[發明專利]多肽的酶促偶聯

在審

• 申請號: 201480044047.6
• 申請日: 2014-06-20
• 公開（公告）號: CN105517577A
• 公開（公告）日: 2016-04-20
• 發明（設計）人: D·貝爾根;P·丹勒;C·貝爾蒙特;L·戈捷;F·羅馬涅;E·費舍爾;R·斯科博勒
• 申請（專利權）人: 先天制藥公司;保羅·謝勒研究所
• 主分類號: A61K47/48
• 分類號: A61K47/48
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 趙蓉民;張全信

1.一種使疏水性、高分子量或帶電有機化合物偶聯至抗體的方法，其包括以下步驟：

a)提供包含接受體谷氨酰胺殘基的抗體或抗體片段；

b)使所述抗體與包含伯胺的連接試劑和所關注的部分(Z)反應，其中(Z)為疏水性化合 物、帶電有機化合物和/或具有至少500、700或800g/mol的分子量的有機化合物，在TGase存 在下，在足以獲得包含經由所述連接試劑連接至所述所關注的部分(Z)的接受體谷氨酰胺 的抗體的條件下進行，其中所述反應混合物不含有機溶劑或含有小于10％(v/v)，任選地進 一步小于5％、4％、3％或2％(v/v)的有機溶劑。

2.一種使疏水性、高分子量或帶電有機化合物偶聯至抗體的方法，其包括以下步驟：

a)提供在重鏈的位置297(EU編號)處包含谷氨酰胺殘基并且在位置295(EU編號)處缺 乏接受體谷氨酰胺的抗體或抗體片段；

b)使所述抗體與包含伯胺的連接試劑和所關注的部分(Z)反應，其中(Z)為疏水性化合 物、帶電有機化合物和/或具有至少500、700或800g/mol的分子量的有機化合物，在TGase存 在下，在足以獲得包含經由所述連接試劑連接至所述所關注的部分(Z)的接受體谷氨酰胺 的抗體的條件下進行。

3.一種使疏水性、高分子量和/或帶電有機化合物偶聯至抗體的方法，其包括以下步 驟：

a)提供具有至少一個接受體谷氨酰胺殘基的抗體；以及

b)使所述抗體與包含伯胺的連接子和反應基團(R)反應，在TGase存在下，在足以獲得 包含經由所述連接子連接至反應基團(R)的接受體谷氨酰胺的抗體的條件下進行，其中所 述反應混合物不含有機溶劑或含有小于10％(v/v)或含有小于5％、4％、3％或2％(v/v)的 有機溶劑；以及

(c)在有機溶劑存在下，任選地在至少2％、3％、4％、5％或10％(v/v)的有機溶劑存在 下，使以下反應：

(i)包含經由包含伯胺的連接子連接至反應基團(R)的接受體谷氨酰胺的步驟(b)的抗 體，與

(ii)包含所關注的部分(Z)和能夠與反應基團R反應的反應基團(R′)的化合物，其中 (Z)為疏水性化合物、帶電有機化合物和/或具有至少500、700或800g/mol的分子量的有機 化合物，

在足以獲得包含經由包含伯胺的連接子連接至所關注的部分(Z)的接受體谷氨酰胺的 抗體的條件下進行。

4.如權利要求4所述的方法，其中抗體包含人類重鏈和輕鏈恒定區，其中所述重鏈恒定 區包含N297Q取代和Q295X取代，其中X為除谷氨酰胺之外的任何氨基酸。

5.如權利要求1至2或4所述的方法，其中獲得式IVa的抗體或組合物。

6.如權利要求3至4所述的方法，其中獲得式IVb的抗體或組合物。

7.一種抗體，其通過如前述權利要求中任一項所述的方法產生。