[發明專利]pVAX-PTX3真核表達載體、構建方法及所表達的PTX3蛋白對豬鏈球菌2型的抗菌應用

在審

• 申請號: 201510017612.6
• 申請日: 2015-01-13
• 公開（公告）號: CN104561079A
• 公開（公告）日: 2015-04-29
• 發明（設計）人: 姚火春;許崛瓊;潘子豪;王曉輝;榮杰;宋文超
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: C12N15/79
• 分類號: C12N15/79;C12N15/66;A61K48/00;A61K38/17;A61P31/04;C07K16/28;C07K16/06
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤

技術領域

本發明屬于豬鏈球菌病防控研究技術領域，涉及pVAX-PTX3真核表達載體、構建方法及所表達的PTX3蛋白對豬鏈球菌2型的抗菌應用。

背景技術

Pentraxins是一個具有多功能的蛋白質家族，包括短pentraxins蛋白和長pentraxins蛋白。PTX3蛋白是第一個被確認的長正五聚蛋白^[1，2]，與經典的短正五聚蛋白-C反應蛋白和血清淀粉樣蛋白p復合物同屬于可溶性識別受體(PRMs)^[3，4]。PTX3主要來源于髓樣樹突狀細胞，但還有多種細胞可表達PTX3，包括成纖維細胞、血管內皮細胞、單核細胞、巨噬細胞、平滑肌細胞、腎上皮細胞、滑膜細胞、軟骨細胞、脂肪細胞和肺泡上皮細胞等。

PTX3最先被研究的功能是其可以綁定在某些病原體上，研究還發現PTX3還可以識別分生孢子A煙曲霉、某些革蘭氏陽性和革蘭陰性細菌(如金黃色葡萄球菌，銅綠假單胞菌，肺炎克雷伯氏菌，鼠傷寒沙門氏菌)和一些病毒株^[5-7]，但PTX3不能識別白色念珠菌或伯克氏菌。有研究發現，PTX3還具有調理素活性，通過Fcγ受體II(FcγRII)和補體依賴途徑可提高中性粒細胞識別和吞噬分生孢子。并且通過與FcγRIIA/CD32的結合，PTX3可激活CD11b和增強細胞對煙曲霉分生孢子的吞噬能力。PTX3也可參與抵抗一些病毒感染的過程，研究表明PTX3可分別與人類和小鼠巨細胞病毒(HCMV和MCMV)結合，從而減少在體外環境下病毒對樹突狀細胞的感染。因此，PTX3^-/-小鼠對病毒的感染比野生型小鼠出現較高的敏感性，并且用重組的PTX3治療可降低病毒的滴度。此外，PTX3可保護感染MCMV(小鼠巨細胞病毒)的小鼠不受煙曲霉菌的入侵，并分別提高了樹突狀細胞和T細胞中IL-12和IFN-γ的產生。

豬鏈球菌(Streptococcus?suis，SS)是一種革蘭氏陽性菌，依據莢膜多糖抗原的不同，可分為35個血清型(1～34型和1/2型)^[8，9]，其中豬鏈球菌2型(Streptococcus?suis?2，SS2)流行區域最廣，感染宿主譜最寬，毒力最強，是一種重要的人畜共患病病原^[10，11]。豬鏈球菌不僅導致、致豬發病出現敗血癥、肺炎、關節炎、腦膜炎、肺炎、心內膜炎等癥狀，還會引起斷奶仔豬或育肥豬的突然死亡^[12，13]。豬鏈球菌病的爆發頻繁，給養豬業帶來了巨大損失，已經成為一種嚴重影響養豬業發展的重要病原菌之一^[14]。但是至今，我們對于豬鏈球菌的致病機理還不十分清楚，目前對豬鏈球菌2型的致病機理和毒力因子的研究還不是十分透徹，所以對豬鏈球菌2型仍缺乏行之有效的防治方法。

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