[發(fā)明專利]基于親和力檢測配體編碼的合成性生物標(biāo)記物在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201480044141.1 | 申請日： | 2014-06-06 |
| 公開（公告）號： | CN105452481A | 公開（公告）日： | 2016-03-30 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | S·N·巴哈蒂亞;D·K·伍德;G·A·黃;A·D·瓦爾林;K·Y·林 | 申請（專利權(quán)）人： | 麻省理工學(xué)院 |
| 主分類號： | C12Q1/37 | 分類號： | C12Q1/37;C12Q1/25;C12Q1/34;C07K14/00;A61K38/36;A61K38/39;A61K49/00;A61M37/00;A61K9/70;B82Y5/00 |
| 代理公司： | 中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專利商標(biāo)事務(wù)所 11038 | 代理人： | 韓威威 |
| 地址： | 美國馬*** | 國省代碼： | 美國;US |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 基于 親和力 檢測 編碼 成性 生物 標(biāo)記 | ||
1.一種方法，其包括：
向受試者施用生物標(biāo)記物納米粒子，其中生物標(biāo)記物納米粒子包含具有與酶敏感可檢測標(biāo)記物連接的載體結(jié)構(gòu)域的模塊結(jié)構(gòu)，其中酶敏感可檢測標(biāo)記物由連接于可檢測標(biāo)記物的酶敏感結(jié)構(gòu)域組成，其中可檢測標(biāo)記物能夠在暴露于酶時(shí)從生物標(biāo)記物納米粒子釋放并且其中可檢測標(biāo)記物包含由接頭連接的捕獲配體和檢測配體；
確定用于檢測標(biāo)志物的生物樣品，其中生物樣品在這樣的身體部位處，所述身體部位遠(yuǎn)離其中可檢測標(biāo)記從生物標(biāo)記物納米粒子釋放的身體部位；并且
使用捕獲測定法分析生物樣品以檢測可檢測標(biāo)記物的存在，其中可檢測標(biāo)記物在生物樣品中的存在表示酶以活性形式存在于受試者中。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中捕獲配體與酶敏感結(jié)構(gòu)域連接。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中檢測配體與酶敏感結(jié)構(gòu)域連接。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中捕獲測定法涉及捕獲配體與親和劑結(jié)合。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中捕獲配體是蛋白質(zhì)、肽、多糖、核酸、熒光分子或小分子。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中捕獲配體是生物素并且親和劑是鏈霉親和素。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中接頭是聚合物如PEG、蛋白質(zhì)、肽、多糖、核酸或小分子。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中接頭是10-100個(gè)氨基酸長度的蛋白質(zhì)或肽。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中接頭是GluFib(SEQIDNO.1)。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中檢測配體是蛋白質(zhì)、肽、多糖、核酸、熒光分子或小分子。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中檢測配體或捕獲配體選自鏈霉親和素、Alexa488、TAMRA、DNP、熒光素、俄勒岡綠、德克薩斯紅、丹磺酰、BODIPY、Alexa405、瀑布藍(lán)、螢光黃、硝基酪氨酸、HA標(biāo)簽、FLAG標(biāo)簽、His標(biāo)簽、Myc標(biāo)簽、V5標(biāo)簽、S標(biāo)簽、生物素。
12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中捕獲測定法涉及選自ELISA，包括熒光ELISA、比色ELISA、生物發(fā)光ELISA和化學(xué)發(fā)光ELISA，試紙條法、基于珠的熒光測定法和無標(biāo)記物檢測如表面等離子體共振(SPR)的檢測步驟。
13.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中親和劑選自抗體、抗體片段、適配體、與Ab綴合的磁珠、親和柱上的蛋白質(zhì)或肽。
14.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中親和劑固定在表面上。
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述表面是珠。
16.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中親和劑處于溶液中。
17.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中將生物標(biāo)記物納米粒子靜脈內(nèi)、經(jīng)口、經(jīng)皮或通過植入物施用。
18.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，載體是蛋白質(zhì)、肽或多糖。
19.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，載體是合成聚合物。
20.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，酶是癌癥相關(guān)酶。
21.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中酶是蛋白酶或糖苷酶。
22.根據(jù)權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)所述的方法，還包括從受試者采集生物樣品，其中生物樣品是尿、血液、唾液或粘液分泌物。
23.根據(jù)權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)所述的方法，其中將具有多個(gè)酶敏感可檢測標(biāo)記物的多個(gè)生物標(biāo)記物納米粒子施用至受試者。
24.根據(jù)權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)所述的方法，其中生物標(biāo)記物納米粒子具有多個(gè)酶敏感可檢測標(biāo)記物。
25.根據(jù)權(quán)利要求24所述的方法，其中多個(gè)酶敏感可檢測標(biāo)記物包含多個(gè)捕獲配體和單一類型的檢測配體。
26.根據(jù)權(quán)利要求24所述的方法，其中多個(gè)捕獲配體包括2-1000個(gè)不同的捕獲配體。
27.根據(jù)權(quán)利要求24所述的方法，其中多個(gè)捕獲配體包括2-100個(gè)不同的捕獲配體。
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