[發明專利]一種高原肺水腫診斷標志物及其應用和診斷試劑盒

有效

• 申請號: 201510070567.0
• 申請日: 2015-02-11
• 公開（公告）號: CN104614462A
• 公開（公告）日: 2015-05-13
• 發明（設計）人: 譚光國;吳紅;任謙;王玉琨;黃嵐;郭黎;楊鐵虹;辛春艷
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第四軍醫大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 西安創知專利事務所 61213
• 代理人: 譚文琰

技術領域

本發明屬于生物醫學技術領域，具體涉及一種高原肺水腫診斷標志物及其應用和診斷試劑盒。

背景技術

高原肺水腫是指機體因高原低壓性缺氧引起的肺動脈壓突然升高、肺血容量增加、肺微循環障礙，導致液體滲漏至肺間質和肺泡而引起的一種高原特發病。當前高原肺水腫的臨床診斷主要通過病人體征檢查、胸部X線、CT、磁共振等影像學手段，這些手段都依賴臨床醫師的經驗。目前仍然缺少可量化的、客觀靈敏的臨床診斷指標。也未見有應用診斷標志物診斷高原肺水腫的相關報道，若能篩選出高原肺水腫的診斷標志物，并研制相應的診斷試劑盒，必將改善高原肺水腫的診斷現狀。

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于針對上述現有技術的不足，提供一種高原肺水腫診斷標志物。該診斷標志物通過聯合C8-神經酰胺、鞘氨醇和谷氨酰胺可建立高原肺水腫的診斷指標，對高原肺水腫進行準確、快速的診斷。

為解決上述技術問題，本發明采用的技術方案是：一種高原肺水腫診斷標志物，其特征在于，包括C8-神經酰胺、鞘氨醇和谷氨酰胺。

另外，本發明還提供了一種上述高原肺水腫診斷標志物在制備高原肺水腫診斷試劑中的應用。

進一步的，本發明提供了一種高原肺水腫診斷試劑盒，其特征在于，包括C8-神經酰胺、鞘氨醇和谷氨酰胺三種標志物的標準品。

上述的一種高原肺水腫診斷試劑盒，其特征在于，還包括用于診斷高原肺水腫的診斷模型：

其中W_{C8-神經酰胺}代表離子質譜檢測的血漿樣本中C8-神經酰胺的峰面積，W_鞘氨醇代表離子質譜檢測的血漿樣本中鞘氨醇的峰面積，W_谷氨酰胺代表離子質譜檢測的血漿樣本中谷氨酰胺的峰面積，W_總代表離子質譜檢測的血漿樣本中所有化合物的峰面積之和，P代表檢測的血漿樣本的患病概率。

本發明與現有技術相比具有以下優點：

1、本發明提供了用于高原肺水腫的診斷標志物，通過聯合C8-神經酰胺、鞘氨醇和谷氨酰胺可建立高原肺水腫的診斷指標，對高原肺水腫進行準確、快速的診斷。

2、本發明提供了用于診斷高原肺水腫的診斷試劑盒，并通過Logistic回歸分析建立了高原肺水腫的診斷模型，采用該診斷試劑盒能夠準確判斷高原肺水腫，診斷結果準確度高，為高原肺水腫的診斷提供了可量化的、客觀靈敏的臨床診斷指標。

下面結合附圖和實施例，對本發明技術方案做進一步的詳細說明。

附圖說明

圖1為本發明實施例1中某一血漿樣本的代謝指紋圖譜。

圖2為本發明實施例1中經過主成分分析的得分圖。

圖3為本發明實施例1高原肺水腫組和健康對照組的PLS-DA得分圖。

圖4為本發明實施例1高原肺水腫組和健康對照組的S-Plot圖。

圖5為本發明實施例1的高原肺水腫對血漿代謝物代謝通路重要性的影響圖。

圖6為本發明實施例2的受試者工作曲線。

圖7為本發明實驗例2的P值的分布圖。

圖8為本發明實施例3的受試者工作曲線。

圖9為本發明實驗例3的P值的分布圖。

具體實施方式

實施例1

診斷標志物的篩選：

(1)血漿樣本收集：收集高原肺水腫患者血漿樣本35例作為高原肺水腫組，所有高原肺水腫患者都是首次從平原快速進駐高原，因高原低壓性缺氧而引起的肺水腫，正常健康對照血漿樣本35例作為健康對照組，健康對照組為首次從平原進入高原，7天內未發高原反應和其他相關疾病的同齡健康人；將收集到的血漿樣本冰凍保存(-80℃)；

(2)血漿樣本預處理：血漿樣本凍融后取100μL，加入400μL甲醇，渦旋1min，然后置于冰水浴中超聲提取10min，4℃下14000g離心15min，棄上清，沉淀在室溫下氮氣吹干后用100μL乙腈和水的混合溶劑復溶(乙腈和水的體積比為7:3)，4℃下14000g離心10min吸取上清進樣；