[發明專利]TFPR1蛋白及其編碼基因與其在免疫調節中的應用

有效

• 申請號: 201510027664.1
• 申請日: 2015-01-20
• 公開（公告）號: CN104592363B
• 公開（公告）日: 2018-06-05
• 發明（設計）人: 寇志華;周育森;孫維來;楊裔;郭晶晶;于虹;郭彥;李軍鋒
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事醫學科學院微生物流行病研究所
• 主分類號: C07K14/00
• 分類號: C07K14/00;C12N15/11;C12N15/63;A61K38/16;A61K39/39;A61K39/00;A61P37/02
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;白艷

本發明公開了一種TFPR1蛋白及其編碼基因與其在免疫調節中的應用。本發明提供了一種蛋白質，是如下(a)或(b)或(c)：(a)由序列表中序列2所示的氨基酸序列組成的蛋白質；(b)由序列表中序列2自N末端第13?157位氨基酸序列組成的蛋白質；(c)將(a)或(b)所示的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由(a)或(b)所示的氨基酸序列衍生的蛋白質；以及該蛋白及衍生物作為免疫調節活性蛋白和佐劑的應用。本發明的實驗證明，TFPR1是一種具有免疫調節活性的蛋白，有望作為新型佐劑應用與疫苗的研發與生產。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，尤其涉及TFPR1蛋白及其編碼基因與其在免疫調節中的應用。

背景技術

疫苗接種是預防傳染病的最有效的途徑。傳統疫苗主要包括減毒活疫苗和滅活疫苗，新型疫苗包括亞單位疫苗(subunit vaccine)、結合疫苗、合成肽疫苗、基因工程疫苗。新型疫苗純度高、特異性強，但分子小，免疫原性相對較差，難以產生有效的免疫應答，需要佐劑來增強其免疫原性或宿主對抗原的保護性應答。由于機體對不同病原體的保護性免疫應答是不同的，研發能誘導針對不同病原保護性應答的疫苗需要不同的佐劑。一直廣泛應用于人群疫苗的、美國FDA批準的鋁鹽佐劑對于許多新型疫苗佐劑活性較差，尤其是其誘導的細胞免疫較弱，對于小分子的抗原無佐劑活性，不能滿足新型疫苗發展的需要。

新型疫苗佐劑的組成形式多樣,來源也不同,主要包括油/水乳劑型、顆粒型、微生物衍生物型佐劑等。迄今為止,已批準上市的新型疫苗佐劑僅有少數幾種:MF59、AS04等。MF59是一種由Chiron公司研發的水包油乳劑,在高壓條件下將鯊烯與Tween-80和Span 85混合后進行微流化,進而形成均一的小滴狀乳液，已在歐洲國家批準用于流感亞單位疫苗。該佐劑比鋁鹽具有更好的免疫效果，但不良反應增加。AS04是2005年2月葛蘭素史克公司研發的，是一種乳劑，其新型佐劑系統AS04的乙型肝炎疫苗Fendrix獲歐盟批準上市,安全性良好,但臨床報道的局部不良反應與其他乙肝疫苗類似,包括注射部位疼痛、頭痛和疲乏。這些油/水乳劑型的佐劑都在著較明顯的不良反應。尋找一種需要劑量低、安全、有效的佐劑具有重要意義。

Triflin是蛇毒中的一種主要成分，屬于CAP家族蛋白，主要由兩個部分組成，即N端的PR-1結構域及C端富含半胱氨酸結構域(cysteine-rich domain，CRD)，二者之間由特定的連接區(hinge region)組成。C-端的CRD區Cys在進化上十分保守，可形成8對二硫鍵，其中的10個Cys聚集于C端三分之一處，形成一個結構緊湊、功能重要的結構域，可能與阻斷離子通道相關等功能相關。N端由進化高度保守的結構域PR-1組成，最初是在植物中發現，與植物抵抗各種病原生物感染密切相關，隨后發現該保守結構廣泛分布于各種生物中，功能不清。

發明內容

本發明的一個目的是提供一種蛋白質。

本發明提供的種蛋白質，命名為TFPR1，是如下(a)或(b)或(c)：

(a)氨基酸序列為序列表中序列2的蛋白質；

(b)氨基酸序列為序列表中序列2第13-157的蛋白質；

(c)將(a)或(b)所示的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由(a)或(b)所示的氨基酸序列衍生的蛋白質。

上述一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加為不超過10個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加。

上述序列表中的序列2由157個氨基酸殘基組成。為了使1)中的TFPR1便于純化，可在其氨基末端或羧基末端連接上如表1所示的標簽，但不限于如下標簽。

表1為標簽的序列