[發明專利]抗-TNF-α/CXCL10雙靶向抗體及其應用

在審

• 申請號: 201480029427.2
• 申請日: 2014-05-22
• 公開（公告）號: CN105263964A
• 公開（公告）日: 2016-01-20
• 發明（設計）人: 姜欣濉;樸昭炫;宋永旭;申己澈;李恩榮;李恩奉;樸榮祐;樸范贊;李東熙;金東辰;尹善河;李基世;李炫周;金京珍;金熙贊;劉奭鎬;張明熙;張世佚
• 申請（專利權）人: 美特博利工程實驗室株式會社
• 主分類號: C07K16/46
• 分類號: C07K16/46;A61K39/395
• 代理公司: 北京三友知識產權代理有限公司 11127
• 代理人: 龐東成;張培源

技術領域

本發明涉及與腫瘤壞死因子α(TNF-α)和C-X-C基序趨化因子10(CXCL10)特異性結合的TNF-α/CXCL-10雙靶向抗體及其應用。

相關專利申請

本申請要求于2013年5月22日提交的韓國專利申請10-2013-0057475和10-2013-0057762的優先權和權益，通過參考將其公開內容整體上并入本文。

背景技術

通常而言，抗體通過下述過程形成：將具有高分子量的重鏈多肽與具有低分子量的輕鏈多肽通過二硫鍵連接而形成異二聚體，并再次通過二硫鍵將兩個異二聚體連接而形成四聚體。形成重鏈的多肽由四個域組成，其從N末端起包括可變域、恒定域1、恒定域2和恒定域3，形成輕鏈的多肽由兩個域組成，其從N末端起包括可變域和恒定域。其中，重鏈的可變域與輕鏈的可變域的綴合物與一種抗原結合。

作為用于標記細胞的化學標志物的抗原與針對該抗原的抗體之間的反應顯示出高度特異性。與抗體相互作用的抗原部位稱為抗原決定簇或表位，抗原決定簇與抗體的抗原結合部位(其是可變域)特異性結合。因此，由于抗原結合部位可以僅與一種抗原決定簇結合，許多抗體各自可以提供針對具有特異性決定簇的抗原的獨特免疫性。

抗體在血液中具有高度穩定性和低的免疫原性，因此作為藥物引起關注。這些抗體中，存在能夠識別兩種類型的抗原的雙特異性抗體。雙特異性抗體可以分為兩種主要類型。第一種雙特異性抗體通過重組DNA技術改造而具有能夠與兩種不同抗原結合的抗原結合部位，并且在該情況下，一種結合部位可以對任一抗原具有特異性，另一種可以是對另一抗原具有特異性并且同時與兩種抗原結合(BeckA等,NatRevimmunology10；345-352,2010)。第二種雙特異性抗體是最近開發的正常抗體，其具有一個抗原結合部位和能夠與兩種不同抗原結合的能力，被稱為二合一抗體(two-in-oneantibody)(Bostrom,J等,Science323,1610-1614,2009)。由于此類二合一抗體具有一個抗原結合部位，其可以每次與一種抗原結合，而不是與兩種抗原結合，但是具有與兩種不同抗原結合的能力。二合一抗體具有已經成功地開發的典型抗體的形式，其對于開發非常有利。

由于此類雙特異性抗體可以通過與特定的毒性細胞和靶細胞結合而發揮作用，其具有高度靶標特異性。

隨著對類風濕性關節炎的病理生理學的理解不斷加深，從二十世紀90年代后期起用于通過由新開發的抗風濕藥阻斷高度靶向物質而調節疾病的靶向療法的概念變得重要。結果，由于開發并使用了通過設計發現作為針對特定疾病的靶標并能夠阻斷靶標的物質而形成的生物藥物，它們給治療類風濕性關節炎帶來很大變化。這些藥物代表性地包括白細胞介素-6拮抗劑(妥珠單抗)、CTLA4Ig(阿巴西普)和B細胞耗竭劑(depletingagent)(利妥昔單抗)以及TNF-α抑制劑(依那西普、英夫利昔單抗、阿達木單抗等)和重組白細胞介素-1受體拮抗劑，例如阿那白滯素，并且在臨床上或測試中實際使用。

針對患者中的腫瘤和膿毒癥的TNF-α(腫瘤壞死因子-α)的研究已經從約100年之前開始。TNF-α由巨噬細胞、包括B和T淋巴細胞在內的免疫細胞、非免疫細胞和各種腫瘤細胞產生，并且在正常的生理炎性響應和獲得性或先天性免疫中起重要作用。但是，在諸如類風濕性關節炎等炎性疾病中，當TNF-α不適當地過度產生時，免疫系統的各種細胞被激活從而誘導細胞毒性效應，并且出現諸如炎癥、組織破壞以及器官損傷等反應。TNF-α的主要生物作用是調節各種細胞類型的生長、分化和代謝；刺激脂肪細胞中存在的脂蛋白脂肪酶的脂解和活性的抑制，以及通過刺激肝脂肪生成而誘導惡病質；并且誘導凋亡。TNF-α以游離形式或細胞膜結合形式存在。這兩種形式的TNF-α非常強烈地誘導細胞的炎性響應，并且刺激組織中的疾病狀態。細胞膜結合TNF-α通過細胞間接觸展示細胞毒性和炎性功效，并且通過TNF-α轉化酶(TACE)從細胞膜上脫附，并存在于細胞外。該TNF-α與血液中的兩種受體之一(例如TNFI型受體(p55)或TNFII型受體(p75))結合，由此展示生物活性。臨床上，過度產生的TNF-α產生刺激類風濕性關節炎患者中的巨噬細胞和放大炎性響應的炎性介體，表達附著至血管內皮細胞上的附著分子以使更多的炎性細胞聚集在炎性部位，并且允許成纖維細胞產生蛋白酶，導致軟骨、骨和韌帶損傷，由此使疾病惡化。