[發明專利]用于梭菌轉化的組合物和方法無效
| 申請號： | 201480045794.1 | 申請日： | 2014-06-20 |
| 公開（公告）號： | CN105518130A | 公開（公告）日： | 2016-04-20 |
| 發明（設計）人： | M·C·斯科謝爾;D·H·韋爾斯 | 申請（專利權）人： | 丹尼斯科美國公司 |
| 主分類號： | C12N9/10 | 分類號： | C12N9/10 |
| 代理公司： | 北京市中咨律師事務所 11247 | 代理人： | 黃革生;林柏楠 |
| 地址： | 美國加利*** | 國省代碼： | 美國;US |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 用于 轉化 組合 方法 | ||
1.一種分離的多核苷酸，所述多核苷酸與SEQIDNO:1具有至少90％ 的序列同一性，其中所述多核苷酸編碼具有甲基轉移酶活性的多 肽。
2.根據權利要求1所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸是SEQIDNO: 2。
3.根據權利要求1所述的多核苷酸，其中所述所編碼的多肽在包含 CCWGG的序列處使多核苷酸甲基化。
4.根據權利要求3所述的多核苷酸，其中所述包含CCWGG的序列選 自CCAGG(SEQIDNO:9)和/或CCTGG(SEQIDNO:10)。
5.根據權利要求1所述的多核苷酸，其中所述所編碼的多肽在SEQID NO:9和/或SEQIDNO:10處使多核苷酸甲基化。
6.一種包含根據權利要求1-5中任一項所述的多核苷酸的質粒，所述多 核苷酸可操作地連接至一種或多種控制序列，使得所述所編碼的多 肽能夠在表達宿主中表達。
7.根據權利要求6所述的質粒，其中所述表達宿主是大腸桿菌(E. coli)。
8.根據權利要求6所述的質粒，其中所述質粒還包含SEQIDNO:14。
9.根據權利要求6-8中任一項所述的質粒，其中所述質粒轉化到大腸桿 菌(E.coli)S17-1細胞。
10.一種包含根據權利要求1-5所述的多核苷酸中的任一者的重組宿主細 胞。
11.一種包含根據權利要求5-8所述的質粒中的任一者的重組宿主細胞。
12.一種分離的多肽，所述多肽包含與SEQIDNO:3具有至少90％的序 列同一性的氨基酸序列，其中所述多肽能夠在包含CCWGG的序列 處使多核苷酸甲基化。
13.根據權利要求12所述的多肽，其中所述多肽能夠在包含SEQID NO:9和/或SEQIDNO:10的序列處使多核苷酸甲基化。
14.根據權利要求12所述的多肽，其中所述多肽能夠在SEQIDNO:9 和/或SEQIDNO:10處使多核苷酸甲基化。
15.一種分離的多肽，所述多肽包含與SEQIDNO:3具有至少90％的序 列同一性的氨基酸序列，其中所述多肽能夠在包含CCWGG的序列 處使多核苷酸甲基化。
16.根據權利要求15所述的多肽，其中所述多肽能夠在包含SEQID NO:9和/或SEQIDNO:10的序列處使多核苷酸甲基化。
17.根據權利要求15所述的多肽，其中所述多肽能夠在SEQIDNO:9 和/或SEQIDNO:10處使多核苷酸甲基化。
18.根據權利要求15所述的多肽，其中所述多肽是SEQIDNO3。
19.一種由根據權利要求1-5所述的多核苷酸中的任一者生成的分離的多 肽，其中所述多肽具有甲基轉移酶活性。
20.一種生成DNA甲基轉移酶的方法，所述方法包括：(a)培養重組宿主 細胞，所述重組宿主細胞包含根據權利要求1-5中任一項所述的多核 苷酸，所述培養在合適的條件下進行，以生成所述所編碼的DNA甲 基轉移酶，以及(b)回收所述DNA甲基轉移酶。
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