[發明專利]含金剛烷胺和利巴韋林的雞肉基體標準物質及其制備方法

在審

• 申請號: 201510080515.1
• 申請日: 2015-02-14
• 公開（公告）號: CN104596824A
• 公開（公告）日: 2015-05-06
• 發明（設計）人: 劉正才;楊方;呂小玲
• 申請（專利權）人: 福建出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28;G01N30/06;G01N30/02
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 林文弘

技術領域

本發明屬于獸藥殘留檢測的動物源性食品基體標準物質技術領域，更具體涉及一種含金剛烷胺和利巴韋林的雞肉基體標準物質及其制備方法。

背景技術

金剛烷胺（amantadine）又稱金剛胺、三環癸胺，CAS號：768-94-5，分子量；151.2487。利巴韋林（Ribavirin）化學名稱為：1-B-D-呋喃核糖基-1H-1，2，4-三氮唑-3-羧酰胺，又名三氮唑核苷、病毒唑。

金剛烷胺和利巴韋林均為人用主要抗病毒類藥物，目前還沒有專門針對抗動物病毒的藥物，市場上大部分藥物都是人用抗病毒藥物移植獸用，鑒于人用抗病毒藥物移植獸用存在抗藥性以及殘留等問題，許多國家都禁止使用抗病毒類藥物用來預防和治療雞、豬流感等病毒性疾病。2006年美國FDA發布新規，禁止金剛烷胺抗流感病毒藥品用于禽類；加拿大等國也因為金剛烷胺的抗藥性等問題，建議不將其用于禽類流感的預防和治療；日本也加強了對此類藥物的監控；中華人民共和國農業部公告第560號中明確規定抗病毒藥物為禁用獸藥，其中包括：金剛烷胺，利巴韋林等。但是，近年來，抗病毒藥已擴大應用于其他領域，如畜禽、商業養殖、水產業等，養殖企業為了防治病毒感染和經濟效益，在動物養殖過程中違禁使用抗病毒藥物時有發生，對消費者健康和對外貿易均產生很大危害。根據央視報道，40天“速成雞”的飼養過程中，濫用藥物的情況令人觸目驚心！其中就有使用金剛烷胺、利巴韋林等的報道。基于抗病毒類藥物目前在我國水產和畜禽養殖中的濫用狀況，對動物源性食品中抗病毒類藥物殘留進行質量控制非常有必要，除了開展對此類藥物進行殘留監控與代謝研究，有效的檢測抗病毒藥物殘留方法是監督控制抗病毒類藥物濫用的關鍵。

在獸藥殘留分析中，分析基體多樣性和本身的差別使得在分析過程中不能簡單地采用傳統的純品標準物質來校準或進行質量控制，需要采用基體標準物質兩類標準物質以滿足要求，包括證明檢測工作與所要求的標準操作程序相符或參加能力驗證中、校準儀器、用于質量控制、解決分析中遇到的問題以及保證結果的準確。歐洲委員會對標準物質有明確定義，歐盟有關農、獸藥殘留檢測的法規性文件均提到了要采用標準物質作為質量控制手段，對檢測方法進行驗證；因此標準物質對于獸藥殘留分析是十分重要的。另外，現有的殘留分析質量控制手段多采用基質加標的形式，這種形式存在基質差異大、目標化合物結合狀態不一樣等缺陷，據現有的研究表明，利巴韋林在動物和人體肝臟內主要以原藥、單磷酸酯、二磷酸酯和三磷酸酯等形式存在，這就使得對這類化合物的分析質量控制難度加大。因此，本專利采用喂食原藥而使肉雞自然污染的方式制備一批含金剛烷胺和利巴韋林的雞肉基體標準物質，該標準物質的目標物結合狀態與實際檢測樣完全一致。

發明目的

本發明的目的是提供一種含金剛烷胺和利巴韋林的雞肉基體標準物質及其制備方法。該基體標準物質含合適濃度的金剛烷胺和利巴韋林的雞肉自然污染基體（目標物結合狀態與實際檢樣完全一致）的實物標樣，可作為實物標樣在日常檢測工作中用于建立分析方法、確定實驗準確度與精密度及在檢測質量控制，使用方便、濃度適中、品質好。

為實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

一種含金剛烷胺和利巴韋林的雞肉基體標準物質：金剛烷胺和利巴韋林的濃度均為7～13μg/kg。

一種制備如權利要求1所述的含金剛烷胺和利巴韋林的雞肉基體標準物質的方法，包括以下步驟：

1）采用含金剛烷胺和利巴韋林的水對肉雞進行口服喂養，當肉雞肌肉中金剛烷胺和利巴韋林經代謝后濃度變為7～13μg/kg時，停止喂藥；

2）將步驟1）喂養合格的活雞進行宰殺，取雞前胸肉，搗碎組織、勻漿后過四分篩；

3）真空包裝、封口、貼標簽；

4）輻照滅菌，制得成品，0-4℃冰箱中儲存。

所述的步驟1）中具體的喂養方法為：選取體重0.95~1.05?kg的肉雞200只，每次給藥劑量為利巴韋林?6g/100?kg水，金剛烷胺?3g/100?kg水，每日給藥1次，連續給藥4日，停藥后第3天取樣。

所述的步驟2）中勻漿具體為：將搗碎的雞肉置于勻漿機中，3000rpm?轉速攪成醬樣并勻漿5min；以4kg/次的雞肉量攪拌3次，混合后再攪拌3次；再采用拍擊式均質器進行二次混勻：將樣品裝入拍擊袋，置于拍擊式均質器中，按180拍/min的頻率，每次拍擊5?min后取出，再進行更換拍擊，如此反復拍擊3次。