[發明專利]一種生物比色傳感器，其制備方法以及用途

在審

• 申請號: 201510020927.6
• 申請日: 2015-01-15
• 公開（公告）號: CN104535568A
• 公開（公告）日: 2015-04-22
• 發明（設計）人: 王廣鳳;江紅
• 申請（專利權）人: 安徽師范大學
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78
• 代理公司: 蕪湖安匯知識產權代理有限公司 34107
• 代理人: 馬榮

技術領域

本發明涉及二維納米材料二氧化錳納米片/DNA基礎的生物比色傳感器技術領域，具體涉及構建基于二維納米材料模擬酶活性和DNA對于二維納米材料二氧化錳納米片模擬酶活性的抑制作用而構建的比色傳感器用于對各種生物分子的檢測。

背景技術

21世紀是生命科學的世紀，對DNA的研究是生命科學研究中的一個極其重要的方面，DNA生物傳感器的研究已成熱點。目前各種方式用于檢測生物分子，二維納米材料的出現為DNA基傳感器注入了強大的生命力，將二維納米材料和DNA基傳感器的結合是時代的產物。二維二氧化錳納米片由于其好的水溶性、優異的生物兼容性、易于修飾等性能已被開始研究。因此，應用二維二氧化錳納米片構筑高效分子識別界面具有潛在的優勢。

發明內容

本發明的目的在于提供一種生物比色傳感器，其制備方法以及用途。具體涉及二氧化錳納米片/DNA基礎的生物比色傳感器，利用二氧化錳納米片具有模擬酶活性和ssDNA對于二氧化錳納米片模擬酶活性的抑制作用，應用于對各種生物分子(HBV?gene,Thrombin,Tolemerase)的檢測。利用ssDNA可以抑制二氧化錳納米片模擬酶活性的特性和dsDNA以及其他的二級結構的DNA可以遠離而恢復二氧化錳納米片模擬酶的特性構建了生物比色傳感器，應用二維二氧化錳納米片構筑高效分子識別界面構建的二氧化錳納米片/DNA生物比色傳感器應用于各種目標生物分子的檢測。具體技術方案如下：

一種生物比色傳感器的制備方法，包括如下步驟：

(1)將DNA序列(P₃，Thrombin-binding?aptamer，P₄)溶解在緩沖溶液中，使用之前對P₃，Thrombin-binding?aptamer，P₄進行培養；

(2)對所用的物質配置成相應的濃度；

(3)將處理過得P₃，Thrombin-binding?aptamer和P₄放在溶液中進行培養，形成生物比色傳感器。

進一步地，步驟(1)中，緩沖溶液為pH7.4的PBS緩沖溶液。

進一步地，步驟(1)中，DNA序列溶解在緩沖溶液中后在低溫下下保存備用；使用之前將P₃，Thrombin-binding?aptamer，P₄于80-90℃加熱10分鐘后自然冷卻到室溫培養一段時間。

進一步地，步驟(2)中，所用的物質包括二氧化錳納米片，thrombin,TMB。

進一步地，步驟(3)中，將處理過得P₃，Thrombin-binding?aptamer和P₄放在步驟(2)得到的溶有一定濃度二氧化錳納米片的溶液中。

進一步地，步驟(3)中，在室溫下培養5min。

進一步地，步驟(3)中，利用DNA之間的堿基二氧化錳納米片表面的范德華吸附作用形成二氧化錳納米片/DNA基礎的生物比色傳感器。

一種生物比色傳感器，采用上述的生物比色傳感器的制備方法制得。

進一步地，其為二氧化錳納米片/DNA基礎生物比色傳感器。

上述的生物比色傳感器的用途，進一步地，用于對生物分子(HBV?gene,Thrombin,Tolemerase)的檢測。

與目前現有技術相比，本發明提供了基于二氧化錳納米片/DNA基礎的生物比色傳感器，及其應用于對各種生物分子(HBV?gene,Thrombin,Tolemerase)的檢測，本發明使用二氧化錳納米片具有模擬酶活性和ssDNA對于二氧化錳納米片模擬酶活性的抑制作用,制備出基于二氧化錳納米片/DNA基礎的生物比色傳感器，利用DNA對于二氧化錳納米片模擬酶的可調節特性，傳感器實現了對各種生物分子(HBV?gene,Thrombin,Tolemerase)靈敏性、特異性的檢測。

具體來說，本生物比色傳感器的制備方法，使用的是無標記的DNA,操作簡單，成本很低，避免任何化學標記和修飾結果顯示此傳感器對各種生物分子(HBV?gene,Thrombin,Tolemerase)的檢測結果令人滿意，且具有操作簡單，靈敏度高，檢測限低的特點。

附圖說明

圖1為抑制二氧化錳納米片模擬酶活性的最佳濃度

圖2A為各種物質存在條件下的紫外光譜圖