[發(fā)明專利]基于納米金催化顯色體系的pH及尿素的測定方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510069325.X
• 申請日: 2015-02-10
• 公開（公告）號: CN104677897B
• 公開（公告）日: 2017-06-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳偉;鄧豪華;吳鋼偉;彭花萍;林逢林
• 申請（專利權(quán)）人: 福建醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78
• 代理公司: 福州智理專利代理有限公司35208
• 代理人: 王義星

1.一種基于納米金催化顯色體系的pH測定方法，其特征是將不同pH的濃度為10 mmoL/L的磷酸緩沖液、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30%的過氧化氫、濃度為16 mmoL/L的 3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽與納米金溶液按體積比為13：4：1：2混合，37°C溫浴10分鐘后，立即加入0.2 mL、體積分?jǐn)?shù)為 20%的硫酸溶液終止反應(yīng)，目視觀察顏色特征或測定吸光度值A(chǔ)₄₅₀，當(dāng)目視觀察顏色特征時，隨著pH的增大，顯色體系的顏色逐漸由深黃色變?yōu)榈S色；當(dāng)測定吸光度值A(chǔ)₄₅₀時，隨著pH的增大而吸光度值A(chǔ)₄₅₀逐漸減小，在6.40~6.60 的pH值范圍內(nèi)吸光度值A(chǔ)₄₅₀與pH呈線性關(guān)系；所使用的納米金采用檸檬酸三鈉還原法制得：1毫升0.1 g/L的氯金酸溶液溶解于100毫升水中，回流加熱煮沸后迅速加入3毫升0.1 g/L的檸檬酸三鈉溶液，反應(yīng)溶液由從淺黃色變成酒紅色，繼續(xù)回流15分鐘后，將反應(yīng)溶液慢慢冷卻至室溫，所得的納米金粒徑為13 nm，濃度為3.1 nmoL/L，4 °C保存。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于納米金催化顯色體系的pH測定方法，其特征是所述磷酸緩沖液、過氧化氫、3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽與納米金溶液混合后的總體積為1 mL。

3.一種基于納米金催化顯色體系的尿素測定方法，其特征是將脲酶溶液加入到0.6 mL含不同濃度尿素的濃度為10 mmoL/L，pH=6.40的磷酸緩沖液中，搖勻后37°C溫浴30分鐘，反應(yīng)結(jié)束后，加入0.2 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 30%的過氧化氫溶液、0.05 mL濃度為16 mmoL/L的3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽溶液和0.10 mL納米金溶液，混合均勻后37°C溫浴10分鐘，立即加入0.2 mL 體積分?jǐn)?shù)為20%的硫酸溶液終止反應(yīng)，測定吸光度值A(chǔ)₄₅₀，隨著尿素濃度的增大顯色體系的A₄₅₀值逐漸減小，在0.02~0.4 mmoL/L濃度范圍內(nèi)，顯色體系的A₄₅₀值與尿素濃度呈線性關(guān)系，檢測限為0.005 mmoL/L；所使用的納米金采用檸檬酸三鈉還原法制得：1毫升0.1 g/L的氯金酸溶液溶解于100毫升水中，回流加熱煮沸后迅速加入3毫升0.1 g/L的檸檬酸三鈉溶液，反應(yīng)溶液由從淺黃色變成酒紅色，繼續(xù)回流15分鐘后，將反應(yīng)溶液慢慢冷卻至室溫，所得的納米金粒徑為13 nm，濃度為3.1 nmoL/L，4 °C保存。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的基于納米金催化顯色體系的尿素測定方法，其特征是所使用的脲酶溶液的體積為0.05 mL，濃度為18 U/mL。

5.一種基于納米金催化顯色體系的人尿液中尿素測定方法，包括如下步驟：取新鮮人尿液，調(diào)節(jié)pH至6.40后，用10 mmoL/L，pH=6.40的磷酸緩沖液稀釋400倍，取0.1 mL稀釋液加入到0.5 mL濃度為10 mmoL/L，pH=6.40的磷酸緩沖液中，再加入0.05 mL 18 U/mL的脲酶溶液，搖勻后37°C溫浴30分鐘，反應(yīng)結(jié)束后，加入0.2 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 30%的過氧化氫溶液、0.05 mL濃度為16 mmoL/L的3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽溶液和0.10 mL納米金溶液，混合均勻后37°C溫浴10分鐘，立即加入0.2 mL體積分?jǐn)?shù)為 20%的硫酸溶液終止反應(yīng)，測定吸光度值A(chǔ)₄₅₀，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量，獲得尿液中的尿素含量。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的基于納米金催化顯色體系的人尿液中尿素測定方法，其特征是所使用的納米金采用檸檬酸三鈉還原法制得：1毫升0.1 g/L的氯金酸溶液溶解于100毫升水中，回流加熱煮沸后迅速加入3毫升0.1 g/L的檸檬酸三鈉溶液，反應(yīng)溶液由從淺黃色變成酒紅色，繼續(xù)回流15分鐘后，將反應(yīng)溶液慢慢冷卻至室溫，所得的納米金粒徑為13 nm，濃度為3.1 nmoL/L，4 °C保存。