[發(fā)明專利]一種由肝素鈉粗品生產(chǎn)依諾肝素鈉的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510056905.5
• 申請(qǐng)日: 2015-02-03
• 公開（公告）號(hào): CN104558252B
• 公開（公告）日: 2017-06-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉建芬;任風(fēng)芝;張雪霞;段寶玲;李寧;魏松波;陳書紅;李麗紅;張靜巖;高任龍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 華北制藥華坤河北生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): C08B37/10
• 分類號(hào): C08B37/10
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生化原料藥生產(chǎn)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種由肝素鈉粗品生產(chǎn)依諾肝素鈉的方法。

背景技術(shù)

依諾肝素鈉是一種低分子肝素鈉鹽，通過對(duì)豬腸粘膜來(lái)源的肝素的芐基酯衍生物進(jìn)行堿解聚而獲得。由一系列未能完全定性的復(fù)雜寡糖組成，非還原端主要由4-烯醇式吡哺糖醛酸組成，15％～25％的組分在還原端包含有1，6-脫水衍生物結(jié)構(gòu)。其重均分子量為3800～5000。按干燥品計(jì)算，抗Xa因子活性效價(jià)為90IU/mg～125IU/mg，抗IIa因子效價(jià)為20.0IU/mg～35.0IU/mg，抗Xa因子效價(jià)與抗IIa因子效價(jià)比為3.3～5.3。依諾肝素鈉的抗凝作用與天然肝素相當(dāng)或更優(yōu)，而出血的發(fā)生比應(yīng)用天然肝素更少，加之生物利用度高，因而備受臨床青睞。目前依諾肝素鈉已用于預(yù)防靜脈栓塞性疾病(防止靜脈內(nèi)血栓形成)，特別是與某些手術(shù)有關(guān)的栓塞；治療深靜脈栓塞，伴或不伴有肺栓塞；治療不穩(wěn)定性心絞痛及非Q波心梗，與阿司匹林同用；用于血液透析體外循環(huán)中，防止血栓形成等。

目前國(guó)內(nèi)外對(duì)依諾肝素鈉的制備方法較多，大多采用直接從肝素鈉通過成鹽、酯化、氧化、超濾、干燥等步驟獲得[CN102050888B、CN 103342761A]。在生產(chǎn)過程中，肝素鈉的質(zhì)量對(duì)依諾肝素鈉終產(chǎn)品有很大影響。這是因?yàn)楦嗡剽c分子結(jié)構(gòu)異常復(fù)雜，分子量難以固定，不同工藝來(lái)源的肝素鈉直接影響依諾肝素的產(chǎn)品質(zhì)量。依諾肝素鈉的結(jié)構(gòu)與組成比較復(fù)雜，在結(jié)構(gòu)確認(rèn)和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制上存在一定的不確定性，因而起始原料和生產(chǎn)過程的研究與控制就必須嚴(yán)格，且原料對(duì)后期依諾肝素鈉成品的分子量分布有直接影響。因此開發(fā)從肝素鈉粗品直接生產(chǎn)依諾肝素鈉的新工藝可以從源頭和工藝控制原料質(zhì)量，更有效保證產(chǎn)品質(zhì)量。在此前提下，盡可能降低能耗、減少環(huán)保壓力仍是本領(lǐng)域技術(shù)人員需要解決的問題。CN102603925B提供一種由肝素鈉粗品直接生產(chǎn)依諾肝素鈉的方法，肝素鈉粗品先經(jīng)醇沉、氧化、醇沉得到沉淀物，此沉淀物用于制備依諾肝素鈉；該沉淀物經(jīng)成鹽、酯化、降解、樹脂、氧化、醇沉，最后溶解過濾、噴霧干燥得依諾肝素鈉成品。該方法中的肝素鈉除雜步驟僅依靠有機(jī)溶劑的使用和采用氧化，不利于獲得高質(zhì)量的終產(chǎn)品；由肝素鈉沉淀物制備依諾肝素鈉時(shí)，在醇沉步驟即可去除硫酸根，而專利中使用樹脂去除硫酸根，步驟繁瑣。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服上述不足之處，提供一種從肝素鈉粗品直接生產(chǎn)依諾肝素鈉的制備工藝，生產(chǎn)周期短、生產(chǎn)耗能低、產(chǎn)品質(zhì)量高的制備方法。本發(fā)明以肝素鈉粗品為原料，采用鹽解工藝進(jìn)行預(yù)處理，然后加入過氧化氫，經(jīng)離子交換樹脂吸附、洗滌、洗脫，最后經(jīng)超濾、凍干得肝素鈉精品，肝素鈉精品再經(jīng)成鹽、酯化、解聚、氧化、醇沉、凍干處理得到依諾肝素鈉。工藝簡(jiǎn)單易行，適于工業(yè)化規(guī)模生產(chǎn)。

下面對(duì)本發(fā)明方法進(jìn)行以下具體描述：

一種由肝素鈉粗品生產(chǎn)依諾肝素鈉的方法，該方法包括以下步驟：

1)肝素鈉精品的制備：肝素鈉粗品用純化水溶解后加入氯化鈉，同時(shí)調(diào)節(jié)pH值為8.5～9.0，進(jìn)行鹽解，鹽解液離心，得肝素鈉預(yù)處理液；所得肝素鈉預(yù)處理液溫度降至28～32℃，加入雙氧水，然后加至強(qiáng)堿型陰離子交換樹脂柱中吸附、洗滌、洗脫，收集肝素鈉洗脫液；洗脫液調(diào)節(jié)pH值至5.5～6.0后經(jīng)超濾、凍干得到肝素鈉精品；

2)成鹽：將肝素鈉精品溶于純化水制成肝素鈉精品水溶液，將芐索氯銨溶于純化水制成芐索氯銨水溶液，將兩種溶液以1∶2～3∶4的體積比混合后在室溫進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后離心，洗滌沉淀物、干燥得肝素季銨鹽；

3)酯化：將肝素季銨鹽用二氯甲烷溶解后加入氯化芐，在30～35℃下進(jìn)行酯化，酯化結(jié)束后冷卻至室溫，加入甲醇沉淀，分離沉淀并用甲醇洗滌、干燥得肝素芐酯；

4)解聚：肝素芐酯用水溶解，向溶液中加入氫氧化鈉，在50～60℃下進(jìn)行解聚反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束加入甲醇沉淀，分離沉淀得肝素解聚產(chǎn)物；

5)氧化：肝素解聚產(chǎn)物用純化水溶解，調(diào)節(jié)pH為8.5～10.0，加入雙氧水進(jìn)行氧化脫色；

6)醇沉、凍干：將氧化脫色后的溶液用甲醇沉淀，分離沉淀，沉淀用純化水溶解后凍干得依諾肝素。

其中步驟1)中所述純化水，純化水加入體積和肝素鈉粗品重量的比為8～10ml/g；所述氯化鈉加入量和純化水用量體積的比為1/100～2/100g/ml；鹽解溫度為50℃～60℃，鹽解時(shí)間為2～3小時(shí)。

其中步驟1)中所述雙氧水，加入量為肝素鈉預(yù)處理液體積的1％～2％，為體積與體積比。