驟：

(1)細菌纖維素修飾的羧化石墨烯氧化物的制備：

(1a)將羧化石墨烯氧化物溶解于水中，超聲處理，得到納米羧化石墨烯氧化物的分散液；

(1b)將步驟(1a)得到的納米羧化石墨烯氧化物的分散液與細菌纖維素發酵培養基以體積比1:5～10比例混合，得到含有納米羧化石墨烯氧化物的細菌纖維素發酵培養基；

(1c)將細菌纖維素生產菌接種到步驟(1b)得到的含有納米羧化石墨烯氧化物的細菌纖維素發酵培養基中，然后發酵，發酵結束后，離心收集上清，再對上清超濾處理，得到純凈的細菌纖維素修飾的石墨烯氧化物溶液；

(2)葉酸和細菌纖維素共同修飾的石墨烯氧化物的制備：

(2a)向步驟(1c)得到的細菌纖維素修飾的石墨烯氧化物水溶液中加入葉酸溶液，其中，葉酸溶液與細菌纖維素修飾的石墨烯氧化物水溶液的比例為10～200:1，攪拌均勻，得到混合體系a；

(2b)向步驟(2a)得到的混合體系a中加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽，再超聲處理，得到混合體系b；

(2c)向步驟(2b)得到的混合體系b中加入N-羥基磺?；牾啺封c鹽，得到混合體系c，用濃鹽酸溶液調節pH為7.0～8.0，在室溫下避光攪拌，得到葉酸和細菌纖維素共同修飾的石墨烯氧化物粗品；

(2d)將步驟(2c)得到的葉酸和細菌纖維素共同修飾的石墨烯氧化物粗品過濾，然后水洗，得到葉酸和細菌纖維素共同修飾的石墨烯氧化物純品。

其中，步驟(1a)中，所述的納米羧化石墨烯氧化物的分散液，其中納米羧化石墨烯氧化物的濃度為0.1～1.0mg/ml，優選為0.5～1.0mg/ml，最優選為1mg/ml。

步驟(1a)所述的超聲處理，其超聲條件為300～600W超聲0.5～2小時。

其中，步驟(1b)中，所述的細菌纖維素發酵培養基的配方為：甘露醇50～100g/L、大豆蛋白胨5～9g/L、十二水磷酸氫二鈉4～8g/L及醋酸3～5g/L，溶劑為水，pH為5～8。

其中，步驟(1c)中，所述的細菌纖維素生產菌為木葡糖醋酸桿菌。

其中，步驟(1c)中，所述的發酵，其發酵條件為溫度25～30℃，優選28～30℃，發酵時間為1～12h，優選1～3h。

其中，步驟(1c)中，所述的細菌纖維素修飾的石墨烯氧化物水溶液，其中細菌纖維素修飾的石墨烯氧化物的濃度為0.1～1.0mg/ml，優選為0.5～1.0mg/ml。