[發明專利]免疫層析診斷試劑盒

有效

• 申請號: 201480033270.0
• 申請日: 2014-06-09
• 公開（公告）號: CN105283761B
• 公開（公告）日: 2018-02-09
• 發明（設計）人: 堀井厚志;鹽見祥之;小川貴之;松瀬武志;杉野真紀
• 申請（專利權）人: 旭化成株式會社
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/58
• 代理公司: 北京林達劉知識產權代理事務所(普通合伙)11277
• 代理人: 劉新宇,李茂家

技術領域

本發明涉及包含體外診斷藥用樣品墊的免疫層析診斷試劑盒，更詳細而言，涉及側流型的免疫層析診斷試劑盒。

背景技術

近年來，開發出了以短時間進行病毒或細菌等病原體感染的有無、妊娠的有無、腫瘤標記物的有無、食品中的特定原材料或殘留農藥等有害物質的有無等各種檢查的簡易檢查試劑及診斷藥、診斷試劑盒。它們利用了各檢查對象物質以及與檢查對象物質特異地反應的物質所引起的特異性反應。特別是，對于利用抗原與抗體的抗原抗體反應的免疫學測定法來說，開發出了免疫層析測定法、比濁免疫測定法、酶免疫測定法、化學發光測定法、放射免疫測定法、利用表面等離子體共振的測定法等許多測定法。并且，這些測定法被用于醫院、診療所等中的疾病等的檢查、食品公司等中的食物檢查等中。其中，免疫層析測定法具有下述特點：不需要特別的設備、機器、知識，操作也簡便，成本低，能夠迅速診斷，因而正在實施非常多的檢查。近年來，妊娠檢查藥、HIV檢查藥等由一般藥店銷售，普通消費者也能夠進行測定，進而不僅能夠進行對檢查對象物質的有無進行檢查的定性檢查，還能夠進行測定量的定量檢查等。

作為免疫層析測定法的測定原理，有被稱為夾心法的方法及被稱為競爭法的方法。另外，作為測定形式，有被稱為流過(Flow Through)型、側流(Lateral Flow)型的方法。作為待檢體中的檢查對象物質，能夠檢測出各種各樣的物質，作為典型的例子，有通過夾心法檢測出抗原的測定，依次實施下述操作。

(1)將與作為檢查對象物質的抗原特異性結合的抗體固定化于硝酸纖維素膜等層析介質的特定部位，在層析介質的任意位置形成被稱為測試線(以下稱為“TL”)的反應部位。

(2)制備檢測試劑，對結合墊等涂布檢測試劑并干燥，形成檢測試劑含有部，與所述層析介質組合而形成免疫層析診斷試劑盒；所述檢測試劑在酶、顯色顆粒、熒光顯色顆粒、磁性顆粒等標記物質上負載有與檢查對象物質特異性結合的抗體。

(3)在所述免疫層析診斷試劑盒的特定位置例如樣品墊上滴加包含抗原的待檢體本身、或將待檢體用任意液體稀釋而成的溶液，從而使抗原和檢測試劑在層析介質上展開。

通過這些操作，在反應部位，標記物質通過抗原被固定化于層析介質的抗體所捕捉，檢測出標記物質的信號，從而利用免疫層析診斷試劑盒進行診斷。一般的診斷是僅檢查抗原有無的定性診斷，但近年來通過用目視或機械檢測出其信號的強度，從而也能夠進行定量診斷。

對于免疫層析測定法來說，具有使診斷時間迅速化的需求。這是為了縮短檢查的等待時間。作為用于達到該需求的一般性方法，有調節層析介質的孔徑以加快待檢體的轉移速度的方法。

另外，以下的專利文獻1中有下述報道：滴加包含檢查對象物質的待檢體試樣的部分即樣品墊使用特定的纖維素系纖維無紡布，從而能夠使診斷時間迅速化。專利文獻1中還涉及了吸液速度及展開性，但沒有具體的診斷時間的數據，也完全沒有提及與本發明這樣的特定的顯色顆粒的組合。此外也沒有提及對樣品墊與結合墊的配置進行研究。

另外，以下的專利文獻2中有下述報道：通過對診斷試劑盒的結構等進行研究，能夠使診斷時間迅速化，例如，在hCG分析中最短用2分鐘35秒進行判定。

另外，作為免疫層析測定法的其它需求有分析靈敏度的提高。這意味著用更少的檢查對象物質也能夠檢測出來。本發明人等在下述專利文獻3中報道了以下內容：通過使用顏色深、粒徑大的纖維素顆粒作為顯色顆粒，能夠提高分析靈敏度。但是，通過使用顏色深、粒徑大的顯色顆粒，雖然能夠迅速診斷，但沒有具體的診斷時間的數據，也完全沒有提及與本發明這樣的特定的樣品墊的組合。

這樣，通常來說診斷時間的迅速化和分析靈敏度的提高存在折衷的關系，為了兼顧兩者，存在非常大的需求。

另外，在下述專利文獻4中公開了使用免疫層析的半定量的試驗方法，記載了在某個范圍的抗原濃度下使抗原濃度與檢查結果的信號強度成比例。但是，對于免疫層析中的定量來說，除了在某個范圍的抗原濃度下抗原濃度與檢查結果的信號強度成比例外，理想的是具有結果的再現性，即測定相同濃度的抗原時可得到相同強度的信號，但通常來說該再現性尚不充分。

此外，在下述專利文獻5中公開了使用熒光顆粒作為顯色顆粒的免疫層析診斷試劑盒，作為顯色顆粒的原料，舉出纖維素顆粒作為一例，作為樣品墊的原料，舉出纖維素無紡布作為一例，但均未進行任何具體的說明。此外也未對樣品墊與結合墊的配置進行研究。當然，也未記載由本發明這樣的樣品墊與顯色顆粒的組合所產生的效果。

現有技術文獻

專利文獻