[發明專利]一種從甜菊葉中分離甜菊苷(Stevioside)的工藝

在審

• 申請號: 201510040882.9
• 申請日: 2015-01-23
• 公開（公告）號: CN104876982A
• 公開（公告）日: 2015-09-02
• 發明（設計）人: 余祖兵;周建海;冒小云;王海芹;顧丹彤;顧和英
• 申請（專利權）人: 南通海天生物科技有限公司
• 主分類號: C07H15/256
• 分類號: C07H15/256;C07H1/08
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• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于食品添加劑領域，涉及一種從甜菊葉中分離甜菊苷(Stevioside)的工藝。

背景技術

甜菊糖苷(俗稱甜菊糖)是一類天然的低熱量的高倍甜味劑，從原產南美巴拉圭東北部的菊科小灌木甜葉菊(Stevia?rebaudiana?bertoni)的葉子中提取而得，其甜度是蔗糖的250-300倍，而熱量僅為蔗糖的1/250左右。20世紀50年代，人工苗圃栽培和大田移植甜葉菊獲得成功后，被日本、馬來西亞、中國、韓國、阿根廷、巴拉圭和巴西等20多個亞洲和拉美國家批準使用。中國衛生部頒布的食品添加劑使用衛生標準規定甜菊糖苷的使用范圍為糖果、糕點、飲料等食品，最大使用量按生產需要適量使用。1999年國家制訂出甜菊糖苷標準(GB8270-1999)，進一步確認和保證了甜菊糖苷可作為食品添加劑應用于食品。甜菊糖是繼甘蔗糖甜菜糖之外第三種有開發價值和健康推崇的天然蔗糖替代品，被國際上譽為“世界第三蔗糖”。2010年，聯合國糧農組織和世界衛生組織聯合食品添加劑專家委員會(JECFA)已批準純度不低于95％的甜菊糖苷可作為食品甜味劑使用。

目前為止，已從甜葉菊中分離得到8種不同甜度的糖苷分別為：甜菊糖苷(Stevioside)(St)、甜菊醇雙糖苷(Steriobioside)(SBio)、萊鮑迪A苷(Rebaudioside?A)(RA)、萊鮑迪B苷(Rebaudioside?B)(RB)、萊鮑迪C苷(Rebaudioside?C)(RC)、萊鮑迪D苷(Rebaudioside?D)(RD)、萊鮑迪E苷(Rebaudioside?E)(RE)、杜爾可苷A(Dulcoside?A)(DA)。高純度的甜菊糖苷為白色結晶，甜度為蔗糖的250-300倍。在甜菊糖苷化合物中，甜菊苷(ST)的含量最高，約占甜葉菊干葉的6％-8％；萊鮑迪A苷與其它糖苷相比，它的甜度最高，約為蔗糖的300-400倍。在生產高純度萊鮑迪A苷(Rebaudioside?A)(RA)的同時產生大量含甜菊糖苷(Stevioside)(St)的母液，因此對ST分離的研究具有非常重要的意義，能降低生產成本，提高經濟效益。

甜菊葉浸提液中除了含有甜菊苷外，還含有各種色素、蛋白質、膠體等眾多雜質。傳統純化甜菊糖苷工藝包括絮凝劑去雜澄清、大孔樹脂吸附甜菊糖苷、陰/陽離子交換樹脂脫色、脫鹽等工序。該工序的不足之處為：(1)添加絮凝劑引入了新雜質，在后續工藝中需要去除，同時沉淀物會吸附一部分甜菊糖苷，降低了收率。(2)脫鹽脫色樹脂的再生消耗大量的酸、堿和水。總的來說，目前甜菊糖苷提取純化過程仍然存在成本較高、產生的廢棄物較多、耗水、耗能較高問題。

發明內容

本發明的目的在于提供一種直接從甜菊葉中分離甜菊苷(Stevioside)的工藝，具有工藝簡單、成本低廉，提取物中甜菊苷(Stevioside)的純度高的特點。利用本發明公開的工藝能夠取代傳統工藝中的絮凝劑預處理、離子交換柱脫鹽等步驟，三廢排放大為減少，工藝綠色環保，制得的甜菊苷(Stevioside)的純度達到95％以上，適合工業化生產。

從甜菊葉中分離甜菊苷(Stevioside)的工藝，其分離過程包括以下步驟：

1、原料粉碎：將甜菊葉用粉碎機粉碎過10目篩，得甜菊葉粗粉。

2、提取、過濾：甜菊葉粗粉加入水50-80℃攪拌提取三次，合并三次提取液，過300目布袋過濾器，得澄清的提取濾液。

3、吸附分離：將提取濾液上大孔吸附樹脂，吸附飽和后，停止上料，先水洗，再用50-85％乙醇解吸，收集解吸液。

4、濃縮、結晶：將解吸液減壓濃縮至投料量的2-3倍，加入95％乙醇結晶5-12小時。

5、離心分離：將結晶料用離心機離心，95％乙醇淋洗，得ST粗品。

6、上中性氧化鋁脫色純化：將ST粗品用95％乙醇溶解，溶解液過中性氧化鋁，再用95％乙醇淋洗，得脫色純化液。

7、上硅膠再次純化：將脫色純化液拌硅膠濃縮至干，加入到空白硅膠上，用乙酸乙酯：異丙醇梯度洗脫，HPLC跟蹤分析，收集含ST的料液。

8、濃縮、重結晶：將含ST的料液濃縮至小體積，加入異丙醇結晶24-48小時。

9、離心：將結晶好的物料用離心機離心，得ST濕品沉淀。

10、干燥：將ST濕品加水溶解，經噴霧干燥制得ST干品。

11、粉碎過篩：將ST干品粉碎，過80目篩，得ST成品。

附圖說明

圖1為ST樣品HPLC圖譜。