[發明專利]生產低內毒素的殼聚糖的方法

在審

• 申請號: 201480036368.1
• 申請日: 2014-05-29
• 公開（公告）號: CN105408359A
• 公開（公告）日: 2016-03-16
• 發明（設計）人: C·哈迪;安德魯·霍加思;瓊·格萊德曼
• 申請（專利權）人: 醫療行業產品有限公司
• 主分類號: C08B37/08
• 分類號: C08B37/08;A61L15/28;A61K31/722
• 代理公司: 北京派特恩知識產權代理有限公司 11270
• 代理人: 張穎玲;胡春光

技術領域

本發明涉及一種生產低內毒素的堿性殼聚糖的方法，并且還涉及一種生產低內毒素的中性殼聚糖、低內毒素的中性殼聚糖鹽和低內毒素的中性殼聚糖衍生物的方法，以及涉及上述方法的產品。

背景技術

殼聚糖在制備用于控制出血的止血材料中是尤其有用的。

殼聚糖是來自水生貝殼類動物加工的固體廢棄物的衍生物，并且能夠從真菌培養物中提取。殼聚糖是非水溶性陽離子聚合材料。在將殼聚糖用于止血材料之前，通常首先將其轉化成水溶性鹽。這樣一來，殼聚糖鹽就能夠溶解在血液中從而形成阻滯血流的凝膠。

由于殼聚糖在體內容易分解，所以殼聚糖鹽非常適用于本文所述的應用。殼聚糖通過溶菌酶而轉化為葡萄糖胺，并且因此自然地從體內排出。從而不需要從體內移除殼聚糖。此外，殼聚糖鹽表現出適度的抗菌性，從而它們的使用降低了感染的風險。

為了將殼聚糖用于制備適用于控制出血的止血材料，必須確保殼聚糖具有足夠低濃度的內毒素。

內毒素是存在于革蘭氏陰性菌的外膜的表面上的脂多糖。內毒素對哺乳動物，尤其是對人的毒性很強，并且眾所周知地難以從材料中移除。當內毒素釋放至血液或通常未發現內毒素的其它組織時，內毒素可成為熱原。因此，必須從藥學上可接受的產品中移除內毒素。

對熱原進行處理以移除或破壞致熱原(尤其是內毒素)被稱為“去致熱原”的方法。用于含內毒素的材料的去致熱原的技術包括離子交換層析、超濾、蒸餾以及旨在破壞內毒素的各種化學方法。

WO2008063503涉及一種從殼聚糖中移除內毒素的方法，所述方法包括以下步驟：

a)在無菌環境中利用無菌無致熱原的設備和材料；

b)使含內毒素的殼聚糖溶脹長達24小時；

c)使1kg/25L至1.5kg/25L的殼聚糖溶解在0.01M至4.0M的氫氧化物的堿中；

d)連續地攪拌所得到的殼聚糖堿溶液；

e)在60℃～100℃加熱并攪拌上述溶液45分鐘至4小時

f)利用高達10倍體積的無內毒素超純水漂洗上述溶液；

g)對上述溶液進行中和至6.8至7.5之間的pH；

h)形成低內毒素的超純殼聚糖漿液，將其轉移至無內毒素的封閉系統；

i)從上述漿液中移除過量的水。

這是復雜且昂貴的方法，特別是需要無菌設備，并且需要用10倍體積的無內毒素的水溶液進行漂洗。

US2006293509涉及一種制備具有低內毒素的水溶性殼聚糖的方法，包括：

(a)使非水溶性殼聚糖與堿性溶液接觸超過1小時的第一時段；

(b)有利地，利用無內毒素的水漂洗非水溶性殼聚糖以移除殘余的堿性溶液；

(c)在含相轉移劑的反應溶液中，使上述非水溶性殼聚糖部分乙酰化；

(d)使部分乙酰化的水溶性殼聚糖溶解在含表面活性劑且pH為約7.0至約7.4的水性溶液中；

(e)將水混溶性溶劑加入至該水性溶液中，并且進一步將水性溶液的pH調節至至少8.0的pH以導致具有低內毒素含量的水溶性殼聚糖從該水性溶液/水混溶性溶劑混合物中沉淀出來；以及

(f)可選地，用非溶劑(non-solvent)，諸如異丙醇進行清洗。

然而，該方法是復雜且昂貴的，并且預期涉及使用大量的無內毒素的水或其它液體。該方法同樣需要使用相轉移劑，并且耗時幾個小時。

TW593342涉及一種降低殼聚糖中內毒素的方法，所述方法包括：

(a)使含內毒素的殼聚糖溶解在水性溶液中；

(b)使上述水性溶液與表面活性劑接觸以形成不溶性固體和內毒性含量降低的水性溶液；

(c)利用固/液分離手段來分離固體和水性溶液。

然而，該方法需要表面活性劑來與溶解的殼聚糖發生反應以產生不溶性固體。所得到的固體將為殼聚糖和表面活性劑或殼聚糖與表面活性劑之間的反應產物的混合物。

本發明旨在解決上述難題。

發明內容

根據本發明的第一方面，提供了一種生產低內毒素堿性的殼聚糖、低內毒素堿性的殼質或它們的衍生物的方法，所述方法包括以下步驟：

(a)使殼聚糖、殼質、殼聚糖衍生物或殼質衍生物與堿性溶液接觸以形成混合物；以及

(b)使所述混合物放置小于1小時的時段。

本發明的方法可進一步包括對所述混合物進行干燥的步驟(c)。